[發(fā)明專(zhuān)利]一種用于檢測(cè)微量血的酶聯(lián)免疫試劑盒

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• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 202010408743.8
• 申請(qǐng)日: 2020-05-14
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN111638367A
• 公開(kāi)（公告）日: 2020-09-08
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 張無(wú)量
• 申請(qǐng)（專(zhuān)利權(quán)）人: 武漢康珠生物技術(shù)有限公司
• 主分類(lèi)號(hào): G01N33/68
• 分類(lèi)號(hào): G01N33/68;G01N33/577;G01N33/58;G01N33/543
• 代理公司: 北京聯(lián)瑞聯(lián)豐知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(普通合伙) 11411
• 代理人: 黃冠華

本發(fā)明提供一種用于檢測(cè)微量血的酶聯(lián)免疫試劑盒，涉及酶聯(lián)免疫檢測(cè)技術(shù)領(lǐng)域。該用于檢測(cè)微量血的酶聯(lián)免疫試劑盒，所述試劑盒包括抗生物素抗體包被的酶標(biāo)板、生物素標(biāo)記的白介素20單克隆抗體溶液、辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記的白介素20單克隆抗體溶液、清洗液、底物液、待檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)品溶液。本發(fā)明，在對(duì)微量血的酶聯(lián)免疫分析時(shí)無(wú)需運(yùn)用到太多的大型儀器輔助，減少了設(shè)備造價(jià)開(kāi)支、使用成本較低、操作時(shí)比較簡(jiǎn)單、省時(shí)省力，可以在基層醫(yī)療單位普及推廣，能夠適合于大眾人群對(duì)微量血白介素20進(jìn)行測(cè)定，實(shí)用性非常強(qiáng)。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及酶聯(lián)免疫檢測(cè)技術(shù)領(lǐng)域，具體為一種用于檢測(cè)微量血的酶聯(lián)免疫試劑盒。

背景技術(shù)

酶聯(lián)免疫分析法是一種利用抗原抗體之間專(zhuān)一性鍵結(jié)的特性對(duì)檢體進(jìn)行檢測(cè)的方法。ELISA分析法由于其快速、簡(jiǎn)便的分析特性，廣泛用于血清、血漿、尿、便、組織液等樣品中各種生化指標(biāo)、疾病標(biāo)志物的臨床檢驗(yàn)。其中，雙抗體夾心法是檢測(cè)抗原最常用的ELISA分析方法，其基本工作原理是：利用連接于固相載體上的抗體和酶標(biāo)抗體分別與樣品中被檢測(cè)抗原分子上的兩個(gè)抗原決定簇結(jié)合，形成固相抗體-抗原-酶標(biāo)抗體免疫復(fù)合物。由于反應(yīng)系統(tǒng)中固相抗體和酶標(biāo)抗體的量相對(duì)于待測(cè)抗原是過(guò)量的，因此復(fù)合物的形成量與待測(cè)抗原的含量在檢測(cè)范圍內(nèi)成正比，測(cè)定復(fù)合物中的酶作用于加入的底物后生成的有色物質(zhì)量，即可確定待測(cè)抗原含量。

目前，基于微量血的酶聯(lián)免疫分析時(shí)常常需要運(yùn)用到大型儀器輔助，而且往往都需要受過(guò)專(zhuān)門(mén)培訓(xùn)的技術(shù)人員才會(huì)使用，設(shè)備造價(jià)昂貴、使用成本高、操作時(shí)比較復(fù)雜、費(fèi)時(shí)費(fèi)力，難以在基層醫(yī)療單位普及推廣，不適合于大眾人群對(duì)微量血白介素20進(jìn)行測(cè)定。

發(fā)明內(nèi)容

(一)解決的技術(shù)問(wèn)題

針對(duì)現(xiàn)有技術(shù)的不足，本發(fā)明提供了一種用于檢測(cè)微量血的酶聯(lián)免疫試劑盒，解決了現(xiàn)有技術(shù)中存在的缺陷與不足。

(二)技術(shù)方案

為實(shí)現(xiàn)以上目的，本發(fā)明通過(guò)以下技術(shù)方案予以實(shí)現(xiàn)：一種用于檢測(cè)微量血的酶聯(lián)免疫試劑盒，所述試劑盒包括抗生物素抗體包被的酶標(biāo)板、生物素標(biāo)記的白介素20單克隆抗體溶液、辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記的白介素20單克隆抗體溶液、清洗液、底物液、待檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)品溶液。

優(yōu)選的，所述酶標(biāo)板包被的抗生物素抗體包被濃度為2.2-5.6μg/ml，其中包被酶標(biāo)板的制備步驟如下：

1)將抗生物素抗體加入稀釋液進(jìn)行稀釋?zhuān)?/p>

2)然后將稀釋之后的抗生物素抗體溶液加入到酶標(biāo)板表面的微孔中，再將酶標(biāo)板表面的微孔中加入封閉液；

3)將加入抗生物素抗體溶液的酶標(biāo)板在低溫下過(guò)夜；

4)取出酶標(biāo)板，使用清洗液將其進(jìn)行洗滌，除去未結(jié)合的游離成分，即得抗生物素抗體包被的酶標(biāo)板。

優(yōu)選的，所述生物素標(biāo)記的白介素20單克隆抗體溶液的濃度為1.2-7.6μg/ml，其中生物素標(biāo)記的白介素20抗體溶液為白介素20抗體以生物素反應(yīng)溶液稀釋而成。

優(yōu)選的，所述辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記的白介素20單克隆抗體溶液的濃度為0.8-6.5μg/ml，其中辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記的白介素20抗體溶液的制備步驟如下：

1)將辣根過(guò)氧化物酶與白介素20抗體偶聯(lián)；

2)往上述偶聯(lián)產(chǎn)物中加入酶反應(yīng)物稀釋液進(jìn)行稀釋?zhuān)玫嚼备^(guò)氧化物酶標(biāo)記的白介素20抗體溶液。

優(yōu)選的，所述清洗液為PBS溶液與質(zhì)量濃度為0.05％的吐溫20組成，其中吐溫20占清洗液質(zhì)量的0.1％。

優(yōu)選的，所述底物液為過(guò)氧化氫溶液與魯米諾溶液配置而成。

優(yōu)選的，所述待檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)品溶液的制備步驟如下：

1)采集微量血；