[發明專利]一種病毒密度梯度離心純化裝置

在審

• 申請號: 202010368232.8
• 申請日: 2020-04-30
• 公開（公告）號: CN113583801A
• 公開（公告）日: 2021-11-02
• 發明（設計）人: 安祺;劉珍珍;田大勇
• 申請（專利權）人: 上海青賽生物科技有限公司;北京賽爾富森生物科技有限公司
• 主分類號: C12M1/00
• 分類號: C12M1/00;C12N7/02;C12N7/00;A61K39/205;A61P31/14
• 代理公司: 上海一平知識產權代理有限公司 31266
• 代理人: 徐林強;崔佳佳

1.一種病毒密度梯度離心純化裝置，其特征在于，所述的裝置包括環形管路和連續流密度梯度離心機，所述的連續流密度梯度離心機包括連續流密度梯度離心轉子(1)；

在所述的環形管路上依次設有第一管口(2)、第三管口(3)、第二管口(4)和第四管口(5)，所述的第一管口與第三管口之間的管路上設有第一閥門(6)，所述的第三管口與第二管口之間的管路上設有第二閥門(7)，所述的第二管口與第四管口之間的管路上設有第三閥門(8)，所述的第四管口與第一管口之間的管路上設有第四閥門(9)；

所述的第一管口通過第一管道(10)與所述的連續流密度梯度離心轉子的上端相連，所述的第二管口通過第二管道(11)與所述的連續流密度梯度離心轉子的下端相連，所述的第三管口通過第三管道(12)與第一瓶體(13)相連，所述的第四管口通過第四管道(14)與第二瓶體(15)相連；

所述的第一管道上設有第五閥門(16)，所述的第二管道上設有第六閥門(17)；

所述的第三管道上設有液體輸送裝置(18)。

2.如權利要求1所述的裝置，其特征在于，所述的環形管路為菱形管路。

在另一優選例中，所述的第一管口(2)、第三管口(3)、第二管口(4)和第四管口(5)分別位于菱形管路的四個菱角處。

3.如權利要求1所述的裝置，其特征在于，所述液體輸送裝置為雙向輸送裝置。

4.如權利要求1所述的病毒密度梯度離心純化裝置的用途，其特征在于，用于通過密度梯度離心對含狂犬病病毒的物料進行純化。

5.一種狂犬病病毒密度梯度離心純化方法，其特征在于，所述方法包括步驟：

(1)提供一連續流密度梯度離心轉子，所述連續流密度梯度離心轉子被配置為圍繞所述連續流密度梯度離心轉子的中心軸旋轉離心，并且所述連續流密度梯度離心轉子設有用于容納物料的內腔，所述內腔的體積為V0，在底部設有物料入口，頂部設有物料出口；

(2)通過所述物料入口，在所述連續流密度梯度離心轉子的內腔中注入緩沖溶液，然后注入體積V1的55-65％(wt％)蔗糖溶液；

(3)對所述連續流密度梯度離心轉子以T1進行離心，從而在所述連續流密度梯度離心轉子的內腔形成蔗糖梯度溶液；其中，T1為3000-7000rpm；

(4)以T2離心條件下，以流速F1，將含狂犬病病毒的物料從所述物料入口注入內腔，其中，F1為90-240ml/min；其中，T2為30000-40000rpm；

(5)當含狂犬病病毒的物料注入操作結束后，在T2離心條件下，緩沖溶液從以流速F2從所述物料入口注入內腔，從而使得狂犬病病毒富集于所述蔗糖梯度溶液中，形成富含狂犬病病毒的梯度離心層；

其中，F2為90-240ml/min；

(6)對所述連續流密度梯度離心轉子的離心速度進行降速，從而使得轉速為0rpm；

(7)從所述連續流密度梯度離心轉子的底部物料入口，收集所述富含狂犬病病毒的梯度離心層，從而獲得純化的狂犬病病毒。

6.如權利要求5所述的方法，其特征在于，V1/V0＝0.4-0.6。

7.如權利要求5所述的方法，其特征在于，所述方法使用如權利要求1所述的病毒密度梯度離心純化裝置進行。