[發明專利]一種17β-雌二醇電化學發光適配體傳感器的制備方法及應用

有效

• 申請號: 202010417581.4
• 申請日: 2020-05-18
• 公開（公告）號: CN111707721B
• 公開（公告）日: 2023-03-21
• 發明（設計）人: 由天艷;劉曉紅;李麗波;羅莉君;畢曉雅
• 申請（專利權）人: 江蘇大學
• 主分類號: G01N27/327
• 分類號: G01N27/327;G01N27/30
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

本發明屬于生物傳感檢測技術領域，涉及一種17β?雌二醇電化學發光適配體傳感器的制備方法及應用。具體為一種基于氮摻雜碳點(NCDs)作為羧基化三聯吡啶釕(Ru(dcbpy)₃²⁺)共反應劑的新型電化學發光(ECL)適配體傳感器用于17β?雌二醇(E2)的特異性檢測。本發明中，由于NCDs對Ru(dcbpy)₃²⁺的優異催化作用和信號放大效應，NCDs可以作為Ru(dcbpy)₃²⁺有效的共反應劑，大大提高體系的發光效率，進而增強發光信號。為了提高Ru(dcbpy)₃²⁺?NCDs體系對E2檢測的選擇性，我們創新性地引入了E2適配體以構建新型ECL適配體傳感器。構筑的ECL適配體傳感器對E2的線性響應范圍為1.0×10^?14～1.0×10^?6mol/L，檢出限為1.0×10^?15mol/L。本發明的電化學發光適配體傳感器選擇性好、靈敏度高，為測定實際樣品中的E2提供了一種新型適配體傳感平臺。

技術領域

本發明屬于生物傳感檢測技術領域，涉及一種17β-雌二醇電化學發光適配體傳感器的制備方法及應用，具體涉及一種基于Ru(dcbpy)₃²⁺-NCDs體系的17β-雌二醇電化學發光適配體傳感器的制備方法及應用。

背景技術

17β-雌二醇(E2)，作為最強的內分泌干擾化學物質(EDCs)之一，對提高奶牛產奶量、提高瘦肉率、促進動物和人類的生長具有積極意義。然而，由于在促進牲畜生長和人類藥物治療方面的藥物濫用，大量的E2被釋放到環境中。過量的E2會影響生物體的生殖、內分泌、神經、免疫系統，甚至會導致異發育不良、男性不育、卵巢癌和乳腺癌，對人類造成不可逆轉的危害。因此，開發了液相色譜-質譜(LC-MS)、氣相色譜-質譜(GC-MS)和免疫吸附試驗等E2分析方法。其中，基于色譜的方法是可靠、準確的，但取決于昂貴的儀器和專業的操作。此外，免疫吸附方法，主要包括酶聯免疫吸附試驗(ELISA)、表面等離子體共振(SPR)傳感器和比色免疫傳感器，在實際樣品中提供了快速的檢測過程，但是該類方法需要引入昂貴的抗體。因此，發展一種新型有效的傳感策略對E2進行分析具有實際的指導意義。

電化學發光(ECL)適配體傳感技術作為一種新興的檢測技術，由于操作簡單、靈敏度好、成本低、易于控制、選擇性好等優點，被開發用于EDCs的分析。在典型的ECL體系中，三聯吡啶釕(Ru(bpy)₃²⁺)由于其良好的可逆性、較高的發光效率被廣泛用作發光體試劑。其中，三丙胺(TPA)作為陽極Ru(bpy)₃²⁺最傳統的共反應劑，具有良好的信號增強效果。然而，由于TPA的毒性和揮發性，仍然需要開發新型共反應劑。近年來，碳點(CDs)及其復合材料是一種新型的納米材料共反應劑，其ECL增強機理已得到初步研究。研究發現，CDs表面的芐基醇結構、氮摻雜碳點(NCNDs)和氮化硼量子點(BNQDs)表面的氨基可以作為Ru(bpy)₃²⁺的輔助反應位點提高ECL信號強度。在我們的前期工作中，開發的新型納米復合材料，如氮摻雜CDs(NCDs)，氮摻雜石墨烯納米點(NGDs)和聚乙烯亞胺(PEI)功能化NCDs(NCDs@PEI)，被用作Ru(bpy)₃²⁺的有效共反應劑，并基于其優勢分別制備了不同環境污染物的ECL傳感平臺。

然而，目前還沒有構建用于E2檢測的基于CDs的ECL適配體傳感平臺。

發明內容

針對現有技術存在的問題，本發明在結合羧基化三聯吡啶釕和碳點優點的工作基礎上，引入E2適配體，構建新型電化學發光適配體傳感器，用于實際樣品中E2的快速、靈敏檢測分析。