[發明專利]蘇云金芽孢桿菌Cry2A毒素的單克隆抗體及其應用有效
| 申請號: | 202010350203.9 | 申請日: | 2020-04-28 |
| 公開(公告)號: | CN111363722B | 公開(公告)日: | 2022-11-22 |
| 發明(設計)人: | 劉賢金;李懿航;范榮榮;劉媛;郝佳 | 申請(專利權)人: | 江蘇省農業科學院 |
| 主分類號: | C12N5/20 | 分類號: | C12N5/20;C07K16/12;G01N33/68;G01N33/58;G01N33/577;G01N33/543 |
| 代理公司: | 江蘇圣典律師事務所 32237 | 代理人: | 楊文晰 |
| 地址: | 210014 江*** | 國省代碼: | 江蘇;32 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 蘇云金 芽孢 桿菌 cry2a 毒素 單克隆抗體 及其 應用 | ||
1.一種分泌蘇云金芽孢桿菌Cry2A單克隆抗體的雜交瘤細胞株,該雜交瘤細胞株保藏號為CCTCC NO:C2019188。
2.如權利要求1所述雜交瘤細胞株分泌獲得的蘇云金芽孢桿菌Cry2A單克隆抗體。
3.如權利要求1所述雜交瘤細胞株分泌獲得的蘇云金芽孢桿菌Cry2A單克隆抗體在Cry2A毒素檢測中的應用。
4.如權利要求3所述的應用,其特征在于,具體步驟如下:
1)將Cry2A毒素多克隆抗體用PBS緩沖液稀釋到0.5μg/ml,加入到酶標板中,100μl/孔,4℃過夜;次日PBST洗板,加入MPBS,孵育1h;PBST洗板后,CBS緩沖液將待測樣品稀釋后加到酶標板中,100μl/孔,同時用CBS作為空白對照,孵育1h;
2)PBST洗板,孔內加入0.5μg/mlCry2A單克隆抗體,100μl/孔,孵育1h;PBST洗板后,每孔加入100μl HRP標記的羊抗鼠抗體,孵育1h;
所述Cry2A單克隆抗體是由保藏號為CCTCC NO:C2019188的雜交瘤細胞株分泌獲得的;
3)PBST洗板,將TMB顯色液加入到酶標板微孔內,100μl/孔,并置于37℃培養箱孵育15min;若出現藍色,則待檢樣品中含有 Cry2A毒素。
5.一種包括蘇云金芽孢桿菌Cry2A單克隆抗體的Cry2A毒素檢測試劑盒,所述蘇云金芽孢桿菌Cry2A單克隆抗體是由保藏號為CCTCC NO:C2019188的雜交瘤細胞株制備獲得的。
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