[發明專利]共同基團法結合UPLC-MSMS檢測植物源農產品中螺蟲乙酯及其烯醇代謝物的方法

在審

• 申請號: 202010324512.9
• 申請日: 2020-04-23
• 公開（公告）號: CN111458439A
• 公開（公告）日: 2020-07-28
• 發明（設計）人: 王全勝;付巖;張亮;凌淑萍;吳銀良;張艷
• 申請（專利權）人: 寧波市農業科學研究院
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02;G01N30/06;G01N30/14;G01N30/72;G01N30/86
• 代理公司: 寧波誠源專利事務所有限公司 33102
• 代理人: 袁忠衛;莫夢婷

本發明涉及一種共同基團法結合UPLC?MSMS檢測植物源農產品中螺蟲乙酯及其烯醇代謝物的方法，其特征在于包含以下步驟：a、取植物源性農產品，加入提取溶劑，勻漿分散提取，離心分層，取上清液，再次重復提取后，合并上清液；b、a步驟中上清液加入氯化鈉，混勻，離心，取上層；c、取b步驟中上清液與PSA、C18和無水硫酸鎂混勻，離心，取上清；d、c步驟中上清液與一定體積0.1％甲酸溶液定容，作為待測樣品；e、采用共同基團法結合UPLC?MSMS進行檢測。與現有技術相比，本發明的優點在于：采用共同基團法進行檢測，降低了駐留時間的不利影響，降低了基質抑制效應，提高了殘留分析的穩定性和簡便性。

技術領域

本發明涉及一種共同基團檢測方法，具體涉及一種共同基團法結合UPLC-MSMS檢測植物源農產品中螺蟲乙酯及烯醇代謝物的方法。

背景技術

螺蟲乙酯(Spirotetramat)，化學名稱為4-(乙氧基羰基氧基)-8-甲氧基-3-(2,5-二甲苯基)-1-氮雜螺[4,5]癸-3-烯-2-酮，結構如圖1所示。

螺蟲乙酯是由Bayer公司研發的一種具備雙向內吸性的酮類廣譜高效殺蟲劑，其可在植物體內向上或向下傳導，害蟲取食后體內乙酰輔酶A羧化酶被抑制進而導致脂肪合成被中斷，從而起到殺蟲作用。螺蟲乙酯可有效防治各種刺吸式口器害蟲，如蚜蟲、薊馬、木虱、粉蚧、粉虱和介殼蟲等。可應用的主要作物包括棉花、大豆、柑橘、熱帶果樹、堅果、葡萄、啤酒花、土豆和蔬菜等，另據研究表明其對重要益蟲如瓢蟲、食蚜蠅和寄生蜂具有良好的選擇性。螺蟲乙酯作為一種較為新穎的殺蟲劑具有廣闊的未來市場，目前其單劑或復配制劑在我國的登記數量已達近八十種，覆蓋番茄、甘藍、柑橘、柑橘等多種農作物。

研究表明，螺蟲乙酯使用后會于植物或環境中發生代謝降解，其于植物上的主要代謝產物有四種，分別是螺蟲乙酯烯醇、螺蟲乙酯烯醇葡萄糖苷、羥基螺蟲乙酯酮、單羥基螺蟲乙酯，主要代謝途徑如圖2所示。其中，根據GB 2763-2019《食品安全國家標準-食品中農藥最大殘留限量》，螺蟲乙酯的殘留物為螺蟲乙酯及其烯醇類代謝產物之和(以螺蟲乙酯表示)，因此為科學監測螺蟲乙酯的殘留風險，需對螺蟲乙酯及其烯醇代謝物進行檢測，而相對應的多組分殘留分析方法研究是其重要的技術支撐。

目前，螺蟲乙酯的殘留分析方法主要結合液相色譜串聯質譜法(LC-MSMS)、液相色譜法(LC)、氣相色譜法(GC)進行，其中液相色譜串聯質譜法因具有對多組分分離度要求低、檢測通量大等優點而被廣泛使用。如錢訓等利用QuEChERS方法結合UPLC-MSMS檢測梨中的螺蟲乙酯及其代謝物、蘭豐等利用UPLC-MSMS檢測果蔬中的螺蟲乙酯及其代謝物殘留。然而，在UPLC-MSMS使用中存在著一個不可忽視的問題：分析組分較多時，駐留時間無法滿足最低的色譜峰采集點數要求，從而導致目標組分檢測重現性低、定量不準確等問題。顯然，這對于殘留風險監測與評估是不利的。因此，需要發明一種可靠的、抗干擾能力強的、高效的螺蟲乙酯及其烯醇代謝物殘留分析方法。

發明內容

本發明所要解決的技術問題是針對現有技術的現狀，提供一種共同基團法結合UPLC-MSMS檢測植物源農產品中螺蟲乙酯及烯醇代謝物的方法，該方法可以通過檢測三種組分的共同基團部分分別對其進行定性定量分析，具有可靠性高、抗干擾能力強的、重現性高、高效等特點。

本發明解決上述技術問題所采用的技術方案為：一種共同基團法結合UPLC-MSMS檢測植物源農產品中螺蟲乙酯及其烯醇代謝物的方法，其特征在于包括以下步驟：

a、取均質后的植物源農產品樣品，加入提取溶劑乙腈，勻漿分散提取，離心分層，取上清液，剩余殘渣按前述步驟重復提取，取上清液，合并兩次離心得到的上清液得到上清液A；

其中，所述樣品和乙腈的質量體積比為0.25～0.5g/mL；

b、向步驟a得到的上清液A里加入氯化鈉，振蕩，離心分層，取上清液后得到上清液B；