[發明專利]一種轉氨酶催化劑和一種酶催化合成(R)-1-萘乙胺的方法

有效

• 申請號: 202010278857.5
• 申請日: 2020-04-10
• 公開（公告）號: CN111411096B
• 公開（公告）日: 2021-05-28
• 發明（設計）人: 李一軍;王子坤;黃勇開;王吉勇;馬克·博科拉;蔡寶琴;陳海濱;胡虎;余夢嬌;劉思彤
• 申請（專利權）人: 寧波酶賽生物工程有限公司
• 主分類號: C12N9/10
• 分類號: C12N9/10;C12N15/54;C12P41/00;C12P13/00;C12R1/19
• 代理公司: 浙江素豪律師事務所 33248
• 代理人: 楊璇

1.一種轉氨酶催化劑，其特征在于，所述轉氨酶催化劑的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示，并且所述轉氨酶催化劑的氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示。

2.一種酶催化合成(R)-1-萘乙胺的方法，其特征在于，其反應方程式為：

其中，在磷酸吡哆醛和轉氨酶催化劑的存在下，作為反應底物的1-萘乙酮與氨基供體反應生成(R)-1-萘乙胺；

其中，所述轉氨酶催化劑的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示，并且所述轉氨酶催化劑的氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示。

3.根據權利要求2所述的酶催化合成(R)-1-萘乙胺的方法，其特征在于，包括以下步驟：

S1：向反應容器中加入表達所述轉氨酶催化劑的重組大腸桿菌濕菌體和1-萘乙酮，水浴加熱，并機械攪拌；

S2：邊攪拌邊加入有機溶劑或水，氨基供體和磷酸吡哆醛的水溶液；

S3：反應結束后，后處理，即得所述(R)-1-萘乙胺。

4.根據權利要求2所述的酶催化合成(R)-1-萘乙胺的方法，其特征在于，包括以下步驟：

S1：向反應容器中加入表達所述轉氨酶催化劑的重組大腸桿菌濕菌體和1-萘乙酮，水浴加熱，并機械攪拌；

S2：邊攪拌邊加入有機溶劑，氨基供體和磷酸吡哆醛的水溶液；

S3：反應結束后，減壓蒸餾，以去除有機溶劑和過量的氨基供體；

S4：過濾，除去重組大腸桿菌濕菌體，后處理，即得所述(R)-1-萘乙胺。

5.根據權利要求4所述的酶催化合成(R)-1-萘乙胺的方法，其特征在于，所述氨基供體選自以下任一種：異丙胺，叔丁胺，苯乙氨。

6.根據權利要求4所述的酶催化合成(R)-1-萘乙胺的方法，其特征在于，所述有機溶劑選自以下任一種：乙酸乙酯，乙酸異丙酯，乙酸丁酯，異丙醇，正丁醇，甲基叔丁基醚，甲苯。

7.根據權利要求4所述的酶催化合成(R)-1-萘乙胺的方法，其特征在于，所述磷酸吡哆醛的水溶液中磷酸吡哆醛的濃度為1～10mM。

8.根據權利要求4所述的酶催化合成(R)-1-萘乙胺的方法，其特征在于，所述后處理包括：

取濾液，向其中加入無機酸水溶液，降溫結晶，以得到(R)-1-萘乙胺無機酸鹽固體；然后加入氫氧化鈉，萃取，靜置分層，除去溶劑后，即得到(R)-1-萘乙胺。

9.根據權利要求4所述的酶催化合成(R)-1-萘乙胺的方法，其特征在于，作為反應底物的所述1-萘乙酮的濃度為100～600g/L，所述氨基供體的濃度為1.8～2.5M，所述重組大腸桿菌濕菌體的濃度為90～180g/L。