[發(fā)明專利]一種枯草芽孢桿菌用發(fā)酵培養(yǎng)基及其制備方法、枯草芽孢桿菌制劑的制備方法

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 202010239413.0
• 申請日: 2020-03-30
• 公開（公告）號: CN111733091B
• 公開（公告）日: 2022-04-22
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 朱廣躍;李克克;謝璐璐;馮利菲;李光華;韓亞坤;買超梁;韓婭楠
• 申請（專利權(quán)）人: 河南金百合生物科技股份有限公司
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;C12R1/125
• 代理公司: 鄭州睿信知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司 41119
• 代理人: 郭佳效

1.一種枯草芽孢桿菌制劑的制備方法，其特征在于，包括以下步驟：將枯草芽孢桿菌種子液接種到枯草芽孢桿菌用發(fā)酵培養(yǎng)基中，在37~40℃培養(yǎng)18~20h，然后升溫至45~50℃，維持2~3h，再降溫至常溫，發(fā)酵結(jié)束；所述降溫的速率為2~10℃/min；所述枯草芽孢桿菌用發(fā)酵培養(yǎng)基由豆粕粉、玉米淀粉、玉米漿、牛肉膏、蛋白胨、葡萄糖、無機(jī)鹽、蛋白酶、淀粉酶與水制成，各組分的用量為：豆粕粉63~74g/L，玉米淀粉82~90g/L，玉米漿5~7g/L，牛肉膏2~3g/L，蛋白胨8~12g/L，葡萄糖8~12g/L，蛋白酶2~3g/L，淀粉酶2~3g/L，無機(jī)鹽5.73~11.08g/L，其中，蛋白酶的酶活力為1800~2000U/g，淀粉酶的酶活力為1800~2000U/g。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的枯草芽孢桿菌制劑的制備方法，其特征在于，所述枯草芽孢桿菌用發(fā)酵培養(yǎng)基中無機(jī)鹽為：氯化鈉2~4g/L，碳酸鈣3~5g/L，磷酸氫二鉀0.4~1.2g/L，氯化鐵0.3~0.8g/L，硫酸錳0.03~0.08g/L。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的枯草芽孢桿菌制劑的制備方法，其特征在于，所述枯草芽孢桿菌用發(fā)酵培養(yǎng)基的制備包括以下步驟：將豆粕粉、玉米粉與水混勻，加入蛋白酶酶解，再加入淀粉酶酶解，加入玉米漿、牛肉膏、蛋白胨、葡萄糖、無機(jī)鹽，混勻，即可。

4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的枯草芽孢桿菌制劑的制備方法，其特征在于，所述蛋白酶酶解的溫度為40~45℃，時間為2~3h，所述淀粉酶酶解的溫度為65~70℃，時間為2~3h。

5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的枯草芽孢桿菌制劑的制備方法，其特征在于，所述枯草芽孢桿菌種子液的濃度為1~10億cfu/mL。

6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的枯草芽孢桿菌制劑的制備方法，其特征在于，所述接種的體積百分比為8~12%。

7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的枯草芽孢桿菌制劑的制備方法，其特征在于，所述發(fā)酵培養(yǎng)的攪拌速度為170~240r/min。

8.根據(jù)權(quán)利要求1-7中任一項(xiàng)所述的枯草芽孢桿菌制劑的制備方法，其特征在于，所述種子液由包括以下步驟的方法制備：

（1）將枯草芽孢桿菌菌種接種到一級種子培養(yǎng)基中，37~40℃培養(yǎng)6~8h，得到種子培養(yǎng)液；

（2）將步驟（1）所得種子培養(yǎng)液以體積百分比1-5%接種到二級種子培養(yǎng)基中，37~40℃培養(yǎng)4~6h。