[發明專利]靶向CD22的嵌合抗原受體及其制法和應用

在審

• 申請號: 202010301357.9
• 申請日: 2020-04-16
• 公開（公告）號: CN113527507A
• 公開（公告）日: 2021-10-22
• 發明（設計）人: 姚意弘;朱琳;李延峰;魏雨恬;姚昕;朱恃貴;黃家琪;張麗;劉必佐
• 申請（專利權）人: 上海賽比曼生物科技有限公司;無錫賽比曼生物科技有限公司
• 主分類號: C07K19/00
• 分類號: C07K19/00;C12N15/62;C12N15/867;C12N5/10;A61K39/00;A61P35/00;A61P35/02
• 代理公司: 上海一平知識產權代理有限公司 31266
• 代理人: 肖艷;徐迅

本發明提供了一種靶向CD22的嵌合抗原受體及其制法和應用。具體地，本發明提供了一種靶向CD22的嵌合抗原受體，其包括前導序列、靶向CD22的scFv，鉸鏈區，跨膜區，和胞內信號結構域。本發明提供編碼該嵌合抗原受體的核酸分子和相應的表達載體、CAR?T細胞及其應用。本發明的嵌合抗原受體靶向CD22陽性細胞，可以用于治療CD22陽性B細胞白血病，包括一些抗CD19CAR?T治療后急性B細胞白血病復發的CD19陰性CD22陽性的患者。

技術領域

本發明涉及生物醫藥領域，更具體地涉及一種靶向CD22的嵌合抗原受體及其制法和應用。

背景技術

血液系統的惡性腫瘤占人類惡性腫瘤約10％，95％血液系統的惡性腫瘤是B淋巴細胞來源。傳統的化療和放療對治療血液系統的惡性腫瘤起著重要作用，但是傳統的癌癥治療方法遇到了瓶頸，手術、放化療特異性差，副作用明顯，易復發轉移。有的病人雖療效顯著，但大部分都難以治愈。因此更為有效的新治療方法一直是這一領域探索的熱點。

癌癥治療的重點轉向了最有希望的腫瘤免疫治療方面。目前國外已有兩個靶向CD19的嵌合抗原受體T細胞療法(CAR-T)產品獲批上市，用于治療兒童和年輕成年患者急性淋巴細胞白血病和成人二線或多線系統治療的復發性或難治性大B細胞淋巴瘤。然而，anti-CD19 CAR-T治療后，40％的患者在治療1個月達到完全緩解之后又出現了復發，并且復發的患者中高于60％比例的患者出現了CD19陰性腫瘤細胞的逃逸。也有部分患者的腫瘤細胞CD19表達受限制，接受anti-CD19 CAR-T細胞治療時常會出現無響應或者耐藥性發生。因此，迫切需要篩選出靶向除CD19以外的B細胞白血病相關抗原的CAR-T結構，來治療惡性淋巴瘤患者。

盡管抗CD19 CAR-T的療效突出，但對于部分B細胞CD19抗原表達缺失的白血病患者卻無效；部分患者因為抗CD19 CAR-T治療后，CD19抗原表達降低甚至丟失，導致治療效果不佳，容易復發，而仍有CD22的持續表達。

因此，本領域急需開發新的有效治療腫瘤的新藥物。

發明內容

本發明的目的在于提供一種靶向CD22的嵌合抗原受體及其制法和應用。

具體地，本發明的目的在于提供一種靶向CD22抗原嵌合抗原受體的序列，及其修飾T細胞(CART-CD22)的制備方法和活性鑒定。本發明提供了一種用于治療CD22陽性B細胞淋巴瘤的嵌合性抗原受體結構。

在本發明的第一方面，提供了一種嵌合抗原受體(CAR)，所述嵌合抗原受體的抗原結合結構域(即，scFv)包括SEQ ID NO:1或3所示的抗體重鏈可變區，和SEQ ID NO:2或4所示的抗體輕鏈可變區。

在另一優選例中，所述抗體重鏈可變區和抗體輕鏈可變區通過連接肽相連。

在另一優選例中，所述的抗原結合結構域的結構如下式I或II所示：

V_L-V_H (I)；V_H-V_L (II)

其中，V_H為抗體重鏈可變區；V_L為抗體輕鏈可變區；“-”為連接肽或肽鍵。

在另一優選例中，所述的抗原結合結構域的結構如式I所示。

在另一優選例中，所述V_L的氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示，V_H的氨基酸序列如SEQID NO:2所示。(注：CAR-T22.13)

在另一優選例中，所述V_L的氨基酸序列如SEQ ID NO:3所示，V_H的氨基酸序列如SEQID NO:4所示。(注：CAR-T22.14)