[發(fā)明專利]精確配制醋酸標(biāo)準(zhǔn)曲線溶液及保護(hù)氨基酸醋酸檢測方法

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 202010391034.3
• 申請日: 2020-05-11
• 公開（公告）號: CN111537635B
• 公開（公告）日: 2021-04-06
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 郭曉蓉;張松;邱霞;金小林;唐波;姚國峰;植利軍;劉林
• 申請（專利權(quán)）人: 成都市科隆化學(xué)品有限公司
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02;G01N30/06;G01N30/14;G01N30/34;G01N30/86
• 代理公司: 成都九鼎天元知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司 51214
• 代理人: 胡東東

1.一種保護(hù)氨基酸醋酸檢測方法，其特征在于，包括以下步驟：

S1、配制醋酸儲備液，精密稱取設(shè)計量的無水乙酸鉀，根據(jù)檢測濃度需求，加超純水定容后得到設(shè)計濃度的醋酸儲備液；

S2、配制醋酸標(biāo)準(zhǔn)曲線溶液，根據(jù)檢測需求，對儲備液進(jìn)行加超純水稀釋，分別配制得到不同設(shè)計濃度的醋酸標(biāo)準(zhǔn)曲線溶液，其中，加超純水配制醋酸根標(biāo)準(zhǔn)曲線溶液時，需加入設(shè)計量的三氟乙醇或甲醇；

S3、配制供試液①，精密稱取設(shè)計量的樣品，加三氟乙醇或甲醇溶解，然后加超純水稀釋至刻度線定容，搖勻，然后進(jìn)行超聲振蕩，超聲振蕩后所得濾液即為供試液①；

S4、配制供試液②，精密稱取設(shè)計量的樣品，加三氟乙醇或甲醇溶解，然后加超純水稀釋至刻度線定容，搖勻，然后進(jìn)行超聲振蕩，超聲振蕩后所得濾液即為供試液②；

S5、采用離子色譜法進(jìn)行檢測，檢測梯度條件為：在前10至前0.2分鐘內(nèi)，氫氧化鉀或氫氧化鈉淋洗液濃度為45mM；梯度變化為0.2分鐘，氫氧化鉀或氫氧化鈉淋洗液濃度從45mM變化至2mM；接著11分鐘氫氧化鉀或氫氧化鈉淋洗液濃度為2mM；梯度變化為0.2分鐘，氫氧化鉀或氫氧化鈉淋洗液濃度從2ml變化至45mM；最后6.8分鐘氫氧化鉀或氫氧化鈉淋洗液濃度為45mM；

S6、進(jìn)行檢測實驗，采用空白溶液、標(biāo)準(zhǔn)曲線溶液從低濃度至高濃度依次進(jìn)樣、空白溶液、供試液①、空白溶液、供試液②、空白溶液的順序進(jìn)行實驗，得到檢驗報告；

其中，所述保護(hù)氨基酸為 Fmoc-Thr(tBu)-OH或Fmoc-Tyr(tBu)-OH，分析柱為AS11-HC離子柱，尺寸為4×250mm。

2.如權(quán)利要求1所述的保護(hù)氨基酸醋酸檢測方法，其特征在于，在配制醋酸標(biāo)準(zhǔn)曲線溶液時，超純水與三氟乙醇或甲醇的體積比為9-11:1；在配制供試液時，供試液中超純水與三氟乙醇或甲醇的體積比為9-11:1。

3.如權(quán)利要求2所述的保護(hù)氨基酸醋酸檢測方法，其特征在于，在配制標(biāo)準(zhǔn)曲線溶液和供試液時，超純水與三氟乙醇或甲醇的體積比值，和供試液中超純水與三氟乙醇或甲醇的體積比值相同。

4.如權(quán)利要求1所述的保護(hù)氨基酸醋酸檢測方法，其特征在于，在配置供試液時，將定容后的溶液放入超聲波清洗器中，超聲振蕩至少1h，然后取出樣品，冷卻至室溫，過濾即得供試液。

5.如權(quán)利要求1所述的保護(hù)氨基酸醋酸檢測方法，其特征在于，采用離子色譜法進(jìn)行檢測時，檢測條件為：

流速：0.8-1.5mol/min；進(jìn)樣量：30-60ul；

柱溫：35-45℃；輸送速度：0.8-1.5ml/min；

沖洗因子：10。