[發明專利]一種診斷標志物及其在COVID-19診斷及冠狀病毒既往感染檢測中的應用

在審

• 申請號: 202010413901.9
• 申請日: 2020-05-15
• 公開（公告）號: CN113671190A
• 公開（公告）日: 2021-11-19
• 發明（設計）人: 陶生策;李陽;賴丹昀;江何偉;張海南;祁環
• 申請（專利權）人: 上海交通大學
• 主分類號: G01N33/68
• 分類號: G01N33/68;G01N33/58;G01N33/569;G01N33/543
• 代理公司: 上海漢聲知識產權代理有限公司 31236
• 代理人: 胡晶

本發明公開一種診斷標志物及在COVID?19診斷及冠狀病毒既往感染檢測中的應用。所述診斷標志物包括肽段COVID19?V004，所述肽段COVID19?V004的氨基酸序列為：包含NRALTGIAVEQDKNTQEV中5個及5個以上連續氨基酸的序列；或所述肽段COVID19?V004的氨基酸序列為：包含NRALTGIAVEQDKNTQEV中1個到幾個氨基酸的取代或/和缺失或/和添加所形成的序列。基于本發明的診斷標志物應用間接法定性檢測人血清中抗肽段的IgG抗體的水平。通過基于本發明所建立的檢測試劑盒，可作為新型冠狀病毒肺炎(COVID?19)診斷的一種輔助手段。

技術領域

本發明屬于生物醫藥技術領域，具體涉及一種診斷標志物及其在COVID-19診斷及冠狀病毒既往感染檢測中的應用，尤其涉及一種肽段COVID19-V004及其衍生物在診斷新型冠狀病毒肺炎(COVID-19)試劑盒中的應用。

背景技術

新型冠狀病毒于2020年1月12日世界衛生組織命名為2019-nCoV，隨后國際病毒委員會根據基因測序等方面的分類學研究將其命名為“嚴重急性呼吸綜合征冠狀病毒2(SARS-CoV-2)”，世界衛生組織將該病毒引起的疾病命名為“2019年冠狀病毒病 (COVID-19)”。2020年1月30日，世界衛生組織宣布新型冠狀病毒構成國際關注的突發公共衛生事件。

SARS-CoV-2為一種新型的β屬冠狀病毒新毒株，可跨越物種屏障感染人類，可通過密切接觸、呼吸道飛沫、高濃度氣溶膠傳播，引起以肺部病變為主的傳染病，也可誘發包括神經系統和消化系統在內的全身性損傷，嚴重者可導致死亡(Lancet.2020Feb 15；395(10223):514-523)。基于目前尚無針對SARS-CoV-2的有效藥物，以及疫苗尚處于臨床驗證階段的現狀，準確的早期診斷、及時的隔離治療是控制疫情的關鍵。

截至2020年3月27日，國家藥監局已經應急批準了23個新型冠狀病毒檢測產品(其中新冠病毒核酸檢測試劑15個，抗體檢測試劑8個)以滿足疫情防控用檢測試劑的需求(http://www.nmpa.gov.cn/)。“呼吸道標本或血液標本實時熒光RT-PCR檢測新型冠狀病毒核酸陽性或病毒基因測序與已知的新型冠狀病毒高度同源”是新型冠狀病毒肺炎(COVID-19)診斷的金標準(http://www.nhc.gov.cn/wjw/)。核酸檢測雖然具備靈敏度高，特異性強的優勢，但結果易受取樣部位，樣本質量，實驗操作的限制而導致與 COVID-19影像學表現不一致亦或“假陰性”，不僅如此，核酸檢測對實驗環境及操作人員的要求較高，耗時較長，檢測人員感染風險高。

作為免疫系統抵抗病毒的重要效應分子，血液中的特異性抗體成為診斷病毒感染的另一依據。國家衛生健康委員會在2020年3月3日發布的《新型冠狀病毒診療方案(試行第七版)》中，正式在原有核酸檢測和測序基礎上增加“血清學檢測”作為依據，即“新型冠狀病毒特異性IgM抗體和IgG抗體陽性”或“新型冠狀病毒特異性IgG抗體由陰性轉為陽性或恢復期較急性期4倍及以上升高”也可確診 (http://www.nhc.gov.cn/wjw/)。新冠病毒抗體檢測試劑盒主要包括IgG抗體和IgM抗體檢測。通常情況下，免疫系統產生IgM抗體較早，感染后一周內出現，通常預示急性感染，可利用該抗體檢測陽性作為早期感染的指標；IgG則產生較晚，但維持時間相對更長，可利用該抗體檢測陽性作為感染和既往感染的依據(Clinical and Vaccine Immunology,2004,11(4):665-668)。通過膠體金免疫層析法或磁微粒化學發光法找到疑似患者血清樣本中的特異性抵抗病毒的抗體，從而協助判斷患者的感染情況，此即為新冠病毒抗體檢測試劑盒的原理。抗體檢測只需采取患者極少量血樣，且對實驗環境及檢測人員要求沒有核酸檢測苛刻，操作簡易且時間短，在提高檢測效率的同時也能很大程度地降低檢測人員的感染風險，與核酸檢測優勢互補，可降低“假陰性”率，是一種高效有保障的輔助診斷手段，更為后續基層檢測、居家檢測提供一種方便可靠的篩查手段。