[發明專利]益心舒片組合物有效成分的萃取及其質量鑒別方法

在審

• 申請號: 202010314799.7
• 申請日: 2020-04-21
• 公開（公告）號: CN111388594A
• 公開（公告）日: 2020-07-10
• 發明（設計）人: 藍仕華
• 申請（專利權）人: 廣東先通藥業有限公司
• 主分類號: A61K36/8968
• 分類號: A61K36/8968;A61K9/20;A61P9/00;G01N30/91;G01N30/94
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

1.益心舒片組合物有效成分的萃取方法，該組合物包括人參、黃芪、丹參、麥冬、五味子、川芎、山楂，其特征在于，包括以下萃取步驟：

a、取各原料組分的重量比為：人參100-150、黃芪100-150、丹參150-200、麥冬100-150、五味子50-100、川芎50-100、山楂100-150分別粉碎至0.3～2.0mm，并低溫干燥，按處方量單獨或者混合；

b、將五味子、丹參用75～85％乙醇回流提取至少1次，提取液濾過，合并濾液，減壓濃縮得密度為1.30-1.36(80℃)清膏；

c、將麥冬、川芎、山楂、黃芪加水煎煮1～2次，合并煎液，濾過，濾液濃縮后，加入75～85％乙醇，充分攪拌后，靜置8～12小時，濾去沉淀物，濾液回收乙醇并濃縮密度為1.30-1.36(80℃)清膏；

d、將上述二種清膏合并后并混合，制粒，整粒，壓片，干燥，包衣即得。

2.根據權利要求1所述的益心舒片組合物有效成分的萃取方法，其特征在于，還包括加入二氧化碳為萃取劑，將上述原藥萃取2～4h，得第一次萃余物；再以二氧化碳為萃取劑，對第一次萃余物進行第二次萃取，萃取2～4h，得第二次萃取液，對第二次萃取液進行減壓蒸發、真空干燥，萃取過程中，采用75％～85％乙醇為夾帶劑，可減少有機溶劑的殘留量，提高藥效。

3.根據權利要求1或2所述的益心舒片組合物有效成分的萃取方法，其特征在于，所述五味子、丹參用75％乙醇回流提取2次，第一次4小時，第二次2小時，濾過，合并濾液，減壓濃縮至相對密度1.32(80℃)，得醇清膏，麥冬、川芎、山楂、黃芪加水煎煮2次，第一次4小時，第二次2小時，合并煎液，濾過，加入等量75％乙醇，攪拌后，靜置10小時，濾去沉淀物，濾液回收乙醇并濃縮至相對密度1.32(80℃)，得水提清膏。

4.益心舒片的質量鑒別方法，其特征在于，包括以下步驟：

(1)定性鑒別

a、取益心舒片5-8片，除去薄膜衣，研細加甲醇后超聲波處理30分鐘，濾過，濾液蒸干，殘渣加水適量使溶解，加入乙醚提取至少2次，每次15ML,作為供試品溶液；另取丹參酮IIA對照品，加甲醇制成1:1溶液；吸取供試品溶液10μl、對照品溶液5μl，分別點于同一硅膠薄層板上，以體積比為的甲苯-醋酸乙酯為展開劑，展開，取出，晾干，置紫外光燈(254nm)下檢視；供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的熒光斑點；

b、取五味子對照藥材1-3g，加醋酸乙酯回流提取，濾過濾液蒸干，殘渣加水適量使溶解，加入乙醚提取至少2次，每次15ML,作為供試品溶液；作為對照藥材溶液；吸取鑒別a項下供試品溶液、五味子對照藥材溶液各5μl，分別點于同一硅膠G薄層板上，以體積比為9∶1的苯-醋酸乙酯為展開劑，展開，取出，晾干；供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應的位置上，顯相同顏色的主斑點；

c、另取人參對照藥材材1-3g，同法制成對照藥材溶液；吸取供試品溶液、對照藥材溶液，分別點于同一硅膠G薄層板上，以體積比為15∶40∶22∶10的氯仿-醋酸乙酯-甲醇-水(10℃以下放置的下層溶液)為展開劑，展開，取出，晾干，噴以硫酸乙醇溶液，在高溫加熱至斑點顯色清晰；供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應的位置上，顯相同顏色的主斑點；

d、另取麥冬對照藥材1-3g，加水煎煮，濾過，濾液濃縮至5～20ml，制成對照藥材溶液；吸取供試品溶液、對照藥材溶液各10μl，分別點于同一硅膠G薄層板上，以體積比為6∶1的氯仿-丙酮為展開劑，展開，取出，晾干，噴以硫酸乙醇溶液，于高溫加熱至斑點顯色清晰；供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應位置上，顯相同顏色的主斑點；

e、另取黃芪甲苷對照品，加甲醇制成黃芪甲苷對照品溶液：吸取供試品溶液10μl，對照品溶液5μl，分別點于同一硅膠G薄層板上，以體積比為13∶6∶2的氯仿-甲醇-水的下層溶液為展開劑，展開，取出，晾干，噴以硫酸乙醇溶液，在高溫加熱至斑點顯色清晰；供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點；

f、另取川芎對照藥材1-3g，加水適量煎煮，濾過，濾液加氫氧化鈉溶液調pH＞9，余下自“加乙醚提取3次”起同供試品溶液制備方法制成對照藥材溶液；吸取供試品溶液、對照藥材溶液各10μl，分別點于同一硅膠G薄層板上，以體積比為30∶3∶1的苯-甲醇-冰醋酸為展開劑，展開，取出，晾干，噴以新配制的體積比為1∶1的三氯化鐵與鐵氰化鉀混合溶液至斑點顯色清晰；供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應的位置上，顯相同顏色的主斑點；

(2)含量測定

色譜條件與系統適用性試驗：用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；乙腈-0.05％磷酸溶液(99∶400)為流動相；檢測波長為250nm；理論板數按人參皂苷Re峰計算應不低于2000；對照品溶液的制備：精密稱取人參皂苷Rg1對照品、人參皂苷Re對照品適量，加甲醇分別制成每1ml含人參皂苷Rg10.125mg、人參皂苷Re0.1mg的溶液，即得；供試品溶液的制備：取本品中藥內容物2.0g，精密稱定，置索氏提取器中，加氯仿適量回流提取至提取液近無色，棄去氯仿液，藥渣揮去氯仿，連同濾紙筒移入具塞錐形瓶中，加入水飽和的正丁醇適量，密塞，放置過夜，超聲提取，濾過，濾紙、濾渣加水飽和的正丁醇適量超聲提取，并定量移入5ml量瓶中，再加溶劑稀釋至刻度，密塞，搖勻，即得；測定法：分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各10μl，注入液相色譜儀，測定，即得本品中藥每4g含人參以人參皂苷Rg1和人參皂苷Re的總量不得少于1.0mg。