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[發明專利]STXBP1突變動物模型的構建及其應用有效

專利信息
申請號: 202010317918.4 申請日: 2020-04-21
公開(公告)號: CN113528584B 公開(公告)日: 2023-07-21
發明(設計)人: 孫強;陸宗陽;劉真;熊志奇;姜建 申請(專利權)人: 中國科學院腦科學與智能技術卓越創新中心
主分類號: C12N15/90 分類號: C12N15/90;C12N9/22;A01K67/027
代理公司: 上海一平知識產權代理有限公司 31266 代理人: 王正君;徐迅
地址: 200031 *** 國省代碼: 上海;31
權利要求書: 查看更多 說明書: 查看更多
摘要:
搜索關鍵詞: stxbp1 突變 動物 模型 構建 及其 應用
【權利要求書】:

1.一種非人哺乳動物的早期嬰兒癲癇性腦病動物模型的制備方法,其特征在于,所述方法包括以下步驟:

(a)?提供非人哺乳動物的細胞,對所述細胞中的Stxbp1基因進行點突變,從而得到Stxbp1基因點突變的細胞;

(b)?利用步驟(a)中得到的Stxbp1基因點突變的細胞,制備具有Stxbp1基因點突變的動物模型;

其中,在所述的動物模型中,Stxbp1基因點突變是雜合型,所述的Stxbp1基因點突變為將STXBP1蛋白的SEQ?ID?No.:?1中的第292位的氨基酸R突變為H;

所述步驟(b)中得到的非人哺乳動物模型中,與野生型對照動物相比,具有以下特征:

(a)?表現出了癲癇行為和EIEE的典型EEG表型;

(b)?出現了痙攣的早期發作;

(c)?顯示典型的爆發-抑制模式,以及發作間期癲癇樣放電;

(d)?A1腦電譜中低頻振蕩的頻率明顯更高,所述非人哺乳動物為非人靈長類動物。

2.如權利要求1所述的制備方法,其特征在于,所述STXBP1蛋白來源于非人靈長類動物。

3.如權利要求2所述的制備方法,其特征在于,所述STXBP1蛋白來源于猴或黑猩猩。

4.如權利要求3所述的制備方法,其特征在于,所述STXBP1蛋白來源于食蟹猴。

5.如權利要求1所述的制備方法,其特征在于,在步驟(a)中,將含有堿基編輯器的編碼核酸和gRNA的載體注射入所述細胞,從而對所述細胞中的內源STXBP1基因進行定點突變。

6.一種權利要求1所述方法制備的非人哺乳動物模型的用途,其特征在于,將該模型被用于篩選可治療早期嬰兒癲癇性腦病的物質。

7.一種篩選治療早期嬰兒癲癇性腦病的潛在治療劑的方法,其特征在于,包括以下步驟:

(a)?在測試組中,在測試化合物的存在下,將測試化合物施用于權利要求1所述方法制備的非人哺乳動物模型,對測試組的所述動物模型的表型進行分析;并且在不施用所述測試化合物且其他條件相同的對照組中,對對照組的所述動物模型的表型進行分析;

(b)對測試組和對照組動物模型的行為進行比較,其中,與對照組相比,如果施用了測試化合物的動物模型中表征早期嬰兒癲癇性腦病的表型得到改善,則表明該測試化合物可作為早期嬰兒癲癇性腦病的潛在治療劑。

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