[發(fā)明專利]精確配制醋酸標(biāo)準(zhǔn)曲線溶液及保護(hù)氨基酸醋酸檢測方法

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 202010391034.3
• 申請日: 2020-05-11
• 公開（公告）號: CN111537635B
• 公開（公告）日: 2021-04-06
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 郭曉蓉;張松;邱霞;金小林;唐波;姚國峰;植利軍;劉林
• 申請（專利權(quán)）人: 成都市科隆化學(xué)品有限公司
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02;G01N30/06;G01N30/14;G01N30/34;G01N30/86
• 代理公司: 成都九鼎天元知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司 51214
• 代理人: 胡東東

本發(fā)明公開了一種精確配制醋酸標(biāo)準(zhǔn)曲線溶液及保護(hù)氨基酸醋酸檢測方法，包括以下步驟：S1、配制醋酸儲備液，精密稱取設(shè)計量的無水乙酸鉀，根據(jù)檢測濃度需求，加超純水定容后得到設(shè)計濃度的醋酸儲備液；S2、配制醋酸標(biāo)準(zhǔn)曲線溶液，對儲備液進(jìn)行加超純水稀釋，得到設(shè)計濃度的醋酸標(biāo)準(zhǔn)曲線溶液，配制時，加入設(shè)計量的三氟乙醇或甲醇等步驟。本發(fā)明通過改進(jìn)標(biāo)準(zhǔn)曲線的配方，讓標(biāo)準(zhǔn)曲線配制過程更簡便、準(zhǔn)確，避免使用有機(jī)溶劑，不僅減少了溶劑的揮發(fā)，還降低了檢測成本；同時，通過采用離子色譜法來檢測，并通過設(shè)計合理的梯度條件，使干擾峰與目標(biāo)峰有效分離，最終使目標(biāo)峰表現(xiàn)明顯，易于判斷、計算，解決了現(xiàn)有技術(shù)易出現(xiàn)誤判和錯判的問題。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及保護(hù)氨基酸醋酸檢測技術(shù)領(lǐng)域，特別涉及一種精確配制醋酸標(biāo)準(zhǔn)曲線溶液及保護(hù)氨基酸醋酸檢測方法。

背景技術(shù)

隨著多肽合成的發(fā)展，市場對保護(hù)氨基酸需求越來越大，同時對保護(hù)氨基酸的質(zhì)量要求也越來越嚴(yán)苛。通過大量實踐，保護(hù)氨基酸中含有的醋酸雜質(zhì)對終產(chǎn)品的質(zhì)量控制有較大的消極影響，所以客戶對保護(hù)氨基酸中的醋酸控制很嚴(yán)格，通常控制在200ppm以下，更有甚者控制在50ppm以下，而如何對醋酸含量進(jìn)行精確控制，首先需要一種準(zhǔn)確度高、檢測精度高的高效檢測方法來檢測醋酸含量，進(jìn)而為質(zhì)量控制提供可靠的檢測數(shù)據(jù)。

在現(xiàn)有技術(shù)中，現(xiàn)有的技術(shù)方案大多都存在醋酸標(biāo)準(zhǔn)曲線配制過程復(fù)雜，質(zhì)控標(biāo)準(zhǔn)低于定量限，檢測結(jié)果誤差大等缺點，例如，現(xiàn)有的技術(shù)方案大多采用氣相色譜法檢測保護(hù)氨基酸中的醋酸，也有部分采用高效液相色譜法對其進(jìn)行檢測，其都普遍存在以下缺點：

1、配制醋酸標(biāo)準(zhǔn)曲線溶液時，一般是在溶劑(一般為有機(jī)溶劑，如四氫呋喃、DMF等)中加入醋酸，通過精密稱量、稀釋得到標(biāo)準(zhǔn)曲線的濃度，進(jìn)而得到醋酸標(biāo)準(zhǔn)曲線溶液。在該配制方法中，溶劑和醋酸易揮發(fā)，稱樣量少，過程困難，稱樣結(jié)果誤差大，配制的醋酸標(biāo)準(zhǔn)曲線溶液濃度不穩(wěn)定、不準(zhǔn)確，導(dǎo)致得到的標(biāo)準(zhǔn)曲線誤差大，進(jìn)而使檢測結(jié)果誤差大，并且，揮發(fā)的醋酸氣體會腐蝕設(shè)備，影響檢測設(shè)備(例如天平)的使用壽命。

2、氣相和液相色譜圖中存在很多其它雜質(zhì)峰，目標(biāo)峰含量低，在色譜圖中表現(xiàn)不明顯，主要原因就是雜質(zhì)分離效果差，導(dǎo)致干擾峰和目標(biāo)峰不能有效分離，進(jìn)而造成容易誤判、錯判。

因此，如何開發(fā)出一種準(zhǔn)確度高、檢測精度高的高效檢測方法來檢測醋酸含量迫在眉睫，是保護(hù)氨基酸提質(zhì)的關(guān)鍵點。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的第一個發(fā)明目的在于：針對目前現(xiàn)有技術(shù)配制醋酸標(biāo)準(zhǔn)曲線溶液時，存在的濃度不穩(wěn)定、不準(zhǔn)確，標(biāo)準(zhǔn)曲線誤差大的問題，提供一種精確配制醋酸標(biāo)準(zhǔn)曲線溶液的方法，以解決現(xiàn)有技術(shù)所存在的問題。

本發(fā)明采用的技術(shù)方案如下：一種精確配制醋酸標(biāo)準(zhǔn)曲線溶液的方法，其特征在于，包括以下步驟：

S1、配制醋酸儲備液，精密稱取設(shè)計量的無水乙酸鉀，根據(jù)檢測濃度需求，加超純水定容后得到設(shè)計濃度的醋酸儲備液；

S2、配制醋酸標(biāo)準(zhǔn)曲線溶液，根據(jù)檢測需求，對儲備液進(jìn)行加超純水稀釋，得到設(shè)計濃度的醋酸標(biāo)準(zhǔn)曲線溶液，其中，加超純水配制醋酸標(biāo)準(zhǔn)曲線溶液時，加入設(shè)計量的三氟乙醇或甲醇。

在上述方法中，通過改進(jìn)標(biāo)準(zhǔn)曲線的配方，讓標(biāo)準(zhǔn)曲線配制過程更簡便、準(zhǔn)確，采用固體無水乙酸鉀來配置醋酸標(biāo)準(zhǔn)曲線溶液，稱樣過程簡單，結(jié)果更加準(zhǔn)確，幾乎不揮發(fā)，同時用三氟乙醇或甲醇以及超純水溶解并稀釋至標(biāo)準(zhǔn)曲線濃度，配制過程簡單易操作，避免使用有機(jī)溶劑，不僅減少了溶劑的揮發(fā)，還降低了檢測成本。

進(jìn)一步，所述的可溶性無水乙酸鹽，可以為無水乙酸鈉或無水乙酸鉀。加入三氟乙醇或甲醇的目的是：使標(biāo)準(zhǔn)曲線溶液中目標(biāo)峰保留時間與樣品一致，如果標(biāo)準(zhǔn)曲線溶液中不加這些溶劑，目標(biāo)峰與供試液中的目標(biāo)峰保留時間有較大差異，容易引起誤判，因此，為了解決現(xiàn)有問題，需要加入三氟乙醇或甲醇，當(dāng)然也可以更換為其它能溶解保護(hù)氨基酸并能與水互溶且不影響醋酸含量的溶劑，但是必須要與供試品溶液中加的溶劑一致。