[發明專利]高含量DSM作為椴樹蜂蜜特征性標志物的應用

有效

• 申請號: 202010329667.1
• 申請日: 2020-04-24
• 公開（公告）號: CN111220763B
• 公開（公告）日: 2020-08-11
• 發明（設計）人: 楊術鵬;李熠;譚海廣;周金慧;張金震;金鑰;楊宇輝;黃京平;袁媛
• 申請（專利權）人: 中國農業科學院蜜蜂研究所
• 主分類號: G01N30/88
• 分類號: G01N30/88;G01N30/06
• 代理公司: 北京路浩知識產權代理有限公司 11002
• 代理人: 陳征

1.高含量DSM作為椴樹蜂蜜特征性標志物的應用，所述高含量為250-450 mg/kg，所述DSM的化學結構如下：

。

2.一種椴樹蜂蜜的真實性評價方法，其特征在于，以DSM為特征化合物，采用UHPLC-Q-Orbitrap 和/或 LC-MS/MS檢測蜂蜜樣本，若蜂蜜樣本中DSM的含量介于250-450 mg/kg時，判斷所述蜂蜜樣本為椴樹蜂蜜；反之，則判定所述蜂蜜樣本為其它蜂蜜或者摻假椴樹蜂蜜；

其中，所述DSM的化學結構如下：

；

采用UHPLC-QOrbitrap對蜂蜜樣本進行檢測時，液相條件如下：采用C18色譜柱，以0.1%的甲酸水為流動相A，0.1%的甲酸乙腈為B，采用梯度洗脫程序分離：0-2.0 min，5%的流動相B；2.0-7.0 min，5-30%的流動相B；7.0-14min，30-95%的流動相B；14-18 min，95%的流動相B；18.0-18.1 min，95-5%的流動相B；18.1-20.0 min，5%的流動相B；質譜條件如下：離子源參數：鞘氣的流速45 arb；輔助氣的流速10 arb；擋錐氣的流速0 arb； 電噴霧電壓3.5 kV；離子導管的溫度320 ℃；S-lens RF level設為 60；離子源的溫度350 ℃；采集的模式為負離子模式下的Full MS-ddMS²，掃描范圍包含551.19814 Da，碰撞能量為35；

采用LC-MS/MS對蜂蜜樣本進行檢測時，液相條件如下：采用C18色譜柱，柱溫為25℃，以0.1%的甲酸水為流動相A，0.1%的甲酸乙腈為流動相B；采用梯度洗脫程序分離：0-0.8 min，5%的流動相B；0.8-1.2 min，5-40%的流動相B；1.2-2.5 min，40-90%的流動相B；2.5-3.5min，90%的流動相B；3.5-3.6 min，90-5%的流動相B；3.6-6.0 min，5%的流動相B；質譜條件如下：電噴霧離子源；掃描方式：負離子掃描；監測方式：多反應監測；離子噴霧電壓：3500V；霧化氣壓力：45 psi；干燥氣溫度：300℃；干燥氣流速：5 L /min；鞘氣溫度：250℃；鞘氣流速：11 L /min；采集的模式為負離子模式下的MRM模式，MRM參數如下：Fragementor：125V, 551.0505.0，5 eV，551.0341.0，18 eV。

3.根據權利要求2所述的真實性評價方法，其特征在于，DSM在UHPLC-Q-Orbitrap的精確提取離子流色譜圖中含有m/z 551.19814（[M+CH₂O₂-H]^-）準分子離子峰，其精確質量數的誤差應當小于5 ppm；DSM色譜峰的保留時間為5.86 min，保留時間偏差小于0.2min。

4.根據權利要求2所述的真實性評價方法，其特征在于，DSM的MS/MS圖譜中應含有m/z341.10784、m/z 181.08592、m/z 89.02332、 m/z 101.02332、m/z 119.03389中的一個或多個碎片離子峰，其精確質量數的誤差應當小于10 ppm。

5.根據權利要求2所述的真實性評價方法，其特征在于，在檢測前，還包括利用20%甲醇水對所述蜂蜜樣本進行提取的步驟；所述蜂蜜樣本與甲醇水的質量體積比1：（9~11），在所述甲醇水中，甲醇與水的體積比為2：（7~9）。