[發明專利]一種甲型肝炎病毒總抗體測定試劑盒及其制備方法

在審

• 申請號: 202010423934.1
• 申請日: 2020-05-19
• 公開（公告）號: CN111596061A
• 公開（公告）日: 2020-08-28
• 發明（設計）人: 胡雪凇;唐仁陶;高陽;高威;孫成艷;何浩會
• 申請（專利權）人: 迪瑞醫療科技股份有限公司
• 主分類號: G01N33/576
• 分類號: G01N33/576;G01N33/543
• 代理公司: 長春眾邦菁華知識產權代理有限公司 22214
• 代理人: 周蕾

本發明涉及一種甲型肝炎病毒總抗體測定試劑盒及其制備方法，屬于化學發光體外診斷技術領域。本發明的試劑盒包括R1試劑、R2試劑、R3試劑、校準品和質控品；R1試劑為磁微粒包被的甲型肝炎病毒抗體溶液；R2試劑為化學發光物質標記的甲型肝炎病毒抗體溶液；R3試劑為HAV抗原溶液。本發明的試劑盒采用吖啶酯直接發光，降低了本底空白，提高了靈敏度；采用順磁性的微粒作為固相載體，其比表面積大，提高了檢測的靈敏度；通過采用過量的HAV抗原中和HAV IgG和IgM，可以同時檢測HAV IgG和IgM，檢測結果完全可以代表HAV總抗體結果。本發明制備的試劑盒可直接用于全自動化學法光免疫分析儀上，無需大型儀器設備配合，成本較低，且無放射性污染，可大規模的開展和推廣。

技術領域

本發明屬于化學發光體外診斷技術領域，具體涉及一種甲型肝炎病毒總抗體測定試劑盒及其制備方法。

背景技術

甲型病毒性肝炎簡稱甲肝，是由甲型肝炎病毒(Hepatitis A Virus，HAV)感染引起的以肝臟炎癥病變為主的傳染病。1974年feinstone SM等報告通過免疫電鏡技術在甲型肝炎病人糞便中發現甲型肝炎病毒。甲肝病毒是直徑為27～32nm的小RNA病毒，其結構含有VP1～VP4四種多肽，基因組為單股正鏈RNA，約7500個核苷酸。甲肝病毒感染多為自限性，嚴重的可形成爆發性肝炎并導致死亡，甲肝的臨床癥狀與感染者的年齡有關，6歲以下的兒童，70％的感染都是無癥狀的，在年齡稍大的兒童和成人中，感染者多顯示臨床癥狀，其中大部分病人都會出現黃疸。甲肝病毒的平均潛伏期是28天(從15到50天的范圍)，典型的臨床癥狀包括發熱、不舒服、厭食、嘔吐、腹部不適等，這些癥狀通常不會超過2個月，其中最明顯的臨床癥狀表現為黃疸，黃疸出現率為70％。在甲肝急性期病人的血清中可以查出抗-HAV IgM及IgG，臨床病人于病后2周抗-HAV IgM陽性率為100％，持續2～3周，然后迅速下降。在癥狀出現的前期，HAV抗體就能夠被檢測出來。感染甲型肝炎一旦發病，HAV總抗體即為陽性，在自然感染之后，通常一生都會檢測到HAV IgG抗體，且可以再次感染時起到二次免疫效果。現今可以通過接種甲肝疫苗進行預防，在接種甲肝疫苗兩周后就可以檢測到HAVIgG抗體。HAV總抗體檢測用于診斷過去或目前存在的甲型肝炎病毒感染，也可以觀察接種HAV疫苗之后的免疫效果。因此開發新型的、準確、快速、靈敏度高的甲型肝炎病毒總抗體測定試劑盒對診斷甲型肝炎病毒感染意義重大。

發明內容

本發明的目的是提供一種甲型肝炎病毒總抗體測定試劑盒及其制備方法。本發明的試劑盒使用磁珠包被抗原與化學發光物質體系，中和法檢測血清、血漿中甲型肝炎病毒總抗體的含量，具有較高的檢測靈敏度，操作簡單、檢測準確、快速。

為了實現上述目的，本發明的技術方案具體如下：

本發明提供一種甲型肝炎病毒總抗體測定試劑盒，包括：R1試劑、R2試劑、R3試劑、校準品和質控品；

所述R1試劑為磁微粒包被的甲型肝炎病毒抗體溶液；

所述R2試劑為化學發光物質標記的甲型肝炎病毒抗體溶液，其中化學發光物質為吖啶酯或吖啶酯衍生物；

所述R3試劑為HAV抗原溶液。

在上述技術方案中，優選的是：所述R1試劑包括0.01％～0.1％磁微粒包被的甲型肝炎病毒抗體，粒徑為1～3μm磁微粒，試劑緩沖液為100mmol/L PB、0.01％～0.2％150mmol/L NaCl、和0.01％～0.2％proclin-300，pH6.0。

在上述技術方案中，優選的是：所述R2試劑包括0.3μg/mL～2μg/mL化學發光物質標記的甲型肝炎病毒抗體，試劑緩沖液為100mmol/L PB、0.01％～0.2％150mmol/L NaCl、0.01％～0.2％proclin-300、2mmol/L EDTA*2Na、及0.1％～2％BSA，pH6.0。