[發(fā)明專(zhuān)利]一株控制梨果展青霉素的酵母菌及其應(yīng)用

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 202010428791.3
• 申請(qǐng)日: 2020-05-20
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN111705005B
• 公開(kāi)（公告）日: 2023-01-17
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 楊其亞;傅昱;張紅印;錢(qián)鑫
• 申請(qǐng)（專(zhuān)利權(quán)）人: 江蘇大學(xué)
• 主分類(lèi)號(hào): C12N1/16
• 分類(lèi)號(hào): C12N1/16;A23L5/20;C12R1/645
• 代理公司: 暫無(wú)信息
• 代理人: 暫無(wú)信息

本發(fā)明屬于生物技術(shù)領(lǐng)域，涉及一株控制展青霉素的酵母菌及其應(yīng)用，酵母為季也蒙畢赤酵母Y1，保藏菌株編號(hào)為CCTCC NO：M 2017270，用于降解展青霉素或用于控制梨果的展青霉素，對(duì)水晶梨整果或果實(shí)傷口處的展青霉素均有良好的控制效果；梨果自然腐爛時(shí)，對(duì)照組中展青霉素濃度為4.41μg/mL，使用季也蒙畢赤酵母Y1的實(shí)驗(yàn)組的展青霉素含量?jī)H為1.24μg/mL；果實(shí)傷口處的展青霉素相比于對(duì)照組，展青霉素含量下降了72％；同時(shí)，該酵母可直接降解展青霉素，當(dāng)展青霉素終濃度10μg/mL，酵母初始濃度為1×10⁸cells/mL時(shí)，可完全降解展青霉素，且24?36h內(nèi)酵母對(duì)其降解速率最大。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬于生物控制毒素的方法，具體涉及一株控制梨果展青霉素的酵母菌及其應(yīng)用。

背景技術(shù)

展青霉素又名棒曲霉素，是一種毒性極強(qiáng)的聚酮類(lèi)次級(jí)代謝產(chǎn)物，分子式為C₇H₆O₄，化學(xué)名稱(chēng)：4-羥基4-氫-呋喃(3，2-碳)吡喃-2(6-氫)酮，易溶于低pH水和乙醇、丙酮、乙酸乙酯、氯仿等有機(jī)溶劑中。青霉屬、擬青霉屬、曲霉屬、絲衣霉屬等真菌是展青霉素的主要產(chǎn)生菌,展青霉素主要存在于霉?fàn)€的水果及其制品中,是影響水果及果汁飲料質(zhì)量的主要因素之一。展青霉素已被證實(shí)有急性、慢性毒性，包括致畸、致癌和致突變性等。

全世界范圍內(nèi)展青霉素的污染非常嚴(yán)重，廣泛存在于多種水果、水果制品和果酒中，這不僅威脅人體的健康，還會(huì)造成巨大的經(jīng)濟(jì)損失。鑒于展青霉素的廣譜毒性，國(guó)際食品法典委員會(huì)、大多數(shù)歐美國(guó)家限定標(biāo)準(zhǔn)為為0-50μg/kg；歐盟對(duì)展青霉素含量制定了更詳細(xì)和嚴(yán)格的標(biāo)準(zhǔn)：果汁及蘋(píng)果飲料中展青霉素最高含量為50μg/kg；固體的蘋(píng)果制品中展青霉素最高含量為25μg/kg；嬰幼兒食用的液體或固體蘋(píng)果產(chǎn)品中展青霉素最高含量為10μg/kg；我國(guó)也制定了相應(yīng)的標(biāo)準(zhǔn)，蘋(píng)果、山楂半成品限量標(biāo)準(zhǔn)為100μg/kg，果汁、果醬、果酒、罐頭和果脯的限量標(biāo)準(zhǔn)為50μg/kg。Ji等人對(duì)我國(guó)137個(gè)蘋(píng)果產(chǎn)品中PAT的含量進(jìn)行檢測(cè)，結(jié)果表明，樣品中展青霉素的檢出率高達(dá)31％，含量分布在10-276.9μg/kg。

控制展青霉素的方法主要包括物理方法、化學(xué)方法及生物方法。物理方法主要采用人工采選、高壓水沖洗、冷藏、果汁的澄清，過(guò)濾和吸附、巴氏消毒、以及輻射等措施對(duì)原料果及受展青霉素污染的蘋(píng)果汁進(jìn)行處理。人工采選不僅要花費(fèi)大量人力，且挑選后的蘋(píng)果在貨架期也會(huì)感染霉菌產(chǎn)生展青霉素，可見(jiàn)即使嚴(yán)格的篩選也不能避免展青霉素的污染。高壓水沖洗對(duì)設(shè)備要求高，成本巨大，且對(duì)小規(guī)模種植戶(hù)并不適用。活性碳吸附雖然能去除部分展青霉素，但會(huì)導(dǎo)致果汁的色澤、酚含量下降，嚴(yán)重影響果汁的品質(zhì)。紫外照射同樣不能完全去除果汁中的展青霉素。化學(xué)方法分為兩類(lèi)：一類(lèi)是采用化學(xué)物質(zhì)處理防止產(chǎn)毒菌的侵染，從而防止展青霉素的產(chǎn)生；另一類(lèi)是用化學(xué)物質(zhì)處理，清除已產(chǎn)生的展青霉素。但是化學(xué)殺菌劑的使用會(huì)使真菌產(chǎn)生耐藥性并且污染環(huán)境，利用化學(xué)物質(zhì)清除已產(chǎn)生的展青霉素目前還處在試驗(yàn)階段，安全性得不到保障。

目前亟需一種安全有效的生物脫毒技術(shù)；目前酵母菌是研究的熱點(diǎn)，也展現(xiàn)出良好的應(yīng)用前景，但相關(guān)研究在國(guó)際范圍內(nèi)目前尚處于起步階段，影響了生物防治技術(shù)在展青霉素控制方面的應(yīng)用。

發(fā)明內(nèi)容

針對(duì)現(xiàn)有技術(shù)的不足，本發(fā)明旨在解決上述問(wèn)題之一；本發(fā)明提供一株分離自梨果園的季也蒙畢赤酵母(Meyerozyma guilliermondii)Y1，該酵母對(duì)梨果的展青霉素具有顯著的控制作用，并對(duì)展青霉素具有較強(qiáng)的降解作用，具有潛在的應(yīng)用價(jià)值。

本發(fā)明使用的季也蒙畢赤酵母，已經(jīng)ICR小鼠急性毒性試驗(yàn)，確定其具有高度安全性，對(duì)人體無(wú)害。

本發(fā)明所提供的控制展青霉素的季也蒙畢赤酵母系從鎮(zhèn)江市世業(yè)洲農(nóng)業(yè)生態(tài)果園的梨果中篩選分離到的，在NYDA固體培養(yǎng)基平板上28℃培養(yǎng)，進(jìn)行形態(tài)學(xué)觀(guān)察；已經(jīng)對(duì)該菌株的5.8S rDNA-ITS區(qū)序列進(jìn)行分析并進(jìn)行了分子生物學(xué)鑒定。