[發明專利]一種血漿和組織中HYA13369濃度的定量分析方法

有效

• 申請號: 202010304364.4
• 申請日: 2020-04-17
• 公開（公告）號: CN111337612B
• 公開（公告）日: 2022-07-12
• 發明（設計）人: 汪瀟;周維晨;劉靜靜;張敬梅;汪春彥;邱寧
• 申請（專利權）人: 合肥諾明藥物安全研究有限公司
• 主分類號: G01N30/88
• 分類號: G01N30/88
• 代理公司: 合肥市長遠專利代理事務所(普通合伙) 34119
• 代理人: 劉勇

本發明公開了一種血漿和組織中HYA13369濃度的定量分析方法，采用HPLC?MS/MS法檢測；其中，HPLC?MS/MS法的高效液相色譜條件為：色譜柱為ACE Excel C18?AR色譜柱，流動相A為甲酸、甲醇和水的混合溶液，其中，甲醇和水的體積比為70:30，甲酸的體積分數為0.01?0.2％；流動相B為甲醇，進行梯度洗脫。本發明穩定可靠、靈敏準確，檢測周期短，且樣品前處理簡單，可用于人和動物的相關試驗研究。

技術領域

本發明涉及藥物分析技術領域，尤其涉及一種血漿和組織中HYA13369濃度的定量分析方法。

背景技術

HYA13369(其化學名為(3β,5α)-4,4,14-三甲基-3-(甲基氨基)-9,19-環-孕甾烷-16-烯-20-酮)是合肥合源藥業有限公司研發的類環菠蘿烷四環三萜類化合物，其具有理想的心腦血管生理活性，用于心律失常、冠心病、心肌梗死等心腦血管疾病的預防或治療。此新藥應用前景廣闊，即將開展臨床實驗研究。

為了保證用藥的安全性，及時高效的進行相關研究，考察藥物在人和動物體中的血藥濃度，完善藥物在體內的吸收、分布、代謝、排泄情況是非常必要的，而檢測方法的準確、快速，可以進一步增加臨床試驗的準確性，并縮短檢測時間，并且由于HYA13369結構創新性，目前國內外并未有針對HYA13369的檢測分析方法，因此需要提供準確高效、簡單快速的檢測方法。

發明內容

基于背景技術存在的技術問題，本發明提出了一種血漿和組織中HYA13369濃度的定量分析方法，本發明穩定可靠、靈敏準確，檢測周期短，且樣品前處理簡單，可用于人和動物的相關試驗研究。

本發明提出的一種血漿和組織中HYA13369濃度的定量分析方法，采用HPLC-MS/MS法檢測；其中，HPLC-MS/MS法的高效液相色譜條件為：色譜柱為ACE Excel C18-AR色譜柱，流動相A為甲酸、甲醇和水的混合溶液，其中，甲醇和水的體積比為70:30，甲酸的體積分數為0.01-0.2％；流動相B為甲醇，進行梯度洗脫，所述梯度洗脫程序為：0-2.3min內，流動相A的比例維持100％；2.3-2.5min內，100％流動相A漸變為100％流動相B；2.5-4.2min內，流動相B的比例維持100％；4.2-4.5min內，100％流動相B漸變為100％流動相A，4.5-5min內，流動相A的比例維持100％；

HPLC-MS/MS法的質譜條件為：離子源為ESI離子源；檢測方式為正離子檢測；掃描方式為SRM；接口電壓為4.5kV；傳輸毛細管溫度為250-375℃；吹掃氣流量為10units；輔助氣流量為10units；鞘氣流量為30units、碰撞氣流量為1unit。

優選地，高效液相色譜條件中，色譜柱的規格為50×3.0mm，粒徑為3μm。

優選地，高效液相色譜條件中，流動相A中，甲酸的體積分數為0.1-0.2％。

優選地，高效液相色譜條件中，進樣量為5-20μL。

優選地，高效液相色譜條件中，進樣量可以為5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19或20μL。

優選地，高效液相色譜條件中，血漿的進樣量為20μL，組織的進樣量為5μL。

優選地，高效液相色譜條件中，流速為0.45-0.55mL/min。

優選地，高效液相色譜條件中，流速可以為0.45、0.46、0.47、0.48、0.49、0.5、0.51、0.52、0.53、0.54或0.55mL/min。

優選地，高效液相色譜條件中，流速為0.5mL/min。

優選地，高效液相色譜條件中，柱溫為35-45℃。