[發明專利]提高微生物轉化生成乳糖酸的方法

有效

• 申請號: 202010233506.2
• 申請日: 2020-03-30
• 公開（公告）號: CN111172206B
• 公開（公告）日: 2023-06-16
• 發明（設計）人: 劉加林;霍蕭勇;劉加海;方朝杰;張淵源
• 申請（專利權）人: 杭州巴洛特生物科技有限公司
• 主分類號: C12P7/58
• 分類號: C12P7/58;C12N1/20;C12R1/39
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

1.提高微生物轉化生成乳糖酸的方法，其特征在于，所述方法包括如下步驟：

步驟1）一次發酵：將熒光假單胞菌活化，然后接種到種子培養基上進行培養，得到熒光假單胞菌種子液，將熒光假單胞菌種子液按照5-10％的接種量接種于含有發酵培養基的發酵罐中進行發酵培養20-24h，然后添加促進培養基；繼續發酵24-36h，停止發酵，得到發酵液；整個發酵過程中，通過流加氨水控制pH為6.0-6.2；

所述促進培養基的制備方法為：將木質素和氯化鈉按照1:?50-100的質量比混勻制得；

所述促進培養基與發酵培養基的比例為：2-3g：1L；

步驟2）二次發酵：將一次發酵的發酵液進行陶瓷膜過濾，收集濾液和濕菌體，將濕菌體打回發酵罐，然后添加二次發酵培養基，繼續發酵培養10-14h，停止發酵，將二次發酵液進行過濾，收集濾液；合并兩次濾液用于分離提取乳糖酸。

2.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，所述種子培養基為：按照重量百分比，5%乳糖、2%葡萄糖、1%蛋白胨、0.2%氯化鉀、0.1%七水硫酸鎂，余量為無菌水。

3.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，所述發酵培養基為：按照重量百分比，15%乳糖、2%玉米漿、1%甘油、0.5%磷酸氫二鉀、0.2%七水硫酸鎂、0.01%七水硫酸亞鐵、0.001%VB3，余量為無菌水。

4.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，所述二次發酵培養基為：按照重量百分比，10%乳糖、0.5%玉米漿、0.3%磷酸氫二鉀、0.1%七水硫酸鎂、0.01%七水硫酸亞鐵、0.001%VB3，余量為無菌水。

5.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，所述陶瓷膜的截留分子量為1萬Da。

6.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，所述二次發酵培養基和濕菌體的體積比為3-5:1。

7.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，所述促進培養基與發酵培養基的比例為：3g：1L。

8.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，所述二次發酵培養基和濕菌體的體積比為4:1。