[發(fā)明專利]一種用于高效液相色譜儀檢測丙戊酸血藥濃度的衍生物的制備方法

在審

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• 申請日: 2020-04-22
• 公開（公告）號: CN111337601A
• 公開（公告）日: 2020-06-26
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 代偉;李蘭蘭;虎亞光;楊濤
• 申請（專利權(quán)）人: 代偉
• 主分類號: G01N30/06
• 分類號: G01N30/06;G01N30/74
• 代理公司: 蘭州錦知源專利代理事務(wù)所(普通合伙) 62204
• 代理人: 勾昌羽

1.一種用于高效液相色譜儀檢測丙戊酸血藥濃度的衍生物的制備方法，其特征在于，是將催化劑、丙戊酸衍生化試劑置于密閉玻璃管中，采用一鍋煮合成法制備得到的衍生物。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種用于高效液相色譜儀檢測丙戊酸血藥濃度的衍生物的制備方法，其特征在于，包括以下步驟：精密量取25-200μl質(zhì)控血清或樣本血清，加入內(nèi)標(biāo)溶液25-100μl，再加入1-5mol/L硫酸溶液50-400μl，混合均勻，再加入正己烷1-4ml渦旋振搖1-2min,并在3000-5000r/min離心機(jī)離心5min，吸取上清液，加入乙腈200-800μl、催化劑25-70μl，衍生化試劑乙腈溶液50-200μl放置試管中，密閉混合均勻，放在20-70℃超聲波水浴恒溫振蕩器中，在試管密閉條件下反應(yīng)5-30min反應(yīng)結(jié)束，下層液體即為所述衍生物，取下層液體直接進(jìn)行高效液相色譜儀進(jìn)樣檢測即可。

3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的一種用于高效液相色譜儀檢測丙戊酸血藥濃度的衍生物的制備方法，其特征在于，所述質(zhì)控血清或樣本血清中，丙戊酸濃度為1-250μg/ml。

4.根據(jù)權(quán)利要求2所述的一種用于高效液相色譜儀檢測丙戊酸血藥濃度的衍生物的制備方法，其特征在于，所述內(nèi)標(biāo)溶液為正庚酸的正己烷溶液。

5.根據(jù)權(quán)利要求2所述的一種用于高效液相色譜儀檢測丙戊酸血藥濃度的衍生物的制備方法，其特征在于，所述催化劑為三乙胺。

6.根據(jù)權(quán)利要求2所述的一種用于高效液相色譜儀檢測丙戊酸血藥濃度的衍生物的制備方法，其特征在于，所述衍生化試劑乙腈溶液為2，4′-二溴苯乙酮乙腈溶液。

7.根據(jù)權(quán)利要求2-6任一所述的一種用于高效液相色譜儀檢測丙戊酸血藥濃度的衍生物的制備方法，其特征在于，所述質(zhì)控血清或樣本血清用量為100μl；所述內(nèi)標(biāo)溶液為正庚酸的正己烷溶液2mg/ml，用量為25μl；所述硫酸溶液濃度為3mol/L，用量為200μl；所述正己烷用量為1.5ml；所述乙腈用量為400μl；所述催化劑三乙胺的用量為35μl；所述衍生化試劑乙腈溶液，即2，4′-二溴苯乙酮乙腈溶液的濃度為2mg/ml，用量為100μl；所述超聲波水浴恒溫振蕩器的加熱溫度為40℃，反應(yīng)時間為10min。

8.根據(jù)權(quán)利要求7所述的一種用于高效液相色譜儀檢測丙戊酸血藥濃度的衍生物的制備方法，其特征在于，所述衍生物在高效液相色譜儀中的檢測條件是，色譜柱規(guī)格為250mm×4.6mm，5μm的C18柱；左泵流動相，乙腈：水的體積比為90：10；右泵流動相，甲醇：水的體積比為10：90,流速，1ml/min；進(jìn)樣量20μl；柱溫，30℃；檢測波長，248nm；內(nèi)標(biāo)保留時間6.5min，丙戊酸保留時間7.6min。