[發明專利]一種早期快速診斷雞白痢沙門氏菌的試劑盒

在審

• 申請號: 202010429519.7
• 申請日: 2020-05-20
• 公開（公告）號: CN111560449A
• 公開（公告）日: 2020-08-21
• 發明（設計）人: 楊曙明;劉瑞;陳愛亮
• 申請（專利權）人: 中國農業科學院農業質量標準與檢測技術研究所
• 主分類號: C12Q1/689
• 分類號: C12Q1/689;C12Q1/6844;C12Q1/04;C12N15/11;C12R1/42
• 代理公司: 北京紀凱知識產權代理有限公司 11245
• 代理人: 秦夢楠

本發明公開了一種早期快速診斷雞白痢沙門氏菌的試劑盒。本發明提供了一種早期快速診斷雞白痢沙門氏菌的試劑盒，并提供了雞白痢沙門氏菌的快速檢測方法。本發明提供的試劑盒具有操作簡便，抗干擾能力強，靈敏度高，特異性強等優點，還可以實現現場無損傷檢測，無論是家禽養殖場，還是禽產品加工廠，都可以現場及時檢測雞白痢沙門氏菌感染情況，將對公共健康的危害降到最低。本發明對于早期快速診斷雞白痢沙門氏菌有重要意義。

技術領域

本發明涉及生物技術領域，具體涉及一種早期快速診斷雞白痢沙門氏菌的試劑盒。

背景技術

雞白痢沙門氏菌病是由雞白痢沙門氏菌(Salmonellapullorum)引起雞的一種急性、敗血性傳染病，具有高度的適應性或專嗜性，多侵害0～3周齡內的雛雞，多呈慢性或隱性感染，臨床表現為不食、下痢以及器官的壞死性結節等癥狀，造成雛雞急性全身性疾病和高死亡率，給我國養禽業造成了巨大的經濟損失。目前在許多發展中國家,雞白痢沙門氏菌病仍是威脅養禽業的主要細菌傳染病之一。此外雞白痢沙門氏菌病的防治主要采用抗生素治療，抗生素使用過量會導致抗藥性的產生，早期快速無損傷的檢測方法也是抗生素濫用轉為針對病雞精準用藥的關鍵。

目前關于雞白痢沙門氏菌病的檢測方法主要有平板凝集試驗、ELISA、PCR和免疫熒光等，但這些檢測方法存在操作復雜、耗時長和局限性較大等缺點。平板凝集試驗是檢測雞白痢沙門氏菌最經典的血清學方法，但常出現漏檢問題，需要多次重復才能確診；ELISA檢測方法需要借助酶標儀才能讀取結果，假陽性較高；而PCR技術和免疫熒光診斷方法往往對試驗人員要求較高，且需要借助于昂貴的儀器設備才能完成試驗操作，不適合在一些基層單位進行推廣和應用。因此，迫切需要操作簡便、可靠和現場可操作的雞白痢沙門氏菌病的檢測方法。

發明內容

本發明的目的是提供一種早期快速診斷雞白痢沙門氏菌的試劑盒。

第一方面，本發明保護試劑盒；包括試紙條、特異引物對和金標探針；

所述試紙條包括樣品吸收墊、反應膜、吸水墊和底板；沿樣品流動方向，所述樣品吸收墊、所述反應膜、所述吸水墊依次固定于所述底板上；所述試紙條的反應膜上包括檢測區和質控區；所述檢測區包被有鏈霉親和素；所述質控區包被有質控探針；

所述特異引物對由引物F和引物R組成；

所述引物F如SEQ ID No.1所示；所述引物R如SEQ ID No.2所示；

所述引物F采用生物素修飾；所述引物R由區段A和區段B組成；所述區段A和區段B中間采用3個亞甲基修飾；

所述金標探針部分區段可與所述引物R的區段A互補配對，且該區段也可與質控探針互補配對；所述金標探針連接有納米金；

所述質控探針采用生物素修飾；

所述試劑盒的用途為如下(1)或(2)或(3)：

(1)鑒定待測病原菌是否為雞白痢沙門氏菌；

(2)檢測待測樣本中是否含有雞白痢沙門氏菌；

(3)診斷或輔助診斷雞白痢沙門氏菌病。

所述引物F的5’端采用生物素修飾；

所述質控探針的5’端采用生物素修飾。

所述區段A如SEQ ID No.2自5’端第1-19位所示；

所述區段B如SEQ ID No.2自5’端第20-49位所示。

所述金標探針如SEQ ID No.3所示；所述質控探針如SEQ ID No.4所示。