[發(fā)明專利]一種基于多基因突變的肝癌早期檢測(cè)試劑盒

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 202010420516.7
• 申請(qǐng)日: 2020-05-18
• 公開（公告）號(hào): CN111549134B
• 公開（公告）日: 2023-03-28
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 邵麗芳;余曉波;曾麗;賈俊玲
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 浙江大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬第一醫(yī)院;浙江默樂生物科技有限公司
• 主分類號(hào): C12Q1/6886
• 分類號(hào): C12Q1/6886;C12Q1/6858;C12N15/11
• 代理公司: 北京慕達(dá)星云知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(特殊普通合伙) 11465
• 代理人: 崔自京

1.一種基于多基因突變的肝癌早期檢測(cè)試劑盒，其特征在于，包括引物和探針；

所述引物序列如下：

KRAS-F：5’-CATAGAGCTTGACATGGTCG-3’；SEQ ID NO.1；

KRAS-R：5’-ACAAGAGGTTATGAGCACCT-3’；SEQ ID NO.2；

P53-F：5’-AGCAGAATAGCATGAACCTC-3’；SEQ ID NO.3；

P53-R：5’-CCGACAGGATATGAGGTCGC-3’；SEQ ID NO.4；

BCL10-136F：5’-GGACCAGGAAGAAGCGCCATCTCC-3’；SEQ ID NO.5；

BCL10-136R：5’-GATCCTCCTGCTGTGGCTCGGACT-3’；SEQ ID NO.6；

CTNNB1-110F：5’-CTGAGGAAGAGGATGTGGATAC-3’；SEQ ID NO.7；

CTNNB1-110R：5’-AGGACTTGGGAGGTATCCACAT-3’；SEQ ID NO.8；

ARID1A-5548F：5’-GGATTGGTGGGGAGA-3’；SEQ ID NO.9；

ARID1A-5548R：5’-CCTCTGCTGTTGTCACAT-3’；SEQ ID NO.10；

ARID1A-6420F：5’-ATTCTGGCCACACCCTCT-3’；SEQ ID NO.11；

ARID1A-6420R：5’-CCAGGTTGGCCAGCAGTACC-3’；SEQ ID NO.12；

TERT-2460F：5’-CCTCACCTCACCCACACA-3’；SEQ ID NO.13；

TERT-2460R：5’-AGGGCCTCGTCTTCTACAGG-3’；SEQ ID NO.14；

內(nèi)標(biāo)GAPDH-F：5’-AGGCCACTGTTTGAGGTTATTG-3’；SEQ ID NO.15；

內(nèi)標(biāo)GAPDH-R：5’-AACAGCATGTGCAAAATGAGGGTAG-3’；SEQ ID NO.16；

所述探針序列如下：

KRAS-P：5’-GATCTTTCACATTCACCAAATA-3’；SEQ ID NO.17；

P53-P：5’-ACATCTAGTCACCGAACATC-3’；SEQ ID NO.18；

BCL10-P：5’-AAAGGGCTGGAAAATTGTTA-3’；SEQ ID NO.19；

CTNNB1-P：5’-CTGAGTGGTAAAGGCAATCCTGAGG-3’；SEQ ID NO.20；

ARID1A-5548P：5’-CCAGACCCACTTCGAGAGCAAG-3’；SEQ ID NO.21；

ARID1A-6420P：5’-TGGTGCGCTTCCTCAGTGACCG-3’；SEQ ID NO.22；

TERT-2460P：5’-GAGTATGGCTGCGTGGTGAA-3’；SEQ ID NO.23；

內(nèi)標(biāo)GAPDH-P：5’-ATGCATCTGGCTCCGAGTTCCTGAATGC-3’；SEQ ID NO.24。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種基于多基因突變的肝癌早期檢測(cè)試劑盒，其特征在于，基于熒光定量PCR進(jìn)行檢測(cè)；

所述熒光定量PCR的反應(yīng)體系為：PCR Buffer 10μl，上游引物1μl，下游引物1μl，內(nèi)標(biāo)引物1μl，內(nèi)標(biāo)探針1μl，Taq酶1μl，DNA模板5μl，H₂O 5μl，共計(jì)25μl；

將反應(yīng)管放入熒光PCR檢測(cè)儀中，循環(huán)參數(shù)設(shè)定如下：

/

熒光信號(hào)的收集定為FAM、VIC、ROX、CY5，數(shù)據(jù)的采集定在58℃。