[發(fā)明專利]一種基于檢測試紙顯示的核酸檢測方法及核酸檢測試劑盒有效
| 申請?zhí)枺?/td> | 202010424727.8 | 申請日： | 2020-05-19 |
| 公開（公告）號： | CN111647642B | 公開（公告）日： | 2023-10-20 |
| 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人： | 吳松;王熵;李宇清;雷崎方 | 申請（專利權(quán)）人： | 深圳市眾循精準(zhǔn)醫(yī)學(xué)研究院 |
| 主分類號： | C12Q1/6804 | 分類號： | C12Q1/6804 |
| 代理公司： | 深圳市君勝知識產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(普通合伙) 44268 | 代理人： | 徐凱凱 |
| 地址： | 518000 廣東省深圳市羅*** | 國省代碼： | 廣東;44 |
| 權(quán)利要求書： | 查看更多 | 說明書： | 查看更多 |
| 摘要： | |||
| 搜索關(guān)鍵詞： | 一種 基于 檢測 試紙 顯示 核酸 方法 試劑盒 | ||
1.一種基于檢測試紙顯色的核酸檢測方法，其特征在于，包括步驟：
提供一種核酸探針，所述核酸探針一端通過共價(jià)鍵與固相顆粒連接，所述核酸探針另一端通過共價(jià)連接著抗體識別物；
將待測樣品進(jìn)行擴(kuò)增，將擴(kuò)增后的待測樣品以及所述核酸探針加入由crRNA、以及Cas蛋白組成的反應(yīng)體系中，反應(yīng)得到反應(yīng)液；
將所述反應(yīng)液滴加在檢測試紙的加樣區(qū)，所述加樣區(qū)含有膠體金標(biāo)記的第一抗體，所述檢測試紙包括與所述第一抗體特異性結(jié)合的第二抗體位點(diǎn)，以及與所述抗體識別物結(jié)合的鏈霉親和素位點(diǎn)；
通過觀察所述檢測試紙的顯色條帶判斷所述待測樣品中是否含有靶標(biāo)核酸。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述基于檢測試紙顯色的核酸檢測方法，其特征在于，
當(dāng)所述核酸探針為DNA探針時(shí)，所述Cas蛋白為Cas12蛋白。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述基于檢測試紙顯色的核酸檢測方法，其特征在于，當(dāng)所述核酸探針為RNA探針時(shí)，所述Cas蛋白為Cas13蛋白。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述基于檢測試紙顯色的核酸檢測方法，其特征在于，所述固相顆粒為磁珠、玻璃珠，塑料珠或瓊脂糖珠中的一種。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述基于檢測試紙顯色的核酸檢測方法，其特征在于，所述抗體識別物為生物素分子、FAM和FITC中的一種或多種。
6.根據(jù)權(quán)利要求1所述基于檢測試紙顯色的核酸檢測方法，其特征在于，所述待測樣品為拭子、血液、分泌物、環(huán)境采集物或痰液中的一種。
7.根據(jù)權(quán)利要求1所述基于檢測試紙顯色的核酸檢測方法，其特征在于，所述通過觀察所述檢測試紙的顯色條帶判斷所述待測樣品中是否含有靶標(biāo)核酸的步驟包括：
若觀察到所述檢測試紙上出現(xiàn)兩條顯色條帶，則判定所述待測樣品中含有靶標(biāo)核酸；
若觀察到所述檢測試紙上僅第二抗體位點(diǎn)出現(xiàn)顯色條帶，則判定所述待測樣品中不含有靶標(biāo)核酸。
8.一種基于檢測試紙顯示的核酸檢測試劑盒，其特征在于，包括核酸探針，由crRNA以及Cas蛋白組成的反應(yīng)體系，以及檢測試紙；所述核酸探針一端通過共價(jià)鍵與固相顆粒連接，所述核酸探針另一端通過共價(jià)連接著抗體識別物；所述檢測試紙的加樣區(qū)含有膠體金標(biāo)記的第一抗體，所述檢測試紙還包括與所述第一抗體特異性結(jié)合的第二抗體位點(diǎn)，以及與所述抗體識別物結(jié)合的鏈霉親和素位點(diǎn)。
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