[發明專利]一種包含13個快速突變Y-STR基因座的復合擴增檢測體系、方法及應用

有效

• 申請號: 202010325212.2
• 申請日: 2020-04-23
• 公開（公告）號: CN111471777B
• 公開（公告）日: 2022-08-26
• 發明（設計）人: 尚蕾;丁光樹;莫曉婷;白雪;馬溫華;李萬水;孫輝
• 申請（專利權）人: 公安部物證鑒定中心
• 主分類號: C12Q1/6888
• 分類號: C12Q1/6888;C12Q1/6858
• 代理公司: 北京冠榆知識產權代理事務所(特殊普通合伙) 11666
• 代理人: 朱亞琦

1.一種用于包含13個快速突變Y-STR基因座的復合擴增檢測的組合物，其特征在于，包括13個基因座的擴增引物、以及對應13個基因座引物的熒光標記染料；

所述13個基因座分別為DYF387S1、DYF399S1、DYF403S1、DYF404S1、DYS526a/b、DYS449、DYS518、DYS547、DYS570、DYS576、DYS612、DYS626和DYS627，其中DYF403S1可以細分為DYF403S1a、DYF403S1b1和DYF403S1b2；

DYF387S1、DYF399S1、DYF403S1a、DYF403S1b1/b2、DYF404S1、DYS526a/b、DYS449、DYS518、DYS547、DYS570、DYS576、DYS612、DYS626和DYS627的擴增引物對序列分別為序列表中SEQ ID No.1至SEQ ID No.28的核苷酸序列；

對應13個基因座引物的熒光標記染料分別為：藍色熒光染料FAM、綠色熒光染料HEX、黃色熒光染料TAMRA、紅色熒光染料ROX和橙色熒光染料；

所述藍色熒光染料FAM的結構如下所示：

；

所述綠色熒光染料HEX的結構如下所示：

；

所述黃色熒光染料TAMRA的結構如下所示：

；

所述紅色熒光染料ROX的結構如下所示：

；

所述橙色熒光染料作為內標染料使用；

藍色熒光染料FAM標記：DYS526a/b、DYF404S1和DYF399S1基因座的引物；

綠色熒光染料HEX標記：DYS570、DYS612、DYF387S1和DYS449基因座的引物；

黃色熒光染料TAMRA標記：DYF403S1a、DYS627、DYS518、DYS576基因座的引物；

紅色熒光染料ROX標記：DYF403S1b1、DYF403S1b2、DYS626和DYS547基因座的引物。

2.利用權利要求1所述的組合物的復合擴增檢測方法，其特征在于，包括如下步驟：

（1）熒光體系的構建：采用權利要求1中所述熒光染料標記13個快速突變Y-STR基因座的擴增引物，13個快速突變Y-STR基因座的擴增引物如序列表中SEQ ID No.1至SEQ IDNo.28的核苷酸序列；

（2）復合擴增體系的構建：使用步驟（1）得到的熒光染料標記的擴增引物對待檢測DNA進行擴增，獲得擴增產物；

（3）對擴增產物進行毛細管電泳分離；

在步驟（3）中，13個快速突變Y-STR基因座的長度范圍分別是：

藍色熒光：DYS526a：125-170bp、DYF404S1：172-211bp、DYF399S1：250-322bp、DYS526b：334-400bp；

綠色熒光：DYS570：88-163bp、DYS612：170-240bp、DYF387S1：264-318bp、DYS449：324-392bp；

黃色熒光：DYF403S1a：160-230bp、DYS627：240-295bp、DYS518：303-376bp、DYS576：386-436bp；

紅色熒光：DYF403S1b1：178-221bp、DYF403S1b2：288-360bp、DYS626：230-275bp、DYS547：390-455bp。