[發明專利]一種檢測酶免微孔板質量的試劑盒及方法

有效

• 申請號: 202010316113.8
• 申請日: 2020-04-21
• 公開（公告）號: CN111624332B
• 公開（公告）日: 2023-03-24
• 發明（設計）人: 張金蕊;邢政;劉利晶;葛建臣;陳靜;李彬
• 申請（專利權）人: 鄭州安圖生物工程股份有限公司
• 主分類號: G01N33/543
• 分類號: G01N33/543;G01N33/58
• 代理公司: 北京集佳知識產權代理有限公司 11227
• 代理人: 潘穎

本發明涉及體外診斷領域，特別涉及一種檢測酶免微孔板質量的試劑盒及方法。該試劑盒包括包被液、封閉液、低值質控品Q1、高值質控品Q2、底物液和顯色劑；封閉液的配方為：NaH₂PO₄ 0.5～0.7g、Na₂HPO₄ 5～7g、NaCl 8～10g、Casein 8～12g、KCl 1～3g、蔗糖45～55g、ADP 0.8～1.2g、Tween?20 0.8～1.2mL、防腐劑0.8～1.2mL、水補足至1L。本發明檢驗方法簡單，容易操作，具有廣泛通用性，且不用在每種試劑盒上單獨檢驗，大量節約了人力物力；按本發明方法檢驗全面，檢驗結果真實可靠；能嚴格保證酶免微孔板的質量。

技術領域

本發明涉及體外診斷領域，特別涉及一種檢測酶免微孔板質量的試劑盒 及方法。

背景技術

酶聯免疫法的原理：①使抗原或抗體結合到某種固相載體表面，并保持 其免疫活性。②使抗原或抗體與某種酶連接成酶標抗原或抗體，這種酶標抗 原或抗體既保留其免疫活性，又保留酶的活性。在測定時，把受檢標本(測 定其中的抗體或抗原)和酶標抗原或抗體按不同的步驟與固相載體表面的抗 原或抗體起反應。用洗滌的方法使固相載體上形成的抗原抗體復合物與其他 物質分開，最后結合在固相載體上的酶量與標本中受檢物質的量成一定的比 例。加入酶反應的底物后，底物被酶催化變為有色產物，產物的量與標本中受檢物質的量直接相關，故可根據顏色反應的深淺來進行定性或定量分析。 由于酶的催化頻率很高，故可極大地放大反應效果，從而使測定方法達到很 高的敏感度。

在這種測定方法中有3種必要的試劑：①與固相載體結合的抗原或抗體； ②酶標記的抗原或抗體；③酶作用的底物(顯色劑)。抗原、抗體和其它生 物分子通過多種機制吸附至固相載體表面，這包括通過疏水鍵、流水/離子鍵 的被動吸附，通過引入其它活性基團如氨基和碳基的共價結合，以及通過表 面改性后的親水鍵結合。固相載體性能的好壞直接影響酶聯免疫反應結果， 在整個免疫反應中起著至關重要的作用。通過合適的檢驗方法選擇合格的酶 免微孔板作為固相載體顯得尤為重要。

酶免微孔板是體外診斷領域不可或缺的原料，作為載體的酶免微孔板表 面對抗原、抗體或抗原抗體復合物的吸附起著重要作用，抗原、抗體和其它 生物分子通過多種機制吸附至載體表面(包括通過疏水鍵、流水/離子鍵的被 動吸附，通過引入其它活性基團如氨基和碳基的共價結合，以及通過表面改 性后的親水鍵結合)，再與被檢樣本中的抗體、抗原等結合形成復合物，通 過顯色反應檢測出被測樣本中抗體、抗原的陰陽性，由此可見，酶免微孔板 在整個免疫反應中起著至關重要的作用。

目前常用的酶免微孔板檢驗方法是在各項目上檢驗，方法相對單一，對 于其他項目不具有適用性，檢驗效率較低。如乙肝表面抗體用酶免微孔板的 檢驗方法如下：將酶免微孔板包被成乙肝表面抗體包被板，依次加入精密性 參考品50μL，乙肝表面抗體酶結合物50μL，在37℃溫育30min，取出后使用 洗滌液沖洗6次，加入底物液、顯色劑各50μL后與37℃溫育10min，然后加 入終止液50μL，使用酶標儀進行讀數，對檢測的信號值進行分析，計算平均 值M和方差SD，變異系數CV＝SD/M×100％。若信號值在2.0±0.2范圍，且 板內板間CV≤8％，批間CV＜15％，該批酶免微孔板判定為合格，否則，判 定為不合格。該方式檢驗效率較低，不具有通用性，且只評價一種信號值2.0 左右的內控。

發明內容

有鑒于此，本發明提供了一種檢測酶免微孔板質量的試劑盒及方法。該 試劑盒及方法能對大部分酶免微孔板(包括中、高結合力酶免微孔板)進行 質量檢驗，且該檢驗方法操作簡單，結果準確，適用范圍廣，可節省大量人 力資源。

為了實現上述發明目的，本發明提供以下技術方案：

本發明提供了一種檢測酶免微孔板質量的試劑盒，包括包被液、封閉液、 低值質控品Q1、高值質控品Q2、底物液和顯色劑；