[發(fā)明專利]一種測定禽類食品中利巴韋林和金剛烷胺類化合物殘留量的方法

在審

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• 申請日: 2020-04-20
• 公開（公告）號: CN111650310A
• 公開（公告）日: 2020-09-11
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 謝繼安;劉柏林;趙紫微;吳翠玲
• 申請（專利權(quán)）人: 安徽省疾病預(yù)防控制中心（省健康教育所）
• 主分類號: G01N30/06
• 分類號: G01N30/06;G01N30/88
• 代理公司: 蘇州翔遠專利代理事務(wù)所(普通合伙) 32251
• 代理人: 王華

1.一種測定禽類食品中利巴韋林和金剛烷胺類化合物殘留量的方法，其特征在于：包括下列步驟：

步驟1：將樣品置于離心管中，加入混合同位素內(nèi)標工作液，加入乙酸銨緩沖液和酸性磷酸酶溶液，蓋緊蓋子，漩渦混勻30s，于37℃恒溫搖床中避光酶解2h得到酶解液，然后向所述酶解液中4ml質(zhì)量分數(shù)為5％的三氯乙酸溶液，漩渦混勻30s，2℃條件下以10000r/min離心10min，然后移取上清液于另一離心管中，用質(zhì)量分數(shù)為5％的氨水溶液調(diào)節(jié)溶液pH值為8.4-8.6，用水定容至10ml，混勻后以10000r/min離心5min，上清液過0.45μm再生纖維素微孔濾膜，得到樣品提取液；

步驟2：PBA/PCX固相萃取柱依次用乙腈、質(zhì)量分數(shù)為0.5％的甲酸水溶液和乙酸銨緩沖液活化，得到活化后的PBA/PCX固相萃取柱；將樣品提取液過所述活化后的PBA/PCX固相萃取柱，依次用乙酸銨緩沖液和水淋洗，抽干PBA/PCX固相萃取柱；PBA/PCX固相萃取柱先用質(zhì)量分數(shù)為0.5％的甲酸水溶液洗脫于5ml容量瓶，抽干PBA/PCX固相萃取柱，用質(zhì)量分數(shù)為0.5％的甲酸水溶液定容至刻度，混勻后過0.22μm再生纖維素濾膜，供UPLC-MS/MS分析利巴韋林；PBA/PCX固相萃取柱再用甲醇淋洗，抽干柱子，用含10％異丙醇的體積分數(shù)為5％的氨化甲醇溶液洗脫，50℃水浴氮吹干，用質(zhì)量分數(shù)為0.5％的甲酸水溶液復(fù)溶并定容至5ml，混勻后過0.22μm親水性聚四氟乙烯濾膜，供UPLC-MS/MS分析金剛烷胺類化合物。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的測定禽類食品中利巴韋林和金剛烷胺類化合物殘留量的方法，其特征在于：PBA/PCX固相萃取柱的填料為苯硼酸和聚合陽離子交換樹脂，且兩者之間的質(zhì)量比例為200mg/100mg，PBA/PCX固相萃取柱的體積為3ml。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的測定禽類食品中利巴韋林和金剛烷胺類化合物殘留量的方法，其特征在于：檢測利巴韋林的色譜柱：Agilent ZORBAX SB-Aq柱，流動相：A為質(zhì)量分數(shù)為0.2％的甲酸水溶液，B為乙腈，柱溫40℃，進樣量20μL，流動相梯度洗脫程序如下：

時間/min	流速/(ml/min)	A/％	B/％
0.0	0.40	100	0
2.5	0.40	100	0
3.0	0.40	95	5
4.0	0.40	10	90
5.0	0.40	10	90
5.5	0.40	100	0
6.5	0.40	100	0

。