[發(fā)明專利]一種與麻醉藥物過敏相關(guān)分子標(biāo)記及其應(yīng)用和檢測試劑盒

在審

• 申請?zhí)枺?/td>: 202010380603.4
• 申請日: 2020-05-08
• 公開（公告）號: CN111500708A
• 公開（公告）日: 2020-08-07
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 鄒望遠;邢曼玉;鄧美玲;李正弈棋
• 申請（專利權(quán)）人: 中南大學(xué)湘雅醫(yī)院
• 主分類號: C12Q1/6883
• 分類號: C12Q1/6883;C12Q1/6869;C12N15/11
• 代理公司: 長沙市融智專利事務(wù)所(普通合伙) 43114
• 代理人: 袁靖

本發(fā)明公開了一種與麻醉藥物過敏相關(guān)分子標(biāo)記及其應(yīng)用和檢測試劑盒。本發(fā)明首先提供了與麻醉藥物過敏相關(guān)的基因突變位點rs10833049，可以提供檢測人基因組中rs10833049的多態(tài)性的試劑在制備預(yù)測麻醉藥物過敏制劑中的應(yīng)用。將包含SNP位點區(qū)域的DNA模板通過PCR技術(shù)擴增，再使用sanger測序進行，獲得準(zhǔn)確的結(jié)果。本發(fā)明對于指導(dǎo)麻醉藥物使用以及增加圍術(shù)期的安全性具有積極的意義。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬于分子生物學(xué)檢測技術(shù)領(lǐng)域。具體為檢測麻醉藥物過敏相關(guān)的突變位點及其應(yīng)用和檢測試劑盒。

背景技術(shù)

過敏反應(yīng)是“與引起過敏的物質(zhì)接觸后突然發(fā)生的可能致命的全身性反應(yīng)”，隨著社會發(fā)展及人類生存環(huán)境變化，過敏反應(yīng)的發(fā)生率有逐年增高的趨勢。過敏反應(yīng)是圍術(shù)期與手術(shù)、麻醉管理、既往合并癥無關(guān)的最常見并發(fā)癥。來自不同國家的多個系列研究估計麻醉期間臨床過敏反應(yīng)的發(fā)生率在1/353到1/18600之間，嚴(yán)重過敏比例在1/10000左右，麻醉藥物中肌松藥羅庫溴銨是最常見的過敏原。

遺傳因素在過敏性疾病中的作用得到了廣泛關(guān)注及研究。研究發(fā)現(xiàn)HLA基因，Toll樣受體基因，細胞因子包括IL-4、IL-10、IL-13等基因多態(tài)性參與食物過敏的發(fā)生。哮喘的發(fā)生與HLA基因多態(tài)性相關(guān)。Yang等發(fā)現(xiàn)HLA-DR9多態(tài)性可能參與青霉素類過敏反應(yīng)等。基于申請人最近的研究，明確了一個與麻醉藥物過敏相關(guān)的基因多態(tài)性位點：rs10833049。該位點可用于麻醉藥物過敏的預(yù)測，提高患者圍術(shù)期安全性。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的首要目的在于提供一種與麻醉藥物過敏相關(guān)的分子標(biāo)記，即人基因的rs10833049多態(tài)性位點A向G的突變。本發(fā)明是首次發(fā)現(xiàn)麻醉藥物過敏相關(guān)的SNP分子標(biāo)記。

該位點位于人MRGPRX2基因(序列見SEQ ID NO.1)全長的第185位，其堿基為A或G。該位點攜帶185G的患者對麻醉藥物過敏后有保護作用，與野生型185A患者相比發(fā)生麻醉藥物過敏的幾率更低。

本發(fā)明所述麻醉藥物過敏反應(yīng)特指全身麻醉誘導(dǎo)后出現(xiàn)的過敏反應(yīng)，臨床表現(xiàn)及分級為I級：皮膚粘膜表現(xiàn)，包括皮膚潮紅，皮疹，血管性水腫(局部或全身)，粘膜水腫；II級：存在可測量但不危及生命的癥狀，包括皮膚效應(yīng)，血壓下降≥30％及不明原因的心動過速，咳嗽或支氣管痙攣但可實現(xiàn)機械通氣；III級：存在危及生命的反應(yīng)：心血管衰竭，心動過速或心動過緩，心律失常或嚴(yán)重支氣管痙攣；IV級：心臟和/或呼吸停止。只要在全身麻醉誘導(dǎo)后出現(xiàn)上述任一種級別的臨床表現(xiàn)就被確認(rèn)為出現(xiàn)麻醉過敏反應(yīng)。

本發(fā)明所述的麻醉藥物包括全身麻醉誘導(dǎo)時所使用鎮(zhèn)靜催眠藥、肌松藥和阿片類鎮(zhèn)痛藥；鎮(zhèn)靜催眠藥為咪達唑侖和依托咪酯；肌松藥為羅庫溴銨；鎮(zhèn)痛藥為舒芬太尼。

本發(fā)明所述的分子標(biāo)記rs10833049位點基因型為AA、AG、GG；攜帶G的患者與攜帶A的患者相比發(fā)生麻醉藥物過敏的幾率更低；即AG和GG基因型比AA基因型發(fā)生麻醉藥物過敏的幾率低。

本發(fā)明所述的分子標(biāo)記，rs10833049位點的擴增引物由rs10833049-F和rs10833049-R組成；引物序列如SEQ ID No.2和SEQ ID No.3。

本發(fā)明的第二個目的是提供上述的檢測分子標(biāo)記突變位點基因型的試劑在制備預(yù)測麻醉藥物過敏制劑中的應(yīng)用。

本發(fā)明的第三個目的是提供一種預(yù)測麻醉藥物過敏的試劑盒。該試劑盒包含檢測人基因的rs10833049位點基因型的試劑。本發(fā)明為首個預(yù)測麻醉藥物過敏的SNP位點檢測制劑。

本發(fā)明所述的試劑盒，包括DNA提取試劑、PCR擴增試劑、測序試劑。