[發明專利]檢測頭孢克肟聚合物雜質的方法

有效

• 申請號: 202010378071.0
• 申請日: 2020-05-07
• 公開（公告）號: CN111551654B
• 公開（公告）日: 2022-04-22
• 發明（設計）人: 胡海容;蘇燕瓊;高琳;王健松;蔡國偉;葉偉文;李卓
• 申請（專利權）人: 廣州白云山醫藥集團股份有限公司白云山制藥總廠
• 主分類號: G01N30/06
• 分類號: G01N30/06;G01N30/74;G01N30/88
• 代理公司: 廣州嘉權專利商標事務所有限公司 44205
• 代理人: 薛建強;景鵬

本發明涉及藥物質量檢測技術領域，特別涉及檢測頭孢克肟聚合物雜質的方法。該方法包括使用高效液相色譜法檢測，所述高效液相色譜法的檢測條件包括：流動相：由流動相A和流動相B組成，其中，流動相A為甲酸溶液，流動相B為乙腈、甲醇或乙腈?甲醇；流動相A和流動相B的體積比為20～95:80～5。本發明提供的檢測頭孢克肟聚合物雜質的方法能有效檢測頭孢克肟聚合物雜質，解決原檢測方法專屬性差，檢測到的雜質絕大部分不是聚合物雜質的問題。

技術領域

本發明涉及藥物質量檢測技術領域，特別涉及檢測頭孢克肟聚合物雜質的方法。

背景技術

頭孢克肟(Cefixime)屬于β-內酰胺類抗生素，是第三代頭孢菌素類抗生素，其化學名稱為：(6R，7R)-7-[(Z)-2-(2-氨基-4-噻唑基)-2-(羧甲氧亞氨基)乙酰氨基]-8-氧代-3-乙烯-5-硫雜-1-氮雜雙環[4.2.0]辛-2-烯-2-羧酸三水合物；具有半衰期長、高效低毒、體內分布廣、組織穿透性好等特點。

頭孢菌素類抗生素中的聚合物雜質的來源可分為兩類：外源性雜質和內源性雜質。外源性雜質一般來源于發酵工藝，為蛋白、多肽、多糖等雜質與抗生素結合的雜質；內源性雜質系指抗生素藥物自身聚合產物，聚合物既可來自生產過程，又可在儲存過程中形成。頭孢菌素的聚合反應包括只依賴于母核的N型聚合反應和側鏈參與的L型聚合反應，固體狀態下頭孢菌素類產品的聚合速度與含水量和貯存溫度關系密切。目前，對于頭孢菌素類抗生素中的聚合物雜質的檢測多采用凝膠色譜法進行檢測分析，凝膠色譜法又稱為分子排阻色譜法，主要是利用分子篩機制，分子質量較小的藥物分子進入凝膠孔隙內部，保留時間較長，而分子質量較大的聚合物雜質被排阻在凝膠孔隙之外，保留時間較短，較早被洗脫，從而與藥物分子分離。對于頭孢克肟原料藥和制劑中聚合物雜質的測定，各國藥典均無記載。現有技術中，趙曉東等學者(趙曉冬,傅蓉,陸軍,等.分子排阻色譜法測定頭孢克肟聚合物[J].中國藥師,2011,14(1):61-63.)建立了分子排阻法分析頭孢克肟高分子聚合物的方法，采用SephadexG10色譜柱(300mm×16mm，40～120μm)，流動相A為0.1mol/L磷酸緩沖液(pH7.0)，流動相B為超純水，流速1.5mL/min，檢測波長為254nm。結果顯示，頭孢克肟在5～80mg/mL的范圍內與頭孢克肟高分子聚合物的峰面積呈良好的線性關系(r＝0.9993)，頭孢克肟在5～400μg/mL的范圍內與頭孢克肟締合物的峰面積也呈良好的線性關系(r＝0.9997)。然而，從色譜圖上可以明顯看出，頭孢克肟高聚物的峰型較差。申請人在早期也對頭孢克肟聚合物雜質的檢測方法進行了研究，采用傳統的凝膠色譜法，所用色譜柱為TSKgel G2000 SWXL 7.8mm*30cm*5μm，色譜條件：HPLC-UV，波長：254nm，流速：0.8mL/min，流動相：pH7.0 0.005mol/L磷酸鹽緩沖液[0.005mol/磷酸氫二鈉溶液－0.005mol/L磷酸二氫鈉溶液(61：39)]-乙腈(95:5)，進樣量：10μL，供試品濃度：0.5mg/ml，稀釋液：水，對照或標準溶液：10μg/ml，計算方法：外標法，運行時間：20min，雜質限度控制：總雜≤1.0％。通過分段收集高比例有機相梯度洗脫方法分離的含不同雜質的洗脫液，在凝膠色譜柱法中進行定位，發現在主成分頭孢克肟出峰前洗脫出來的理論上為高分子雜質，即頭孢克肟聚合物的雜質，但絕大部分分子量與頭孢克肟接近。表明凝膠色譜法測定頭孢克肟聚合物的專屬差?？梢?，對于頭孢克肟聚合物的測定方法需要重新探索開發。

發明內容

本發明旨在至少解決現有技術中存在的技術問題之一。為此，本發明提供了一種穩定性高、專屬性好、可以對多種雜質有效分離進行定性定量分析的檢測頭孢克肟聚合物雜質的方法。

本發明的技術方案如下文所示。

本發明一方面提供了檢測頭孢克肟聚合物雜質的方法，包括使用高效液相色譜法檢測頭孢克肟聚合物雜質的步驟，所述高效液相色譜法的檢測條件包括：

流動相：由流動相A和流動相B組成，其中，流動相A為甲酸溶液，流動相B為乙腈、甲醇或乙腈-甲醇；流動相A和流動相B的體積比為20～95:80～5。