[發明專利]一種檢測酶免微孔板質量的試劑盒及方法

有效

• 申請號: 202010316113.8
• 申請日: 2020-04-21
• 公開（公告）號: CN111624332B
• 公開（公告）日: 2023-03-24
• 發明（設計）人: 張金蕊;邢政;劉利晶;葛建臣;陳靜;李彬
• 申請（專利權）人: 鄭州安圖生物工程股份有限公司
• 主分類號: G01N33/543
• 分類號: G01N33/543;G01N33/58
• 代理公司: 北京集佳知識產權代理有限公司 11227
• 代理人: 潘穎

1.一種檢測酶免微孔板質量的試劑盒，其特征在于，包括包被液、封閉液、低值質控品Q1、高值質控品Q2、底物液和顯色劑；

所述包被液由CB緩沖液和IgG抗體組成；所述CB緩沖液的配方為：Na₂CO₃ 1.5～1.7g、NaHCO₃ 2.8～3.0g、水補足至1L；

所述封閉液的配方為：NaH₂PO₄ 0.5～0.7g、Na₂HPO₄ 5～7g、NaCl 8～10g、酪蛋白8～12g、KCl 1～3g、蔗糖45～55g、ADP 0.8～1.2g、Tween-200.8～1.2mL、防腐劑0.8～1.2mL、水補足至1L；

所述低值質控品Q1由IgG抗體、Casein酶稀釋液、X溶液組成，以g/mL/mL計，所述低值質控品Q1中IgG抗體、Casein酶稀釋液、X溶液的比例為(0.8～1.2)：(800～1200)：(4000～6000)；

所述高值質控品Q2由IgG抗體、Casein酶稀釋液、X溶液組成，以g/mL/mL計，所述高值質控品Q2中IgG抗體、Casein酶稀釋液、X溶液的比例為(1.8～2.2)：(800～1200)：(4000～6000)；

所述Casein酶稀釋液的配方為：NaH₂PO₄ 0.5～0.7g、Na₂HPO₄ 5～7g、NaCl 8～10g、牛血清白蛋白2.5～3.5g、酪蛋白8～12g、ADP 0.8～1.2g、防腐劑0.8～1.2mL、水補足至1L；pH為7.4±0.05；

所述X溶液的配方為：pH為7.4±0.05的Tris-HCl緩沖液800～900g、ADP 0.8～1.2g、酪蛋白1～3g、牛血清白蛋白2～4g、小牛血清180～220mL、防腐劑0.8～1.2mL、Trition-1000.8～1.2mL、抑菌劑0.8～1.2g、色素0.08～0.12g。

2.根據權利要求1所述的試劑盒，其特征在于，按g/L計，所述IgG抗體與所述CB緩沖液的比例為1：(100～1000)。

3.根據權利要求1所述的試劑盒，其特征在于，所述防腐劑為Proclin-300。

4.根據權利要求1所述的試劑盒，其特征在于，所述Tris-HCl緩沖液的配方為：Tris 5～7g、NaCl 7～9g、水補足至800mL；所述Tris-HCl緩沖液的pH值為7.4±0.05。

5.根據權利要求1至4中任一項所述的試劑盒，其特征在于，所述抑菌劑為Bronidox，所述色素為胭脂紅色素。

6.一種檢測酶免微孔板質量的方法，其特征在于，采用權利要求1至5中任一項所述的試劑盒檢測酶免微孔板質量，包括如下步驟：

步驟1：檢驗酶免微孔板的外觀、匹配性、空白值；

步驟2：采用包被液對酶免微孔板進行包被，得到包被板；

步驟3：采用封閉液對酶免微孔板進行封閉，得到封閉微孔板；

步驟4：在封閉微孔板中分別加入低值質控品Q1和高值質控品Q2，震蕩后進行溫育，洗板后加入底物液和顯色劑進行顯色，讀取信號值；

步驟5：根據板內、板間的信號值，分別計算低值質控品Q1、高值質控品Q2信號值的平均值M和方差SD，按下述公式計算板內、板間的變異系數CV：

變異系數CV＝SD/M×100％ (1)

根據批間的信號值，分別計算低值質控品Q1、高值質控品Q2信號值的平均值M和方差SD，按公式(1)計算批間的變異系數CV；

按下述公式計算低值質控品Q1、高值質控品Q2的吸附性：

吸附性值＝待檢Q1(Q2)均值/對照Q1(Q2)均值(2)

步驟6：板內、板間CV1均≤8％，批間CV2＜15.0％，吸附性在0.9～1.2之間，則待檢酶免微孔板的質量合格。

7.根據權利要求6所述的方法，其特征在于，所述包被的條件為：2～8℃放置15～32h。