[發明專利]一種兩性離子修飾樹狀大分子包裹金納米顆粒/HIF-1α siRNA復合物的制備

在審

• 申請號: 202010430439.3
• 申請日: 2020-05-20
• 公開（公告）號: CN111671897A
• 公開（公告）日: 2020-09-18
• 發明（設計）人: 史向陽;楊超;高悅;曹雪雁;肖云超;曹流;宋聰;李錦;劉勇
• 申請（專利權）人: 東華大學;上海市第一人民醫院
• 主分類號: A61K41/00
• 分類號: A61K41/00;A61K31/7088;A61K47/34;A61P35/00;C12N15/87;C08G73/02
• 代理公司: 上海泰能知識產權代理事務所 31233
• 代理人: 魏峯;黃志達

1.一種聚酰胺-胺樹狀大分子復合物，其特征在于，所述復合物為1,3-PS修飾的聚酰胺-胺樹狀大分子包裹金納米顆粒負載HIF-1αsiRNA。

2.一種聚酰胺-胺樹狀大分子復合物的制備方法，包括：

(1)將G5.NH₂水溶液與1,3-PS混合，攪拌，得到G5.NH₂-PS₂₀溶液，其中，G5.NH₂與1,3-PS摩爾比為1:15～1:25；

(2)將HAuCl₄溶液滴加到步驟(1)中G5.NH₂-PS₂₀溶液中，攪拌，加入NaBH₄溶液，繼續反應，透析、冷凍干燥，得到{(Au⁰)₂₅-G5.NH₂-PS₂₀}，其中，G5.NH₂與HAuCl₄溶液中所含Au的摩爾比為1:20～1:30，NaBH₄與HAuCl₄的摩爾比為3:1～5:1；

(3)將步驟(2)中{(Au⁰)₂₅-G5.NH₂-PS₂₀}溶于PBS緩沖溶液中，然后與HIF-1αsiRNA溶液共孵育，得到{(Au⁰)₂₅-G5.NH₂-PS₂₀}/si-HIF-1α，即聚酰胺-胺樹狀大分子復合物，其中，{(Au⁰)₂₅-G5.NH₂-PS₂₀}與HIF-1αsiRNA的N/P為0.25:1～60:1。

3.根據權利要求2所述方法，其特征在于，所述步驟(1)中攪拌溫度為30±2℃，攪拌時間為1-2天。

4.根據權利要求2所述方法，其特征在于，所述步驟(2)中將HAuCl₄溶液滴加到步驟(1)中G5.NH₂-PS₂₀溶液中是在冰浴條件下進行。

5.根據權利要求2所述方法，其特征在于，所述步驟(2)中攪拌時間為13-20min；繼續反應時間為2-4h。

6.根據權利要求2所述方法，其特征在于，所述步驟(2)中透析為：采用截留分子量為500的透析袋，在2L蒸餾水中透析3天，每天換水3次。

7.根據權利要求2所述方法，其特征在于，所述步驟(3)中HIF-1αsiRNA的序列為5’-ATGACATGAAAGCACAGAT-3’；HIF-1αsiRNA溶液的溶劑為DEPC水。

8.根據權利要求2所述方法，其特征在于，所述步驟(3)中共孵育時間為15～30min。

9.一種如權利要求1所述復合物用于基因轉染的方法。

10.一種如權利要求1所述復合物在制備基因治療和放療的聯合治療藥物或放療增敏藥物中的應用。