[發(fā)明專(zhuān)利]一種病毒密度梯度離心純化裝置

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• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 202010368232.8
• 申請(qǐng)日: 2020-04-30
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN113583801A
• 公開(kāi)（公告）日: 2021-11-02
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 安祺;劉珍珍;田大勇
• 申請(qǐng)（專(zhuān)利權(quán)）人: 上海青賽生物科技有限公司;北京賽爾富森生物科技有限公司
• 主分類(lèi)號(hào): C12M1/00
• 分類(lèi)號(hào): C12M1/00;C12N7/02;C12N7/00;A61K39/205;A61P31/14
• 代理公司: 上海一平知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 31266
• 代理人: 徐林強(qiáng);崔佳佳

1.一種病毒密度梯度離心純化裝置，其特征在于，所述的裝置包括環(huán)形管路和連續(xù)流密度梯度離心機(jī)，所述的連續(xù)流密度梯度離心機(jī)包括連續(xù)流密度梯度離心轉(zhuǎn)子(1)；

在所述的環(huán)形管路上依次設(shè)有第一管口(2)、第三管口(3)、第二管口(4)和第四管口(5)，所述的第一管口與第三管口之間的管路上設(shè)有第一閥門(mén)(6)，所述的第三管口與第二管口之間的管路上設(shè)有第二閥門(mén)(7)，所述的第二管口與第四管口之間的管路上設(shè)有第三閥門(mén)(8)，所述的第四管口與第一管口之間的管路上設(shè)有第四閥門(mén)(9)；

所述的第一管口通過(guò)第一管道(10)與所述的連續(xù)流密度梯度離心轉(zhuǎn)子的上端相連，所述的第二管口通過(guò)第二管道(11)與所述的連續(xù)流密度梯度離心轉(zhuǎn)子的下端相連，所述的第三管口通過(guò)第三管道(12)與第一瓶體(13)相連，所述的第四管口通過(guò)第四管道(14)與第二瓶體(15)相連；

所述的第一管道上設(shè)有第五閥門(mén)(16)，所述的第二管道上設(shè)有第六閥門(mén)(17)；

所述的第三管道上設(shè)有液體輸送裝置(18)。

2.如權(quán)利要求1所述的裝置，其特征在于，所述的環(huán)形管路為菱形管路。

在另一優(yōu)選例中，所述的第一管口(2)、第三管口(3)、第二管口(4)和第四管口(5)分別位于菱形管路的四個(gè)菱角處。

3.如權(quán)利要求1所述的裝置，其特征在于，所述液體輸送裝置為雙向輸送裝置。

4.如權(quán)利要求1所述的病毒密度梯度離心純化裝置的用途，其特征在于，用于通過(guò)密度梯度離心對(duì)含狂犬病病毒的物料進(jìn)行純化。

5.一種狂犬病病毒密度梯度離心純化方法，其特征在于，所述方法包括步驟：

(1)提供一連續(xù)流密度梯度離心轉(zhuǎn)子，所述連續(xù)流密度梯度離心轉(zhuǎn)子被配置為圍繞所述連續(xù)流密度梯度離心轉(zhuǎn)子的中心軸旋轉(zhuǎn)離心，并且所述連續(xù)流密度梯度離心轉(zhuǎn)子設(shè)有用于容納物料的內(nèi)腔，所述內(nèi)腔的體積為V0，在底部設(shè)有物料入口，頂部設(shè)有物料出口；

(2)通過(guò)所述物料入口，在所述連續(xù)流密度梯度離心轉(zhuǎn)子的內(nèi)腔中注入緩沖溶液，然后注入體積V1的55-65％(wt％)蔗糖溶液；

(3)對(duì)所述連續(xù)流密度梯度離心轉(zhuǎn)子以T1進(jìn)行離心，從而在所述連續(xù)流密度梯度離心轉(zhuǎn)子的內(nèi)腔形成蔗糖梯度溶液；其中，T1為3000-7000rpm；

(4)以T2離心條件下，以流速F1，將含狂犬病病毒的物料從所述物料入口注入內(nèi)腔，其中，F(xiàn)1為90-240ml/min；其中，T2為30000-40000rpm；

(5)當(dāng)含狂犬病病毒的物料注入操作結(jié)束后，在T2離心條件下，緩沖溶液從以流速F2從所述物料入口注入內(nèi)腔，從而使得狂犬病病毒富集于所述蔗糖梯度溶液中，形成富含狂犬病病毒的梯度離心層；

其中，F(xiàn)2為90-240ml/min；

(6)對(duì)所述連續(xù)流密度梯度離心轉(zhuǎn)子的離心速度進(jìn)行降速，從而使得轉(zhuǎn)速為0rpm；

(7)從所述連續(xù)流密度梯度離心轉(zhuǎn)子的底部物料入口，收集所述富含狂犬病病毒的梯度離心層，從而獲得純化的狂犬病病毒。

6.如權(quán)利要求5所述的方法，其特征在于，V1/V0＝0.4-0.6。

7.如權(quán)利要求5所述的方法，其特征在于，所述方法使用如權(quán)利要求1所述的病毒密度梯度離心純化裝置進(jìn)行。