[發(fā)明專利]木犀草素基碳點(diǎn)作為MALDI-TOF MS基質(zhì)對(duì)氨基酸的檢測(cè)

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 202010325452.2
• 申請(qǐng)日: 2020-04-23
• 公開（公告）號(hào): CN111517302B
• 公開（公告）日: 2023-04-07
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 金彪;趙亞男;孟龍?jiān)?/a>
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 延邊大學(xué)
• 主分類號(hào): C01B32/15
• 分類號(hào): C01B32/15;C09K11/65;B82Y20/00;B82Y40/00;G01N27/64
• 代理公司: 長(zhǎng)春市東師專利事務(wù)所 22202
• 代理人: 張鐵生

本發(fā)明公開了木犀草素基碳點(diǎn)作為MALDI?TOF?MS基質(zhì)對(duì)氨基酸的檢測(cè)及在檢測(cè)氨基酸方面的應(yīng)用；本發(fā)明有益效果：可提高碳點(diǎn)量子產(chǎn)率，提高共結(jié)晶穩(wěn)定性；氮摻雜木犀草素基碳點(diǎn)提高量子產(chǎn)率，并且增加電子傳遞效率，增強(qiáng)基質(zhì)效應(yīng)；木犀草素基碳點(diǎn)及氮摻雜木犀草素基碳點(diǎn)作為MALDI?TOF?MS基質(zhì)對(duì)氨基酸檢測(cè)結(jié)果顯示，基質(zhì)背景干擾小，特征信號(hào)峰明顯，對(duì)多種氨基酸具有適用性。該基質(zhì)材料對(duì)氨基酸的檢測(cè)性能有望在化學(xué)、生物、醫(yī)藥、環(huán)境領(lǐng)域具有重要的應(yīng)用前景。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬于氨基酸檢測(cè)技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及木犀草素基碳點(diǎn)作為MALDI-TOF?MS基質(zhì)對(duì)氨基酸的檢測(cè)。

背景技術(shù)

近年來(lái)，MALDI-TOF?MS由于其軟電離、高通量、質(zhì)量檢測(cè)范圍寬、準(zhǔn)確度高、靈敏度高、耐鹽度高、樣品需求量少、分析速度快等優(yōu)點(diǎn)被廣泛應(yīng)用于蛋白質(zhì)、多肽、多糖、寡核苷酸及氨基酸等生物分子檢測(cè)領(lǐng)域。基質(zhì)在MALDI-TOF?MS檢測(cè)過程中起著舉足輕重的作用，不僅可以提高待測(cè)分子的分散度，并且能吸收激光能量轉(zhuǎn)化為待測(cè)分子的激發(fā)能，從而使待測(cè)分子在MALDI-TOF?MS中被電離及檢測(cè)。常見基質(zhì)類型主要分為有機(jī)基質(zhì)與無(wú)機(jī)基質(zhì)，其中，金屬材料、沸石材料及半導(dǎo)體材料等無(wú)機(jī)基質(zhì)由于離子化效率高、結(jié)晶均勻等優(yōu)點(diǎn)被廣泛應(yīng)用于生物分子物質(zhì)的檢測(cè)。然而，金屬材料價(jià)格昂貴，且制備過程復(fù)雜，半導(dǎo)體材料實(shí)用性差，沸石材料性能不穩(wěn)定等缺點(diǎn)使得MALDI-TOF?MS檢測(cè)生物分子存在一定的局限性。開發(fā)新型MALDI-TOF?MS基質(zhì)，已經(jīng)成為MALDI-TOF?MS質(zhì)譜分析中具有關(guān)鍵性與創(chuàng)新性的研究方向。

近年來(lái)，碳材料因其優(yōu)良的電子轉(zhuǎn)移能力和較強(qiáng)的激光能量吸收能力，良好的化學(xué)穩(wěn)定性，不易與生物分子發(fā)生反應(yīng)等特性在MALDI-TOF?MS檢測(cè)生物分子領(lǐng)域備受關(guān)注。碳微球作為一種小尺寸碳材料，由于其低成本、良好的導(dǎo)電性及來(lái)源廣泛等優(yōu)點(diǎn)使得作為基質(zhì)在檢測(cè)生物分子領(lǐng)域得到進(jìn)一步拓展。碳點(diǎn)作為納米級(jí)材料，由于其顆粒尺寸小，共結(jié)晶分散均勻，可進(jìn)行元素?fù)诫s等優(yōu)勢(shì)被作為MALDI-TOF?MS基質(zhì)。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明目的是為解決碳點(diǎn)量子產(chǎn)率與電子傳遞效率低的問題，而提供一種木犀草素基碳點(diǎn)的制備及應(yīng)用。

一種木犀草素基碳點(diǎn)，它是由下述方法制備的：

1）將0.01-0.5g木犀草素加入聚四氟乙烯反應(yīng)釜中，加入20mL去離子水，攪拌均勻，在反應(yīng)溫度80-350℃，反應(yīng)時(shí)間1-60h下得到反應(yīng)產(chǎn)物；

2）將步驟1）得到的反應(yīng)產(chǎn)物經(jīng)5000~10000rpm離心處理15~30min，得到澄清的上層碳點(diǎn)溶液；

3）將步驟2）中得到的碳點(diǎn)溶液通過0.22μm濾紙過濾，得到下層碳點(diǎn)溶液；

4）將步驟3）中得到的碳點(diǎn)溶液通過透析粒徑為1000Da的透析袋進(jìn)行透析處理40~60h，每6h更換一次去離子水；

5）干燥，得到木犀草素基碳點(diǎn)；

步驟1）所述的木犀草素為0.03~0.2g，反應(yīng)溫度為160~200℃，反應(yīng)時(shí)間為12~36h。

一種氮摻雜木犀草素基碳點(diǎn)，它是由下述方法制備的：

1）將0.01-0.5g木犀草素加入聚四氟乙烯反應(yīng)釜中，加入20mL去離子水，加入雙氧水、乙二胺，攪拌均勻，在反應(yīng)溫度80-350℃，反應(yīng)時(shí)間1-60h下得到反應(yīng)產(chǎn)物；所述的木犀草素、雙氧水、乙二胺摩爾比為0.00024：1：0.001-10；

2）將步驟1）得到的反應(yīng)產(chǎn)物經(jīng)5000~10000rpm離心處理15~30min，得到澄清的上層氮摻雜木犀草素基碳點(diǎn)溶液；

3）將步驟2）中得到的碳點(diǎn)溶液通過0.22μm濾紙過濾，得到下層氮摻雜木犀草素基碳點(diǎn)溶液；