[發(fā)明專利]一種用于檢測(cè)微量血的酶聯(lián)免疫試劑盒

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• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 202010408743.8
• 申請(qǐng)日: 2020-05-14
• 公開（公告）號(hào): CN111638367A
• 公開（公告）日: 2020-09-08
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 張無量
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 武漢康珠生物技術(shù)有限公司
• 主分類號(hào): G01N33/68
• 分類號(hào): G01N33/68;G01N33/577;G01N33/58;G01N33/543
• 代理公司: 北京聯(lián)瑞聯(lián)豐知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(普通合伙) 11411
• 代理人: 黃冠華

1.一種用于檢測(cè)微量血的酶聯(lián)免疫試劑盒，其特征在于：所述試劑盒包括抗生物素抗體包被的酶標(biāo)板、生物素標(biāo)記的白介素20單克隆抗體溶液、辣根過氧化物酶標(biāo)記的白介素20單克隆抗體溶液、清洗液、底物液、待檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)品溶液。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種用于檢測(cè)微量血的酶聯(lián)免疫試劑盒，其特征在于：所述酶標(biāo)板包被的抗生物素抗體包被濃度為2.2-5.6μg/ml，其中包被酶標(biāo)板的制備步驟如下：

1)將抗生物素抗體加入稀釋液進(jìn)行稀釋；

2)然后將稀釋之后的抗生物素抗體溶液加入到酶標(biāo)板表面的微孔中，再將酶標(biāo)板表面的微孔中加入封閉液；

3)將加入抗生物素抗體溶液的酶標(biāo)板在低溫下過夜；

4)取出酶標(biāo)板，使用清洗液將其進(jìn)行洗滌，除去未結(jié)合的游離成分，即得抗生物素抗體包被的酶標(biāo)板。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種用于檢測(cè)微量血的酶聯(lián)免疫試劑盒，其特征在于：所述生物素標(biāo)記的白介素20單克隆抗體溶液的濃度為1.2-7.6μg/ml，其中生物素標(biāo)記的白介素20抗體溶液為白介素20抗體以生物素反應(yīng)溶液稀釋而成。

4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種用于檢測(cè)微量血的酶聯(lián)免疫試劑盒，其特征在于：所述辣根過氧化物酶標(biāo)記的白介素20單克隆抗體溶液的濃度為0.8-6.5μg/ml，其中辣根過氧化物酶標(biāo)記的白介素20抗體溶液的制備步驟如下：

1)將辣根過氧化物酶與白介素20抗體偶聯(lián)；

2)往上述偶聯(lián)產(chǎn)物中加入酶反應(yīng)物稀釋液進(jìn)行稀釋，得到辣根過氧化物酶標(biāo)記的白介素20抗體溶液。

5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種用于檢測(cè)微量血的酶聯(lián)免疫試劑盒，其特征在于：所述清洗液為PBS溶液與質(zhì)量濃度為0.05％的吐溫20組成，其中吐溫20占清洗液質(zhì)量的0.1％。

6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種用于檢測(cè)微量血的酶聯(lián)免疫試劑盒，其特征在于：所述底物液為過氧化氫溶液與魯米諾溶液配置而成。

7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種用于檢測(cè)微量血的酶聯(lián)免疫試劑盒，其特征在于：所述待檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)品溶液的制備步驟如下：

1)采集微量血；

2)往稀釋后血液加入稀釋后血液體積1/3的淋巴細(xì)胞分離液，自然沉淀十分鐘；

3)在1500-2500rpm的條件下離心，吸出白色的細(xì)胞層，然后在4500-5500rpm的條件下離心10s，棄去上清液，沉淀為白細(xì)胞；

4)從白細(xì)胞中分離出白介素20，將白介素20中加入pH值7.4的磷酸緩沖液進(jìn)行稀釋，即得待檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)品溶液。