[發明專利]同時檢測三唑類抗真菌藥物和糖肽類抗生素的試劑盒及其檢測方法

在審

• 申請號: 202010317906.1
• 申請日: 2020-04-21
• 公開（公告）號: CN111398480A
• 公開（公告）日: 2020-07-10
• 發明（設計）人: 蔡克亞;耿瑞;劉亞娟;趙高嶺
• 申請（專利權）人: 鄭州安圖生物工程股份有限公司
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02;G01N30/06;G01N30/34;G01N30/86
• 代理公司: 鄭州異開專利事務所(普通合伙) 41114
• 代理人: 韓華

1.一種同時檢測三唑類抗真菌藥物和糖肽類抗生素的試劑盒，其特征在于：包括提取液、稀釋液、流動相、校準品和質控品，其中：

所述校準品和質控品均包括氟康唑、伏立康唑、泊沙康唑、伊曲康唑、萬古霉素和替考拉寧；

所述提取液包括同位素內標物和甲醇水溶液，所述同位素內標包括氟康唑-d4、伏立康唑-d3、泊沙康唑-d4和伊曲康唑-d5；

所述稀釋液為蒸餾水或超純水；

所述流動相包括流動相A和流動相B，流動相A為甲酸/水、乙酸/水、甲酸銨溶液或乙酸銨溶液；所述流動相B為含有甲酸、乙酸、甲酸銨或乙酸銨的甲醇溶液，或為含有甲酸、乙酸、甲酸銨或乙酸銨的乙腈溶液，或為甲醇/乙腈。

2.根據權利要求1所述的同時檢測三唑類抗真菌藥物和糖肽類抗生素的試劑盒，其特征在于：所述提取液的甲醇水溶液中甲醇的體積分數為50%。

3.根據權利要求1所述的同時檢測三唑類抗真菌藥物和糖肽類抗生素的試劑盒，其特征在于：所述提取液中的同位素內標物氟康唑-d4、伏立康唑-d3、泊沙康唑-d4和伊曲康唑-d5的濃度依次為10μg/mg、2μg/mg、2μg/mg和2μg/mg。

4.根據權利要求1所述的同時檢測三唑類抗真菌藥物和糖肽類抗生素的試劑盒，其特征在于：所述流動相A為甲酸/水或乙酸/水，甲酸或乙酸的體積分數為0.1～1.0%。

5.根據權利要求1所述的同時檢測三唑類抗真菌藥物和糖肽類抗生素的試劑盒，其特征在于：所述流動相A為濃度為2～20mmol/L的甲酸銨溶液或乙酸銨溶液。

6.根據權利要求1所述的同時檢測三唑類抗真菌藥物和糖肽類抗生素的試劑盒，其特征在于：所述流動相B中甲酸或乙酸的體積分數為0.1～1.0%。

7.根據權利要求1所述的同時檢測三唑類抗真菌藥物和糖肽類抗生素的試劑盒，其特征在于：所述流動相B中甲酸銨溶液或乙酸銨溶液的濃度為2～20mmol/L。

8.使用權利要求1-7任一項所述試劑盒同時檢測三唑類抗真菌藥物和糖肽類抗生素的方法，其特征在于：包括以下內容：

分別移取校準品和待測樣本于離心管內，所述待測樣本為血漿或血清；然后向校準品和待測樣本中分別加入50～1000μL提取液，渦旋混合，離心，取上清液，向上清液內加稀釋液，混勻，用LC-MS/MS檢測，記錄每個校準品和待測樣本中化合物的峰面積和同位素內標物的峰面積；

其中，所述LC-MS/MS的液相色譜條件為：色譜柱為C18柱，柱溫為20～50℃，流動相流速為0.1～1.0mL/min，流動相采用梯度洗脫：0～1.2min，10%流動相A和90%流動相B；1.2～2.0min，10%流動相A和90%流動相B；2.0～2.1 min，95%流動相A和5%流動相B；2.0～2.1min，95%流動相A和5%流動相B。

9.根據權利要求8所述的同時檢測三唑類抗真菌藥物和糖肽類抗生素的方法，其特征在于：所述LC-MS/MS的質譜檢測條件為：離子源為電噴霧電離離子源，正離子模式；毛細管電壓0.8kV；脫溶劑氣溫度500℃；脫溶劑氣流速1000L/h；反吹氣流速50L/h；脫溶劑氣和反吹氣為純度99.9%的氮氣；碰撞氣為氬氣，其純度99.999%；掃描方式為多反應監測模式。