[發明專利]一種枯草芽孢桿菌用發酵培養基及其制備方法、枯草芽孢桿菌制劑的制備方法

有效

• 申請號: 202010239413.0
• 申請日: 2020-03-30
• 公開（公告）號: CN111733091B
• 公開（公告）日: 2022-04-22
• 發明（設計）人: 朱廣躍;李克克;謝璐璐;馮利菲;李光華;韓亞坤;買超梁;韓婭楠
• 申請（專利權）人: 河南金百合生物科技股份有限公司
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;C12R1/125
• 代理公司: 鄭州睿信知識產權代理有限公司 41119
• 代理人: 郭佳效

本發明屬于微生物發酵領域，具體涉及一種枯草芽孢桿菌用發酵培養基及其制備方法、枯草芽孢桿菌制劑的制備方法。該發酵培養基由豆粕粉、玉米淀粉、玉米漿、牛肉膏、蛋白胨、葡萄糖、無機鹽、蛋白酶、淀粉酶與水制成，各組分的用量為：豆粕粉63～74g/L，玉米淀粉82～90g/L，玉米漿5～7g/L，牛肉膏2～3g/L，蛋白胨8～12g/L，葡萄糖8～12g/L，蛋白酶2～3g/L，淀粉酶2～3g/L，無機鹽5.73～11.08g/L，其中蛋白酶的酶活力為1800～2000U/g，淀粉酶的酶活力為1800～2000U/g。本發明的發酵培養基能夠為枯草芽孢桿菌提供適宜生長的營養環境，提高發酵液中的活菌數、芽孢數。

技術領域

本發明屬于微生物發酵領域，具體涉及一種枯草芽孢桿菌用發酵培養基及其制備方法、枯草芽孢桿菌制劑的制備方法。

背景技術

枯草芽孢桿菌是芽孢桿菌屬的一種，廣泛分布在土壤及腐敗的有機物中，因易在枯草浸汁中繁殖而得名。枯草芽孢桿菌無莢膜，有鞭毛，能活動，革蘭氏染色為陽性，芽孢((0.6～0.9)μm×(1.0～1.5)μm)位于菌體中央或稍偏，芽孢形成后菌體不膨大；菌落表面粗糙不透明，污白色或微黃色，在液體培養基中生長時常形成皺壁，為好氧型細菌；可以利用蛋白質、多種糖，分解色氨酸。枯草芽孢桿菌是我國農業部允許作為飼料添加劑的益生菌之一，相對其他益生菌，是較早應用到飼料中的微生態制劑，其可有效調節動物腸道微生態平衡。枯草芽孢桿菌為需氧菌，其產酶能力較強，能產生蛋白酶、纖維素酶、脂肪酶等，同時可降解飼料中的抗營養因子，提高動物的消化吸收率，從而促進動物生長。

枯草芽孢桿菌對動物腸道的調節主要表現為以下幾點：(1)枯草芽孢桿菌菌體生長過程中產生的枯草菌素、多粘菌素、制霉菌素、短桿菌肽等活性物質，這些活性物質對致病菌或內源性感染的條件致病菌有明顯的抑制作用。(2)枯草芽孢桿菌迅速消耗腸道中的游離氧，造成腸道低氧，促進有益厭氧菌生長，間接抑制其它致病菌生長。(3)刺激動物(人體)免疫器官的生長發育，激活T、B淋巴細胞，提高免疫球蛋白和抗體水平，增強細胞免疫和體液免疫功能，提高群體免疫力。(3)枯草芽孢桿菌菌體自身合成α-淀粉酶、蛋白酶、脂肪酶、纖維素酶等酶類，在消化道中與動物體(人體)內的消化酶類一同發揮作用。(4)能合成維生素B₁、B₂、B₆、煙酸等多種B族維生素，提高動物體(人體)內干擾素和巨噬細胞的活性。

目前，枯草芽孢桿菌已經廣泛應用到的畜牧業動物保健、微生物菌肥等領域，由于微生態產業在我國起步較晚，行業內產品質量參差不齊，枯草芽孢桿菌制劑中活菌數較低、芽孢數較低。申請公布號為CN106947715A的中國發明專利申請中公開一種高活菌數、高芽孢形成率的枯草芽孢桿菌的制備方法，采用由碳源、氮源、磷酸二氫鉀、七水合硫酸鎂、高溫淀粉酶組成的液體發酵培養基，發酵時分時間段控制溫度及風量，發酵共24h，所得枯草芽孢桿菌發酵液中活菌數最高為160億cfu/mL，芽孢率最高為96％。

現有發酵工藝所得的枯草芽孢桿菌發酵液中活菌數不高、芽孢率較低，并且培養時間長、穩定性較差，枯草芽孢桿菌的發酵工藝水平急需提高。

發明內容

本發明的目的是提供一種枯草芽孢桿菌用發酵培養基，以解決現有的枯草芽孢桿菌用發酵培養基所得發酵液中活菌數低、芽孢率低的問題。

本發明的第二個目的是提供一種枯草芽孢桿菌用發酵培養基的制備方法，以解決現有的制備方法所得的枯草芽孢桿菌用發酵培養基用于枯草芽孢桿菌發酵培養時活菌數低、芽孢率低的問題。

本發明的第三個目的是提供一種枯草芽孢桿菌制劑的制備方法，以解決現有的制備方法發酵培養時間長、穩定性差，并且發酵液中活菌數不高、芽孢率較低的問題。

為實現上述目的，本發明的枯草芽孢桿菌用發酵培養基的具體技術方案為：