[發明專利]一種復方紅衣補血口服液中6種多酚類化合物的含量測定方法

在審

• 申請號: 202010399615.1
• 申請日: 2020-05-12
• 公開（公告）號: CN111505162A
• 公開（公告）日: 2020-08-07
• 發明（設計）人: 白青山
• 申請（專利權）人: 白青山
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02;G01N30/06;G01N30/34;G01N30/86
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

1.一種復方紅衣補血口服液中6種多酚類化合物的含量測定方法,所述多酚類化合物為咖啡酸、沒食子酸、對羥基肉桂酸、阿魏酸、兒茶素和表兒茶素，其特征在于，所述含量測定方法為UPLC法。

2.如權利要求1所述的復方紅衣補血口服液中6種多酚類化合物的含量測定方法,其特征在于，所述含量測定方法包含如下步驟：

(1)色譜條件與系統適用性試驗；

(2)混合對照品溶液的制備；

(3)供試品溶液的制備；

(4)測定法。

3.如權利要求2所述的復方紅衣補血口服液中6種多酚類化合物的含量測定方法,其特征在于，所述色譜條件與系統適用性試驗為:

色譜柱：Waters Symmetry C₁₈(4.6mm×150mm，3.5μm)；流動相：甲醇(A)-0.1％甲酸溶液(B)，梯度洗脫，洗脫程序見下表；流速：0.5mL/min；檢測波長：250nm(咖啡酸、沒食子酸、對羥基肉桂酸、阿魏酸)、280nm(兒茶素、表兒茶素)；柱溫：30℃；進樣量：5μL；在該色譜條件下，6種成分峰形正態，且與相鄰色譜峰的分離度均大于1.5，均達到基線分離，理論板數均大于10000；

4.如權利要求3所述的復方紅衣補血口服液中6種多酚類化合物的含量測定方法,其特征在于，所述250nm波長下檢測咖啡酸、沒食子酸、對羥基肉桂酸、阿魏酸；所述280nm波長下檢測兒茶素、表兒茶素。

5.如權利要求3所述的復方紅衣補血口服液中6種多酚類化合物的含量測定方法,其特征在于，所述Waters Symmetry C₁₈色譜柱的規格為4.6mm×150mm，3.5μm。

6.如權利要求3所述的復方紅衣補血口服液中6種多酚類化合物的含量測定方法,其特征在于，所述對照品溶液的制備方法為：

精密稱取咖啡酸對照品117mg、沒食子酸對照品11mg、對羥基肉桂酸對照品13mg、阿魏酸對照品31mg、兒茶素對照品90mg、表兒茶素對照品13mg，分別置于50mL量瓶中，加甲醇溶解并定容，搖勻，制得對照品貯備溶液。精密量取上述對照品貯備溶液各1mL，置100mL量瓶中，用甲醇稀釋至刻度，搖勻，即得混合對照品溶液。

7.如權利要求3所述的復方紅衣補血口服液中6種多酚類化合物的含量測定方法,其特征在于，所述供試品溶液的制備方法為：精密量取樣品1ml，通過AB-8型大孔吸附樹脂柱(內徑1.5cm，長12cm)，以水70mL洗脫，棄去水液，再用70％乙醇50mL洗脫，收集洗脫液，蒸干，用甲醇溶解并轉至100mL量瓶中，并定容至刻度，搖勻，作為供試品溶液。

8.如權利要求3所述的復方紅衣補血口服液中6種多酚類化合物的含量測定方法,其特征在于，所述含量測定方法詳細步驟為：

(1)色譜條件與系統適用性

色譜柱：Waters Symmetry C₁₈(4.6mm×150mm，3.5μm)；流動相：甲醇(A)-0.1％甲酸溶液(B)，梯度洗脫，洗脫程序見下表；流速：0.5mL/min；檢測波長：250nm(咖啡酸、沒食子酸、對羥基肉桂酸、阿魏酸)、280nm(兒茶素、表兒茶素)；柱溫：30℃；進樣量：5μL；在該色譜條件下，6種成分峰形正態，且與相鄰色譜峰的分離度均大于1.5，均達到基線分離，理論板數均大于10000；

(2)混合對照品溶液的制備

精密稱取咖啡酸對照品117.85mg、沒食子酸對照品11.00mg、對羥基肉桂酸對照品13.80mg、阿魏酸對照品31.80mg、兒茶素對照品90.75mg、表兒茶素對照品13.05mg，分別置于50mL量瓶中，加甲醇溶解并定容，搖勻，制得對照品貯備溶液；精密量取上述對照品貯備溶液各1mL，置100mL量瓶中，用甲醇稀釋至刻度，搖勻，即得濃度分別為23.50、2.00、2.70、6.30、18.00和2.60μg/mL的混合對照品溶液；

(3)供試品溶液的制備精密量取樣品1ml，通過AB-8型大孔吸附樹脂柱(內徑1.5cm，長12cm)，以水70mL洗脫，棄去水液，再用70％乙醇50mL洗脫，收集洗脫液，蒸干，用甲醇溶解并轉至100mL量瓶中，并定容至刻度，搖勻，作為供試品溶液；

(4)測定法分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各5μl，注入液相色譜儀，測定，即得。