[發(fā)明專利]一種嵌合抗原受體免疫細(xì)胞及其制備方法和應(yīng)用

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 202010414322.6
• 申請(qǐng)日: 2020-05-15
• 公開（公告）號(hào): CN111560076B
• 公開（公告）日: 2021-05-07
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 李光超;羅敏;曾劍華;周兆;吳麗琴
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 廣州百暨基因科技有限公司
• 主分類號(hào): C07K19/00
• 分類號(hào): C07K19/00;C12N15/62;C12N15/867;C12N7/01;C12N5/10;A61K39/215;A61P31/14
• 代理公司: 北京品源專利代理有限公司 11332
• 代理人: 鞏克棟

本發(fā)明提供了一種嵌合抗原受體免疫細(xì)胞及其制備方法和應(yīng)用，表達(dá)的CAR分子包括信號(hào)肽、冠狀病毒刺突糖蛋白的結(jié)合受體、鉸鏈區(qū)、跨膜結(jié)構(gòu)域、共刺激結(jié)構(gòu)域和信號(hào)傳導(dǎo)結(jié)構(gòu)域；所述CAR分子還包括分泌型ACE2，通過連接肽連接在信號(hào)傳導(dǎo)結(jié)構(gòu)域的羧基端；表達(dá)所述CAR分子的免疫細(xì)胞具有靶向清除新冠病毒感染細(xì)胞的能力，并釋放分泌性ACE2分子競(jìng)爭(zhēng)性結(jié)合病毒S蛋白，以實(shí)現(xiàn)異體回輸治療新冠感染人群，阻止輕癥向危重癥的轉(zhuǎn)化，對(duì)ACE2受體結(jié)合的其他病毒也具有普適性療效，具有戰(zhàn)略儲(chǔ)備價(jià)值，為腫瘤、免疫疾病等多種人類重大疾病的治療提供了新的方法和思路。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬于基因工程技術(shù)領(lǐng)域，涉及一種嵌合抗原受體免疫細(xì)胞及其制備方法和應(yīng)用。

背景技術(shù)

近來新型冠狀病毒(SARS-CoV-2)肆虐全球，由此引發(fā)的2019年冠狀病毒病(COVID-19)為全球公共健康帶來巨大威脅和挑戰(zhàn)。該病毒最初被世界衛(wèi)生組織(WHO)命名為2019-nCoV，與先前確定的可導(dǎo)致人類疾病的人類冠狀病毒嚴(yán)重急性呼吸綜合征(SARS)冠狀病毒(SARS-CoV)和中東呼吸綜合征(MERS)冠狀病毒(MERS-CoV)類似，新型冠狀病毒(SARS-CoV-2)可能引發(fā)威脅生命的疾病并具有大流行的潛力。

冠狀病毒感染始于與宿主細(xì)胞表面受體的結(jié)合。SARS-CoV和MERS-CoV均采用病毒表面的刺突糖蛋白(S蛋白)與其受體人血管緊張素轉(zhuǎn)換酶2(hACE2)結(jié)合，才得以進(jìn)入細(xì)胞。Nature雜志2020年2月3日分別發(fā)表了武漢病毒所石正麗團(tuán)隊(duì)和復(fù)旦大學(xué)公共衛(wèi)生學(xué)院張永振團(tuán)隊(duì)的最新研究結(jié)果：SARS-CoV-2與SARS-CoV之間的核苷酸相似性達(dá)到89.1％，同樣利用S蛋白結(jié)合人體細(xì)胞表面的ACE2進(jìn)入細(xì)胞，激活免疫系統(tǒng)，通過細(xì)胞因子、炎癥因子等導(dǎo)致肺部損傷、嚴(yán)重肺衰竭甚至死亡(Xintian Xu,et al.,Evolution of the novelcoronavirus from the ongoing Wuhan outbreak and modeling of its spike proteinfor risk of human transmission.SCIENCE CHINA Life Sciences,1,21,2020.)。

hACE2是人類血管緊張素轉(zhuǎn)化酶(ACE)的同源物，功能上是一種肽酶。ACE2最初發(fā)現(xiàn)在心臟、腎臟和睪丸中表達(dá)，后來發(fā)現(xiàn)在肺和消化道中也廣泛表達(dá)。在肺組織中，hACE2主要分布于Ⅱ型肺泡細(xì)胞(AT2)中，少量分布于I型肺泡細(xì)胞(AT1)、氣道上皮細(xì)胞、成纖維細(xì)胞、內(nèi)皮細(xì)胞和巨噬細(xì)胞中。

對(duì)于COVID-19這一新發(fā)疾病，目前尚無有效的治療藥物，國(guó)內(nèi)外研究人員一直在積極探索攻克方法。從目前的臨床實(shí)驗(yàn)情況來看，化藥數(shù)量占比最高，其次為生物藥、細(xì)胞療法、疫苗和中藥等。生物藥主要包括中和性抗體和抗炎藥兩大類，如特異性免疫血漿和抗IL-6受體抗體(托珠單抗、Sarilumab)等。細(xì)胞治療作為新興的生物制藥領(lǐng)域，在白血病、實(shí)體腫瘤和傳染病的防治中已經(jīng)取得了令人矚目的成果，發(fā)展?jié)摿薮蟆?/p>

人γδT細(xì)胞是一類存在于外周血中、具備天然免疫和適應(yīng)性免疫雙重功能、可應(yīng)用于腫瘤細(xì)胞免疫治療的T細(xì)胞。γδT細(xì)胞可以廣譜但選擇性識(shí)別殺傷功能異常或被感染的細(xì)胞，其識(shí)別和殺傷涉及靶細(xì)胞表面的MICA/B、磷酸抗原等正常細(xì)胞不表達(dá)或低表達(dá)的分子，而且該過程不涉及MHC分子的限制性，具有開發(fā)成為“off the shelf(現(xiàn)貨)”細(xì)胞產(chǎn)品的潛力。γδT細(xì)胞可用于異體治療的特質(zhì)及其在實(shí)體瘤和傳染性疾病治療中的潛力促使國(guó)際醫(yī)藥企業(yè)紛紛在該領(lǐng)域布局。

目前，γδT細(xì)胞尚未應(yīng)用于冠狀病毒感染性疾病的治療。

發(fā)明內(nèi)容