[發明專利]從外周血中產生腫瘤反應性T細胞富集群的方法

有效

• 申請號: 202010410564.8
• 申請日: 2013-04-30
• 公開（公告）號: CN111643524B
• 公開（公告）日: 2023-09-05
• 發明（設計）人: 阿萊娜·格羅斯;史蒂文·A·羅森伯格
• 申請（專利權）人: 美國衛生和人力服務部
• 主分類號: A61K35/17
• 分類號: A61K35/17;A61P35/00;A61P35/02;C12N5/0783
• 代理公司: 北京英賽嘉華知識產權代理有限責任公司 11204
• 代理人: 王達佐;洪欣

本申請公開了獲得富集腫瘤反應性T細胞的細胞群的方法，所述方法包括：(a)從外周血樣本中獲得外周血單個核細胞(PBMCs)的混合群；(b)從混合群中特異地選擇還表達PD?1和/或TIM?3的CD8⁺?T細胞；和(c)將(b)中選擇的細胞與未被選擇的細胞分離，以獲得富集腫瘤反應性T細胞的細胞群。還公開了向哺乳動物施用富集腫瘤反應性T細胞的細胞群的相關方法、獲得包含富集腫瘤反應性T細胞的細胞群的藥物組合物的方法、以及分離或純化的細胞群。

相關申請的交叉引用

本專利申請要求2013年3月1日提交的美國臨時專利申請第61/771,251號的權益，將其通過引用的方式整體并入本文。

關于政府資助的研究或開發的聲明

本申請是由國立衛生研究院國家癌癥研究所在項目號ZIA?BC?010984的政府資助下完成的。政府享有本申請的某些權利。

發明背景

使用腫瘤反應性T細胞的過繼性細胞療法(ACT)在一些癌癥患者中產生了積極的臨床反應。然而，在將ACT成功地用于癌癥或其它疾病的治療中仍然存在一些障礙。例如，從外周血中分離到的T細胞可能表現不出足夠的腫瘤特異的反應性。因此，需要從外周血中獲得腫瘤反應性T細胞群的改進方法。

發明概述

本發明的實施方案提供了獲得富集腫瘤反應性T細胞的細胞群的方法，所述方法包括：(a)從外周血樣本中獲得外周血單個核細胞(PBMCs)的混合群；(b)從混合群中特異地選擇還表達PD-1和/或TIM-3的CD8⁺?T細胞；和(c)將(b)中選擇的細胞與未被選擇的細胞分離，以獲得富集腫瘤反應性T細胞的細胞群。

本發明另一實施方案提供了向哺乳動物施用富集腫瘤反應性T細胞的細胞群的方法，所述方法包括：(a)從外周血樣本中獲得PBMCs的混合群；(b)從混合群中特異地選擇還表達PD-1和/或TIM-3的CD8⁺?T細胞；(c)將(b)中選擇的細胞與未被選擇的細胞分離，以獲得富集腫瘤反應性T細胞的細胞群；和(d)向哺乳動物施用所述富集腫瘤反應性T細胞的細胞群。

本發明另一實施方案提供了獲得包含富集腫瘤反應性T細胞的細胞群的藥物組合物的方法，所述方法包括：(a)從外周血樣本中獲得PBMCs的混合群；(b)從混合群中特異地選擇還表達PD-1和/或TIM-3的CD8⁺?T細胞；(c)將(b)中選擇的細胞與未被選擇的細胞分離，以獲得富集腫瘤反應性T細胞的細胞群；和(d)將所述富集腫瘤反應性T細胞的細胞群與藥學上可接受的載體組合，以獲得包含富集腫瘤反應性T細胞的細胞群的藥物組合物。

本發明另外的實施方案提供了相關的細胞群以及治療或預防癌癥的方法。

附圖中幾個視圖的簡要描述

圖1A-1B是顯示與自體腫瘤細胞系共培養的細胞的干擾素(IFN)-γ的分泌(pg/ml)(黑色柱)以及表達4-1BB的CD8⁺細胞的百分比(灰色柱)的圖，所述細胞從黑素瘤患者1913(A)或黑素瘤患者3713(B)的外周血中分離，并通過熒光激活細胞分選術(FACS)基于CD8、PD-1或TIM-3的表達或者PD-1或TIM-3的不表達進行分選，且在體外進行了擴增。

圖1C是顯示與自體腫瘤共培養的細胞的IFN-γ的分泌(pg/ml)(黑色柱)以及表達4-1BB的CD8⁺細胞(的百分比(灰色柱)的圖，所述細胞從黑素瘤患者3289的外周血中分離，并通過FACS基于CD8、PD-1、LAG-3或TIM-3的表達或者PD-1或TIM-3的不表達進行了分選。