[發明專利]一種川貝母肉質直根的培養方法

有效

• 申請號: 202010421501.2
• 申請日: 2020-05-18
• 公開（公告）號: CN111492976B
• 公開（公告）日: 2022-09-13
• 發明（設計）人: 王躍華;馬濤;陳芳;張運春;王戰國;嚴鑄云;趙燦;郭陽陽;王盼;王銘愉;李含霜;楊巧蓮;黃驍;王帥
• 申請（專利權）人: 成都大學
• 主分類號: A01H4/00
• 分類號: A01H4/00
• 代理公司: 成都科奧專利事務所(普通合伙) 51101
• 代理人: 余麗生

1.一種川貝母肉質直根的培養方法，其特征在于包括如下步驟：

(1)外植體的選取和消毒：選取生長3年以上的川貝母鱗片葉作為外植體，先用酒精擦洗干凈后陰干，然后進行消毒處理；

(2)川貝母組培鱗莖的誘導培養：將消毒后的川貝母鱗片葉接入鱗莖誘導培養基MS+氯吡苯脲0.1～0.5mg·L^-1+噻苯隆0.3～1.0mg·L^-1+NAA0.1～0.5mg·L^-1+瓊脂6～7g·L^-1中，在溫度為18～22℃、無光照的條件下進行鱗莖的誘導培養；

(3)肉質直根的誘導培養：選取直徑為0.4～0.6cm的鱗莖，連同基部的鱗莖盤一起接入1/4MS+KT0.5～1.5mg·L^-1+IBA0.3～0.5mg·L^-1+瓊脂6～7g·L^-1的肉質直根誘導培養基中，在培養溫度為24～28℃、無光照的條件下進行肉質直根的誘導培養；

(4)肉質直根的增殖培養：選取顏色為淡黃色、生長直徑為0.2～0.4cm的叢生肉質直根，將肉質直根沿縱向切成2～4條，但必須保留肉質直根的基部相連組織，使每條肉質直根的基部仍保持連接，然后接入改良MS+6-BA 0.5～1.0mg·L^-1+KT1.0～2.0mg·L^-1+NAA0.3～0.5mg·L^-1+酵母多糖1.0～2.0g·L^-1的增殖培養基中，在培養溫度為12～20℃、每天光照2～4小時、光照強度為100～300lx、搖床轉速為40～80r/min的條件下進行肉質直根的增殖培養，所述改良MS的鹽酸硫胺素和甘氨酸的濃度均改為1.0mg/L；

上述所有培養基的pH值為5.8～6.2，蔗糖30～40g·L^-1。

2.根據權利要求1所述的川貝母肉質直根的培養方法，其特征在于：步驟(1)中川貝母鱗片葉先用濃度為40～50％的酒精擦洗干凈，然后再置于溫度為15～20℃的條件下陰干15～30min。

3.根據權利要求1或2所述的川貝母肉質直根的培養方法，其特征在于：步驟(1)中所述消毒處理是指先用濃度為70％的酒精消毒15～30s，然后再用濃度為0.1％的升汞溶液消毒6～9min，最后用無菌水洗3～6次。