[發明專利]用于癌癥早期檢測的試劑盒及檢測方法

在審

• 申請號: 202010312263.1
• 申請日: 2020-04-20
• 公開（公告）號: CN111411156A
• 公開（公告）日: 2020-07-14
• 發明（設計）人: 朱桂春;于垚垚;姚魯帥;盛青松
• 申請（專利權）人: 無錫市申瑞生物制品有限公司
• 主分類號: C12Q1/6886
• 分類號: C12Q1/6886
• 代理公司: 蘇州友佳知識產權代理事務所(普通合伙) 32351
• 代理人: 儲振

本發明提供了用于癌癥早期檢測的試劑盒及檢測方法，該試劑盒包括：檢測PRKY、HOXD3b、HOXA7或者GSTP1基因位點的DNA甲基化水平的引物探針組合物，DNA聚合酶及反應體系。通過發明，能夠通過對PRKY、HOXD3b、HOXA7或者GSTP1基因目標位點的DNA甲基化水平予以快速、高特異性檢測，具有靈敏度高，特異性強，操作簡便快捷等優點，可為臨床醫生對前列腺癌、腎癌或者膀胱癌早期診斷及鑒別診斷提供重要參考。

技術領域

本發明涉及分子檢測領域，尤其涉及用于癌癥早期檢測的試劑盒及檢測 方法。

背景技術

前列腺癌是世界范圍內高發和主要的致死癌癥之一。

腫瘤的早期診斷早期治療非常重要，是治療后生存率的關鍵決定因 素。早期腫瘤由于腫瘤細胞負荷小，其特征性分子的改變往往不明顯，難 以與慢性疾病分辨。但一般來說分子改變早于臨床影像學改變，分子檢測 依然是腫瘤早期診斷及鑒別診斷的最重要最有希望的手段。

申請人經過檢索后發現，公開號為CN109182518A的中國發明專利 公開了一種基于焦磷酸測序技術的GSTP1基因啟動子甲基化測序方 法。本發明的目標基因甲基化位點與CN109182518A不同，權利要求覆 蓋也幾乎沒有相同點。臨床檢測對檢測性能參數是有相當要求的，一個 科研可以用的檢測方法往往不一定能應用到臨床檢測，需要進行大量的 優化及臨床樣品驗證。本發明的重點是該組合基因或單個基因特異性的 甲基化位點甲基化水平的檢測在臨床上的應用價值而不是焦磷酸測序方 法學本身。

發明內容

本發明的目的在于揭示用于癌癥早期檢測的試劑盒及檢測方法，實現 對前列腺癌、腎癌或者膀胱癌的早期篩查與診斷。

為實現上述第一個發明目的，本發明提供了一種用于癌癥早期檢測的 試劑盒，包括：

檢測PRKY、HOXD3b、HOXA7或者GSTP1基因位點的DNA甲基化 水平的引物探針組合物，DNA聚合酶及反應體系。

作為本發明的進一步改進，所述引物探針組合物包括：

用于檢測PRKY基因位點的DNA甲基化水平且核苷酸序列為SEQ NO.1 至SEQ NO.3的引物探針組合物；

用于檢測HOXD3b基因位點的DNA甲基化水平且核苷酸序列為SEQ NO.4至SEQ NO.6的引物探針組合物；

用于檢測HOXA7基因位點的DNA甲基化水平且核苷酸序列為SEQ NO.7至SEQ NO.9的引物探針組合物；

用于檢測GSTP1基因位點的DNA甲基化水平且核苷酸序列為SEQ NO.10至SEQNO.12的引物探針組合物；

用于檢測內參基因beta-actin且核苷酸序列為SEQ NO.13至SEQ NO.15 的引物探針組合物。

作為本發明的進一步改進，甲基化目標檢測基因可以按不同組合使用。

作為本發明的進一步改進，甲基化目標檢測基因可以單獨使用。

作為本發明的進一步改進，目標檢測基因的甲基化區域保持不變，但擴 增引物及/或探針序列部分或全部改變。

作為本發明的進一步改進，試劑盒的檢測結果對癌癥的早期診斷及鑒別 診斷提供參考。

作為本發明的進一步改進，所述癌癥為前列腺癌、腎癌或者膀胱癌。

同時，本申請還揭示了基于上述任一發明創造所揭示的用于癌癥早期 檢測的試劑盒的檢測方法，使用檢測系統對檢測材料進行檢測。

作為本發明的進一步改進，所述檢測材料是人外周血游離DNA或分離 的循環腫瘤細胞。