[發(fā)明專利]檢測大環(huán)內(nèi)酯類化合物的代謝物的方法和試劑盒

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 202010433868.6
• 申請日: 2020-05-20
• 公開（公告）號: CN111474278B
• 公開（公告）日: 2022-11-01
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 張峰;凌云;王佳;姚美伊
• 申請（專利權(quán)）人: 中國檢驗檢疫科學研究院
• 主分類號: G01N30/06
• 分類號: G01N30/06;G01N30/88
• 代理公司: 北京鼎真知識產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(普通合伙) 11815
• 代理人: 洪波

1.一種檢測大環(huán)內(nèi)酯類化合物的代謝物的方法，其特征在于，包括：

將待測樣品進行提取處理和凈化處理，以便得到待測液；

利用超高效液相色譜與四極桿靜電場軌道阱傅里葉轉(zhuǎn)換聯(lián)用質(zhì)譜聯(lián)用系統(tǒng)進行檢測，以便對所述大環(huán)內(nèi)酯類化合物的 代謝物進行定性分析和/或定量分析，其中，所述超高效液相色譜的色譜柱為C18色譜柱，規(guī)格為2.1×100 mm, 3.5 μm，

其中，所述提取處理包括：

將所述待測樣品與提取劑混合，以便得到第一混合物，所述提取劑為0.05%-0.1%甲酸-乙腈、無水硫酸鎂和氯化鈉的混合物；

將所述第一混合物進行超聲處理，以便得到第二混合物；

將所述第二混合物進行離心處理，以便得到第一上清液，

其中，所述凈化處理是利用凈化劑進行的，所述凈化劑為乙酸鈉、N-丙基乙二胺和C18的混合物，

其中，所述色譜的洗脫劑為A：0.1％甲酸，B：乙腈，

所述色譜的洗脫條件為：10％B，0-1分鐘；10％-98％B，1-15分鐘；98％B，15-20分鐘；98％-10％B，20-21分鐘；10％B，21-25分鐘，

所述代謝物包括：紅霉素A肟、N-去甲基克拉霉素和N-去甲基羅紅霉素。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，所述凈化處理包括：

將所述第一上清液與凈化劑混合，以便得到第三混合物；

將所述第三混合物進行超聲處理，以便得到第四混合物；

將所述第四混合物進行靜置分離，以便得到第二上清液；

將所述第二上清液進行干燥過濾，以便得到所述待測液。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，基于10mL 0.05%-0.15% 甲酸-乙腈，含有300-500mg無水硫酸鎂和1-3g 氯化鈉。

4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，所述凈化劑中，乙酸鈉、N-丙基乙二胺和C18的質(zhì)量比為（10-20）：1：（1-4）。

5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，所述超高效液相色譜的色譜條件包括：

進樣溫度：30℃；

樣品溫度：10℃；

進樣量：5.0 μL；

流量：0.2 mL/min。

6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，所述質(zhì)譜的質(zhì)譜條件包括：

離子源：HESI源；

毛細管溫度：350℃；

噴霧電壓：3.6KV；

鞘氣：40psi；

輔助氣體：10 arb；

加熱器溫度：350℃；

質(zhì)譜檢測方式：Full-ms和dd-ms2。