[發(fā)明專(zhuān)利]一種病毒密度梯度離心純化裝置在審
| 申請(qǐng)?zhí)枺?/td> | 202010368232.8 | 申請(qǐng)日: | 2020-04-30 |
| 公開(kāi)(公告)號(hào): | CN113583801A | 公開(kāi)(公告)日: | 2021-11-02 |
| 發(fā)明(設(shè)計(jì))人: | 安祺;劉珍珍;田大勇 | 申請(qǐng)(專(zhuān)利權(quán))人: | 上海青賽生物科技有限公司;北京賽爾富森生物科技有限公司 |
| 主分類(lèi)號(hào): | C12M1/00 | 分類(lèi)號(hào): | C12M1/00;C12N7/02;C12N7/00;A61K39/205;A61P31/14 |
| 代理公司: | 上海一平知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 31266 | 代理人: | 徐林強(qiáng);崔佳佳 |
| 地址: | 201502 上海市金山*** | 國(guó)省代碼: | 上海;31 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關(guān)鍵詞: | 一種 病毒 密度梯度離心 純化 裝置 | ||
1.一種病毒密度梯度離心純化裝置,其特征在于,所述的裝置包括環(huán)形管路和連續(xù)流密度梯度離心機(jī),所述的連續(xù)流密度梯度離心機(jī)包括連續(xù)流密度梯度離心轉(zhuǎn)子(1);
在所述的環(huán)形管路上依次設(shè)有第一管口(2)、第三管口(3)、第二管口(4)和第四管口(5),所述的第一管口與第三管口之間的管路上設(shè)有第一閥門(mén)(6),所述的第三管口與第二管口之間的管路上設(shè)有第二閥門(mén)(7),所述的第二管口與第四管口之間的管路上設(shè)有第三閥門(mén)(8),所述的第四管口與第一管口之間的管路上設(shè)有第四閥門(mén)(9);
所述的第一管口通過(guò)第一管道(10)與所述的連續(xù)流密度梯度離心轉(zhuǎn)子的上端相連,所述的第二管口通過(guò)第二管道(11)與所述的連續(xù)流密度梯度離心轉(zhuǎn)子的下端相連,所述的第三管口通過(guò)第三管道(12)與第一瓶體(13)相連,所述的第四管口通過(guò)第四管道(14)與第二瓶體(15)相連;
所述的第一管道上設(shè)有第五閥門(mén)(16),所述的第二管道上設(shè)有第六閥門(mén)(17);
所述的第三管道上設(shè)有液體輸送裝置(18)。
2.如權(quán)利要求1所述的裝置,其特征在于,所述的環(huán)形管路為菱形管路。
在另一優(yōu)選例中,所述的第一管口(2)、第三管口(3)、第二管口(4)和第四管口(5)分別位于菱形管路的四個(gè)菱角處。
3.如權(quán)利要求1所述的裝置,其特征在于,所述液體輸送裝置為雙向輸送裝置。
4.如權(quán)利要求1所述的病毒密度梯度離心純化裝置的用途,其特征在于,用于通過(guò)密度梯度離心對(duì)含狂犬病病毒的物料進(jìn)行純化。
5.一種狂犬病病毒密度梯度離心純化方法,其特征在于,所述方法包括步驟:
(1)提供一連續(xù)流密度梯度離心轉(zhuǎn)子,所述連續(xù)流密度梯度離心轉(zhuǎn)子被配置為圍繞所述連續(xù)流密度梯度離心轉(zhuǎn)子的中心軸旋轉(zhuǎn)離心,并且所述連續(xù)流密度梯度離心轉(zhuǎn)子設(shè)有用于容納物料的內(nèi)腔,所述內(nèi)腔的體積為V0,在底部設(shè)有物料入口,頂部設(shè)有物料出口;
(2)通過(guò)所述物料入口,在所述連續(xù)流密度梯度離心轉(zhuǎn)子的內(nèi)腔中注入緩沖溶液,然后注入體積V1的55-65%(wt%)蔗糖溶液;
(3)對(duì)所述連續(xù)流密度梯度離心轉(zhuǎn)子以T1進(jìn)行離心,從而在所述連續(xù)流密度梯度離心轉(zhuǎn)子的內(nèi)腔形成蔗糖梯度溶液;其中,T1為3000-7000rpm;
(4)以T2離心條件下,以流速F1,將含狂犬病病毒的物料從所述物料入口注入內(nèi)腔,其中,F(xiàn)1為90-240ml/min;其中,T2為30000-40000rpm;
(5)當(dāng)含狂犬病病毒的物料注入操作結(jié)束后,在T2離心條件下,緩沖溶液從以流速F2從所述物料入口注入內(nèi)腔,從而使得狂犬病病毒富集于所述蔗糖梯度溶液中,形成富含狂犬病病毒的梯度離心層;
其中,F(xiàn)2為90-240ml/min;
(6)對(duì)所述連續(xù)流密度梯度離心轉(zhuǎn)子的離心速度進(jìn)行降速,從而使得轉(zhuǎn)速為0rpm;
(7)從所述連續(xù)流密度梯度離心轉(zhuǎn)子的底部物料入口,收集所述富含狂犬病病毒的梯度離心層,從而獲得純化的狂犬病病毒。
6.如權(quán)利要求5所述的方法,其特征在于,V1/V0=0.4-0.6。
7.如權(quán)利要求5所述的方法,其特征在于,所述方法使用如權(quán)利要求1所述的病毒密度梯度離心純化裝置進(jìn)行。
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