[發明專利]基于家蠶絲腺表達具有生物學活性的人結締組織生長因子的方法及其產品和應用在審
| 申請號： | 202010283910.0 | 申請日： | 2020-04-13 |
| 公開（公告）號： | CN111424035A | 公開（公告）日： | 2020-07-17 |
| 發明（設計）人： | 夏慶友;王峰;王元成;趙萍 | 申請（專利權）人： | 西南大學 |
| 主分類號： | C12N15/12 | 分類號： | C12N15/12;C12N15/85;C07K14/475;C07K19/00;A01K67/04;A61K38/18;A61P17/02;A61P17/00 |
| 代理公司： | 重慶航圖知識產權代理事務所(普通合伙) 50247 | 代理人： | 王貴君 |
| 地址： | 400715*** | 國省代碼： | 重慶;50 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 基于 家蠶 表達 具有 生物學 活性 結締組織 生長因子 方法 及其 產品 應用 | ||
1.基于家蠶絲腺表達具有生物學活性人結締組織生長因子或N端含透皮肽的人結締組織生長因子的方法，其特征在于：優化人結締組織生長因子基因密碼子獲得適用于家蠶表達的改造人結締組織生長因子基因或N端含透皮肽的人結締組織生長因子基因，然后將改造人結締組織生長因子基因或N端含透皮肽的人結締組織生長因子基因在家蠶絲腺表達，結繭后繭殼用尿素提取，純化，得到具有生物學活性人結締組織生長因子或N端含透皮肽的人結締組織生長因子；所述改造人結締組織長因子基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示；所述N端含透皮肽的人結締組織生長因子基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.3所示。
2.根據權利要求1所述的方法，其特征在于：家蠶絲腺表達改造人結締組織生長因子基因或N端含透皮肽的人結締組織生長因子基因的方法如下：構建含有所述適用于家蠶表達的改造人結締組織生長因子基因或N端含透皮肽的人結締組織生長因子基因的轉基因表達載體，將所述轉基因表達載體注射已解除滯育的家蠶蠶卵，培育轉基因家蠶即可。
3.根據權利要求2所述的方法，其特征在于：所述轉基因表達載體含有順序連接的增強子hr3，分泌型絲膠1基因啟動子、改造人結締組織生長因子基因或N端含透皮肽的人結締組織生長因子基因、絲膠1基因的終止子和piggyBac轉座序列。
4.具有生物學活性的重組人結締組織生長因子或N端含透皮肽的重組人結締組織生長因子，其特征在于：由如SEQ ID NO.1或SEQ ID NO.3所示的核苷酸序列于在家蠶絲腺表達，結繭后繭殼用尿素提取，純化制得。
5.權利要求5所述的重組人結締組織生長因子或N端含透皮肽的重組人結締組織生長因子在制備促進細胞增殖的藥物中的應用，其特征在于：所述重組人結締組織生長因子的氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示；所述N端含透皮肽的人結締組織生長因子的氨基酸序列如SEQ ID NO.4所示。
6.權利要求5所述的重組人結締組織生長因子或N端含透皮肽的重組人結締組織生長因子在制備促進ERK蛋白磷酸化的藥物中的應用，其特征在于：所述重組人結締組織生長因子的氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示；所述N端含透皮肽的人結締組織生長因子的氨基酸序列如SEQ ID NO.4所示。
7.權利要求5所述的重組人結締組織生長因子或N端含透皮肽的重組人結締組織生長因子在制備促進透明質酸合成或/和羥脯氨酸合成的藥物中的應用，其特征在于：所述重組人結締組織生長因子的氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示；所述N端含透皮肽的人結締組織生長因子的氨基酸序列如SEQ ID NO.4所示。
8.適用于家蠶表達的改造人結締組織生長因子基因或N端含透皮肽的人結締組織生長因子基因，其特征在于：所述改造人結締組織生長因子基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示；所述N端含透皮肽的人結締組織生長因子基因如SEQ ID NO.3所示。
9.含有權利要求8所述適用于家蠶表達的改造人結締組織生長因子基因或N端含透皮肽的人結締組織生長因子基因的重組表達載體。
10.含有權利要求8所述適用于家蠶表達的改造人結締組織生長因子基因或N端含透皮肽的人結締組織生長因子基因的轉基因家蠶。
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