[發明專利]用于檢測鼠源TCR轉基因拷貝數的試劑盒及方法

在審

• 申請號: 202010423994.3
• 申請日: 2020-05-18
• 公開（公告）號: CN113684258A
• 公開（公告）日: 2021-11-23
• 發明（設計）人: 黃家琪;姚意弘;郭霖;閆佳旭;姚昕;朱恃貴;王飛;吳軍峰;陸吉順;任加強;張麗
• 申請（專利權）人: 上海賽比曼生物科技有限公司;無錫賽比曼生物科技有限公司
• 主分類號: C12Q1/6851
• 分類號: C12Q1/6851;C12N15/11
• 代理公司: 上海一平知識產權代理有限公司 31266
• 代理人: 徐迅;馬思敏

1.一種用于檢測鼠源TCR轉基因拷貝數的試劑盒，其特征在于，所述試劑盒包括針對鼠源TCR保守區域的引物對和Taqman探針，其中，所述的引物對選自下組：

(i)第一引物對(D1)：第一引物對包括序列如SEQ ID NO:1和SEQ ID NO:2所示的引物；

(ii)第二引物對(A1)：第二引物對包括序列如SEQ ID NO:4和SEQ ID NO:5所示的引物；和

(iii)第一引物對和第二引物對的組合。

2.如權利要求1所述的試劑盒，其特征在于，所述的引物對為第一引物對，并且所述試劑盒還包括序列如SEQ ID NO:3所示的第一Taqman探針。

3.如權利要求1所述的試劑盒，其特征在于，所述的試劑盒還包括選自下組的引物對：

(iii)第三引物對(B1)：第三引物對包括序列如SEQ ID NO:7和SEQ ID NO:8所示的引物；和

(iv)第四引物對(C1)：第四引物對包括序列如SEQ ID NO:10和SEQ ID NO:11所示的引物。

4.如權利要求1所述的試劑盒，其特征在于，所述Taqman探針的5'端標記有熒光報告基團，3'端標記有熒光淬滅基團；

或者，所述Taqman探針的3'端標記有熒光報告基團，5'端標記有熒光淬滅基團。

5.一種用于檢測鼠源TCR轉基因拷貝數的試劑組合，其特征在于，所述試劑組合包括第一引物對和第一Taqman探針，第一引物對包括序列如SEQ ID NO:1和SEQ ID NO:2所示的引物；并且，第一Taqman探針的序列如SEQ ID NO:3所示。

6.一種用于檢測鼠源TCR轉基因拷貝數的試劑組合，其特征在于，所述試劑組合包括第二引物對和第二Taqman探針，第二引物對包括序列如SEQ ID NO:4和SEQ ID NO:5所示的引物；并且，第二Taqman探針的序列如SEQ ID NO:6所示。

7.一種權利要求1所述的試劑盒或權利要求5～6所述的試劑組合的用途，其特征在于，用于制備對鼠源TCR進行質量控制的檢測產品。

8.一種體外對鼠源TCR進行質量控制的方法，其特征在于，包括如下步驟：

(a)提供一待檢測的樣品；

(b)用針對鼠源TCR保守區域的引物對和Taqman探針，對所述的待檢測的樣品進行PCR擴增，從而測定TCR轉基因的拷貝數；和

(c)基于所測定的TCR轉基因的拷貝數，對待檢測的樣品的質量進行評價。

9.如權利要求8所述的方法，其特征在于，在步驟(b)中，采用第一引物對和第一Taqman探針。

10.如權利要求8所述的方法，其特征在于，在步驟(b)中，同時采用(Y1)第一引物對和第一Taqman探針以及(Y3)RNase P內參基因引物/探針。