[發明專利]一種包含13個快速突變Y-STR基因座的復合擴增檢測體系、方法及應用

有效

• 申請號: 202010325212.2
• 申請日: 2020-04-23
• 公開（公告）號: CN111471777B
• 公開（公告）日: 2022-08-26
• 發明（設計）人: 尚蕾;丁光樹;莫曉婷;白雪;馬溫華;李萬水;孫輝
• 申請（專利權）人: 公安部物證鑒定中心
• 主分類號: C12Q1/6888
• 分類號: C12Q1/6888;C12Q1/6858
• 代理公司: 北京冠榆知識產權代理事務所(特殊普通合伙) 11666
• 代理人: 朱亞琦

本發明公開一種包含13個快速突變Y?STR基因座的復合擴增檢測體系、方法及應用，包括13個基因座、以及對應13個基因座引物的熒光標記染料。本發明研制一套包含13個快速突變Y?STR基因座的復合擴增檢測體系，選用五色熒光技術(藍色FAM、綠色HEX、黃色TAMRA、紅色ROX、橙色)，進行復合擴增，可實現對DNA樣本的良好擴增：峰型尖銳、無雜帶、平衡性好。該體系將可應用于男性家系排查中的精細化識別，為偵查辦案提供技術支撐。

技術領域

本發明涉及遺傳標記技術領域。具體地說是一種包含13個快速突變 Y-STR基因座的復合擴增檢測體系、方法及應用。

背景技術

Y-STR遺傳標記是目前法庭科學領域檢驗鑒定的有效手段，是常染色體 STR及線粒體遺傳標記等的重要補充。由于Y染色體為男性個體所特有，其上 絕大部分(95％以上)為非重組區，Y-STR呈現父系遺傳特點，在父系遺傳關 系鑒定和混合斑男性個體檢驗等方面發揮著重要作用。同時，利用Y-STR在 一個家系中相對保守的特點，可對重點地區的家系進行Y-STR分型檢驗，開 展家系排查，從而輔助偵查人員快速鎖定嫌疑人所在家系，加快案件的進程。 近年來，Y-STR技術已幫助破獲了大量命案積案。

隨著Y-STR技術的發展，國內外Y-STR相關的擴增檢驗體系不斷完善， 試劑產品也不斷豐富。最初，Y-STR擴增檢測體系僅可檢驗幾個Y-STR基因座。 隨后，試劑體系中基因座數量不斷增加，檢驗效能不斷增強。如國外知名公 司Promega和ABI分別推出的PowerPlexY System和Yfiler試劑盒分別包 含12、17個Y-STR基因座，而后，兩家公司各研制了新型產品PowerPlex Y23 System和Yfiler Plus，可分別檢驗23、27個Y-STR基因座。在國內，公安部物證鑒定中心自主研發了DNATyperY系列試劑，無錫中德美聯生物技術有 限公司、蘇州閱微基因技術有限公司等也不斷推出Y-STR檢驗試劑，目前已 有包含30個Y-STR基因座的六色熒光擴增檢測產品。它們不僅在男女成分混 合或者多個男性成分混合的檢材中發揮了重要的鑒定作用，而且可以協助尋 找犯罪嫌疑人所在家系，大大地縮小偵查范圍。

然而，長期的工作發現，對男性近親的檢驗時常需要更多的基因座分型 數據，在進行家系排查時，也常遇到不同家系Y-STR分型近乎一致的情況。 這反映出現有的單一Y-STR檢驗試劑在特定情況下不能滿足檢驗需求。聯用 多個試劑盒可在一定程度上解決上述問題，但由于現有Y-STR試劑中包含的 基因座絕大多數突變率在1×10^-3-1×10^-4之間，相對保守，因而針對父子對、 兄弟對等父系親緣關系極為接近的個體，它們的分辨能力仍顯不足。那么， 選擇突變率更高的基因座，作為對現有試劑盒的一個補充，將可能極大地增強系統分辨力，以達到更佳的檢驗效能。

Ballantyne等(2010)針對186個Y-STR基因座開展突變調查，發現 了13個突變率高于1×10^-2的基因座(包含5個多拷貝基因座和8個單拷貝 基因座)，并首次將其命名為快速突變Y-STR(rapidly-mutating Y-STRs， RM Y-STRs)。他們指出，這些Y-STR突變率遠遠高于之前發現的Y-STR基因 座(突變率在1×10^-3-1×10^-4)，因而在區分近緣個體方面擁有絕對優勢。

隨后，大量研究探討了快速突變Y-STR的應用效能。研究表明，快速突變 Y-STR基因座在區分無關男性個體或者男性近親屬方面均具有重要價值，且 快速突變Y-STR體系較其他試劑盒(如PowerPlexY23，Yfiler等)具有更 高的分辨力。

實際上，近年來國內外針對快速突變Y-STR也開展了復合擴增體系的研究， 但所建立的體系并不完善：