[發(fā)明專利]一種快速的沙漠薔薇愈傷組織誘導(dǎo)和規(guī)模化懸浮培養(yǎng)方法有效
| 申請?zhí)枺?/td> | 202010254295.0 | 申請日： | 2020-04-02 |
| 公開（公告）號： | CN111280063B | 公開（公告）日： | 2023-09-05 |
| 發(fā)明（設(shè)計）人： | 王鵬;張玉潔;劉水燕;張衛(wèi) | 申請（專利權(quán)）人： | 安賽搏（重慶）生物技術(shù)有限公司 |
| 主分類號： | A01H4/00 | 分類號： | A01H4/00 |
| 代理公司： | 北京安博達知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司 11271 | 代理人： | 徐國文 |
| 地址： | 400700 重*** | 國省代碼： | 重慶;50 |
| 權(quán)利要求書： | 查看更多 | 說明書： | 查看更多 |
| 摘要： | |||
| 搜索關(guān)鍵詞： | 一種 快速 沙漠 薔薇 組織 誘導(dǎo) 規(guī)模化 懸浮 培養(yǎng) 方法 | ||
本發(fā)明公開了一種快速的沙漠薔薇愈傷組織誘導(dǎo)和規(guī)模化懸浮培養(yǎng)方法。通過對培養(yǎng)基中基礎(chǔ)元素和激素進行大量篩選比較和其它實驗條件摸索，建立了一種沙漠薔薇的無菌苗培養(yǎng)和愈傷誘導(dǎo)方法，以沙漠薔薇成熟種子為外植體，迅速萌發(fā)獲得無菌苗，以沙漠薔薇無菌苗的莖、葉片、根為外植體，在2周內(nèi)快速獲得愈傷組織，并建立了沙漠薔薇愈傷組織繼代培養(yǎng)方案，按此方法可以得到生長迅速、分散良好的沙漠薔薇懸浮細胞系，接入一次性生物反應(yīng)器進行逐級放大培養(yǎng)。有效的解決了解決沙漠薔薇細胞產(chǎn)量不足的問題。
技術(shù)領(lǐng)域
本發(fā)明屬于植物組織培養(yǎng)技術(shù)領(lǐng)域，涉及一種快速的沙漠薔薇愈傷組織誘導(dǎo)和規(guī)模化懸浮培養(yǎng)方法。
背景技術(shù)
沙漠薔薇（Adenium?obesum.），又名沙漠玫瑰，天寶花，是夾竹桃科沙漠玫瑰屬多年生肉質(zhì)植物。原產(chǎn)自非洲的科尼亞、坦桑尼亞、索馬里及津巴布韋，因原產(chǎn)地接近沙漠且花紅如玫瑰而得名。沙漠薔薇喜高溫干燥和陽光充足的環(huán)境，耐酷暑，不耐寒，忌水濕。喜富含鈣質(zhì)的、疏松透氣的、排水良好的砂質(zhì)壤土。沙漠玫瑰單葉互生，倒卵形，革質(zhì)，有光澤；總狀花序，個兒大、量多，花色豐富、艷麗，花期且長。
有研究表明沙漠薔薇提取物有很好的藥用價值和美容功效。沙漠薔薇中可提取出30種強心苷和兩種孕烷，可用于治療心臟病和婦科病；沙漠薔薇葉提取物中的活性成分具有保濕潤膚，抗衰老等美容功效，花朵內(nèi)含高濃度海藻糖，有減少曬黑和皮膚老化、有效保護細胞膜和肌膚的儲水功能。
沙漠薔薇自花結(jié)實率低，不容易長果莢，種子少，不易收集；且人工授粉較難，操作成功率低，一般是用半成熟枝扦插來來栽培，但繁殖速度慢。
植物組織培養(yǎng)技術(shù)，具體涉及沙漠薔薇，以無菌苗的莖、葉片、根等作為外植體誘導(dǎo)細胞脫分化形成愈傷組織，愈傷組織的固體繼代及液體懸浮培養(yǎng)基方法，高效培養(yǎng)沙漠薔薇細胞。
目前國內(nèi)尚無沙漠薔薇植物組織培養(yǎng)方面的專利，幾乎沒有沙漠薔薇愈傷組織誘導(dǎo)和規(guī)模化懸浮培養(yǎng)方面的文獻報道。沙漠薔薇的組織培養(yǎng)體系尚不成熟，該物種在常規(guī)植物培養(yǎng)條件下不能存活。
發(fā)明內(nèi)容
本專利旨在針對現(xiàn)有技術(shù)的技術(shù)缺陷，提供一種快速獲得沙漠薔薇無菌苗、愈傷組織并進行規(guī)模化的方法，解決沙漠薔薇細胞產(chǎn)量不足的問題。
為實現(xiàn)上述目的，本發(fā)明干紅開了如下的技術(shù)內(nèi)容：
一種快速的沙漠薔薇愈傷組織誘導(dǎo)和規(guī)模化懸浮培養(yǎng)方法，其特征在于按如下的步驟進行：
（1）沙漠薔薇種子消毒：將沙漠薔薇種子用常溫水浸泡10-15min，剝除軟質(zhì)種皮，立刻置入4%次氯酸鈉溶液消毒8-10min，無菌水洗滌4次，置于種子萌發(fā)基礎(chǔ)培養(yǎng)基BM上，27-29℃培養(yǎng)，光照強度＜1000?lux；種子萌發(fā)培養(yǎng)基BM指的是：1/2MS或MS+?30g/L蔗糖?+0.1mg/L?Gln?+?0.2mg/L?水解乳蛋白，瓊脂0.7-1.0%，pH5.8-6.0；
（2）沙漠薔薇無菌苗培養(yǎng)：將已萌發(fā)的沙漠薔薇無菌苗種子在基礎(chǔ)培養(yǎng)基BM中培養(yǎng)至植株高2-3cm，開始快繁，快繁方式為將沙漠薔薇無菌苗去除根部，移入快繁培養(yǎng)基PM，需要7-14d發(fā)生側(cè)芽，待側(cè)芽生長至1.5-2cm切下用于再次快繁或生根，培養(yǎng)過程溫度控制在25℃-32℃，光照強度500-1500?lux；
所述的快繁培養(yǎng)基PM指的是：MS?+?0.1-0.5?mg/L?IAA?（吲哚乙酸）+?0.2-0.5mg/L?6-BA（6-芐氨基腺嘌呤）?+?30g/L蔗糖?+?0.1mg/L?Gln（谷氨酰胺）?+?0.2mg/L?水解乳蛋白，瓊脂0.7-1.0%，pH5.8-6.0；
該專利技術(shù)資料僅供研究查看技術(shù)是否侵權(quán)等信息，商用須獲得專利權(quán)人授權(quán)。該專利全部權(quán)利屬于安賽搏（重慶）生物技術(shù)有限公司，未經(jīng)安賽搏（重慶）生物技術(shù)有限公司許可，擅自商用是侵權(quán)行為。如果您想購買此專利、獲得商業(yè)授權(quán)和技術(shù)合作，請聯(lián)系【客服】
本文鏈接：http://www.szxzyx.cn/pat/books/202010254295.0/2.html，轉(zhuǎn)載請聲明來源鉆瓜專利網(wǎng)。
