[發明專利]用于同步檢測APOE基因的兩個SNP位點的基因多態性的方法在審
| 申請號： | 202010369738.0 | 申請日： | 2020-04-30 |
| 公開（公告）號： | CN111518888A | 公開（公告）日： | 2020-08-11 |
| 發明（設計）人： | 趙方圓;佟洪梅;智慧芳;倪君君 | 申請（專利權）人： | 北京和合醫學診斷技術股份有限公司 |
| 主分類號： | C12Q1/6883 | 分類號： | C12Q1/6883;C12Q1/686;C12N15/11 |
| 代理公司： | 北京雙收知識產權代理有限公司 11241 | 代理人： | 解政文 |
| 地址： | 101111 北京市大興區經*** | 國省代碼： | 北京;11 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 用于 同步 檢測 apoe 基因 兩個 snp 多態性 方法 | ||
1.一種用于同步檢測APOE基因的兩個SNP位點的基因多態性的引物對，其特征在于，所述引物對包含一對引物，上游引物的核苷酸序列由SEQ ID NO.1所示，下游引物的核苷酸序列由SEQ ID NO.2所示。
2.根據權利要求1所述的引物對，其特征在于，所述SNP位點是APOE基因的rs429358和rs7412位點。
3.權利要求1或2所述的引物對在制備用于同步檢測APOE基因的兩個SNP位點的基因多態性的試劑盒中的應用。
4.一種用于同步檢測APOE基因的兩個SNP位點的基因多態性的試劑盒，其特征在于，包含權利要求1或2所述的引物對。
5.根據權利要求4所述的試劑盒，其特征在于，還包含DNA聚合酶、PCR緩沖液、4種dNTP的混合物和超純水。
6.根據權利要求5所述的試劑盒，其特征在于，所述DNA聚合酶的用量為0.5-5U，每種dNTP的終濃度均為50-500μM，引物的終濃度為20-300nM。
7.根據權利要求4-6任一項所述的試劑盒，其特征在于，還包含待測樣品DNA提取試劑或DNA提取試劑盒。
8.一種用于同步檢測APOE基因的兩個SNP位點的基因多態性的檢測方法，其特征在于，采用權利要求1或2所述的引物對對待測樣品進行PCR檢測。
9.根據權利要求8所述的檢測方法，其特征在于，包括步驟：
(1)從待測樣品中提取基因組DNA，作為擴增模板；
(2)配制包含所述引物對和所述擴增模板的PCR反應體系；
(3)對所述PCR反應體系進行PCR擴增反應，得到PCR產物；
(4)根據所述PCR產物，測定APOE基因的兩個SNP位點的基因多態性。
10.根據權利要求9所述的檢測方法，其特征在于，所述PCR擴增反應的反應條件為：94℃：1～10min；98℃：5～20s，58～68℃：10～60s，68～72℃：30s～3min，共25～40個循環；68～72℃：0～30min。
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