[發(fā)明專利]一株降解塑料地膜的克雷伯氏菌及其應(yīng)用

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 202010420217.3
• 申請(qǐng)日: 2020-05-18
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN111593000B
• 公開(kāi)（公告）日: 2022-07-22
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 林雁冰;劉佳茜;侯麗君;劉婷婷;王沛媛
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 西北農(nóng)林科技大學(xué)
• 主分類號(hào): C12N1/20
• 分類號(hào): C12N1/20;C08J11/10;C12R1/22;C08L23/06;C08L67/02
• 代理公司: 西安佩騰特知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(普通合伙) 61226
• 代理人: 姚敏杰

本發(fā)明屬于微生物技術(shù)領(lǐng)域，涉及一株降解塑料地膜的克雷伯氏菌及其應(yīng)用；一株降解塑料地膜的克雷伯氏菌是Klebsiella pneumoniaeN3?2，其保藏于中國(guó)典型培養(yǎng)物保藏中心，保藏編號(hào)CCTCC NO:M 20191054；保藏時(shí)間為2019年12月16日。本發(fā)明經(jīng)過(guò)分離篩選得到降解菌N3?2，降解時(shí)，使得聚乙烯塑料地膜和PBAT塑料地膜均達(dá)到較高的失重率，實(shí)現(xiàn)對(duì)聚乙烯塑料地膜和PBAT塑料地膜的高效降解，生產(chǎn)成本低，應(yīng)用前景廣闊。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬于微生物技術(shù)領(lǐng)域，涉及一種降解菌及其應(yīng)用，尤其涉及一株降解塑料地膜的克雷伯氏菌及其應(yīng)用。

背景技術(shù)

塑料產(chǎn)品由于成本低廉、不易腐爛和適用范圍廣泛等，在人類生活中被大量使用，但同時(shí)，自然環(huán)境中的塑料污染問(wèn)題愈發(fā)嚴(yán)重，特別在農(nóng)業(yè)中，塑料地膜應(yīng)用廣泛，在提高農(nóng)業(yè)產(chǎn)量的同時(shí)也使農(nóng)田中產(chǎn)生了嚴(yán)重的白色污染問(wèn)題。

現(xiàn)階段，對(duì)廢棄塑料的處置方式大多為填埋、焚燒、二次加工等，這些處理方式對(duì)環(huán)境的污染較大，處理成本高；相比而言，生物菌種對(duì)塑料進(jìn)行降解的過(guò)程具有降解條件溫和及降解產(chǎn)物無(wú)污染的特點(diǎn)，對(duì)環(huán)境比較友好，目前關(guān)于塑料地膜的降解方法還較少并且效果大多不太理想；同時(shí)關(guān)于地膜的降解菌種資源還較少。

傳統(tǒng)聚乙烯塑料地膜是目前農(nóng)田中應(yīng)用最為廣泛的地膜，但其降解性較低，對(duì)聚乙烯的降解一直以來(lái)都是難以攻克的難題，因此找到一種高效的聚乙烯塑料地膜降解菌株非常重要。近年來(lái)生物降解地膜的出現(xiàn)一定程度上減輕了農(nóng)田中聚乙烯地膜的污染問(wèn)題，而聚己二酸/對(duì)苯二甲酸丁二酯(Poly(butyleneadipate-co-terephthalate)，簡(jiǎn)稱：PBAT)作為一種生物可降解材料應(yīng)用在農(nóng)田中，但實(shí)際應(yīng)用過(guò)程中PBAT的降解情況一般，且生產(chǎn)成本較高，無(wú)法實(shí)現(xiàn)全面推廣使用。因此，進(jìn)一步尋找對(duì)PBAT有高效降解作用的菌株同樣非常重要。

發(fā)明內(nèi)容

針對(duì)現(xiàn)有塑料地膜降解性低，成本高的技術(shù)問(wèn)題，本發(fā)明提供一種一株降解塑料地膜的克雷伯氏菌及其應(yīng)用，具體是經(jīng)過(guò)分離篩選得到降解菌，經(jīng)過(guò)降解能使聚乙烯和PBAT塑料地膜達(dá)到較高的失重率，實(shí)現(xiàn)聚乙烯和PBAT塑料地膜的高效降解，生產(chǎn)成本低，應(yīng)用前景廣闊。

為了實(shí)現(xiàn)上述目的，本發(fā)明采用的技術(shù)方案是：

一株降解塑料地膜的克雷伯氏菌，是Klebsiella pneumoniaeN3-2，保藏于中國(guó)典型培養(yǎng)物保藏中心，保藏編號(hào)CCTCC NO:M 20191054；保藏時(shí)間是2019年12月16日。

上述一株降解塑料地膜的克雷伯氏菌的16S rDNA基因序列是序列表No.1。

一株降解塑料地膜的克雷伯氏菌在降解地膜中的應(yīng)用。

一株降解塑料地膜的克雷伯氏菌在降解塑料地膜中的應(yīng)用。

一株降解塑料地膜的克雷伯氏菌在降解聚乙烯塑料地膜中的應(yīng)用。

一株降解塑料地膜的克雷伯氏菌在降解PBAT塑料地膜中的應(yīng)用。

一株降解塑料地膜的克雷伯氏菌降解聚乙烯塑料地膜的方法，包括：

1)將聚乙烯塑料地膜剪成膜片，進(jìn)行無(wú)菌處理；

1.1)用2％SDS溶液將膜片浸泡，浸泡時(shí)間不低于4小時(shí)，浸泡期間超聲30min；

1.2)用30％雙氧水將步驟1.1)超聲后的膜片浸泡10min；

1.3)依次用75％乙醇和95％乙醇，將步驟1.2)的膜片浸泡，浸泡時(shí)間不低于4小時(shí)，浸泡期間超聲30min；

2)將一株降解塑料地膜的克雷伯氏菌接種至LB培養(yǎng)基中培養(yǎng)至對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期，轉(zhuǎn)入離心管離心，去掉上清，將沉淀菌體用0.01mol/L磷酸鹽緩沖溶液洗滌；