[發明專利]mOrange和vp28穿梭載體富集至鹵蟲無節幼體的方法在審
| 申請號： | 202010222429.0 | 申請日： | 2020-03-26 |
| 公開（公告）號： | CN111394381A | 公開（公告）日： | 2020-07-10 |
| 發明（設計）人： | 賈睿;徐楊;彭穩;何培民 | 申請（專利權）人： | 上海海洋大學 |
| 主分類號： | C12N15/70 | 分類號： | C12N15/70;C12N15/65 |
| 代理公司： | 上海伯瑞杰知識產權代理有限公司 31227 | 代理人： | 胡永宏 |
| 地址： | 201306 上*** | 國省代碼： | 上海;31 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | morange vp28 穿梭 載體 富集 至鹵蟲無節 幼體 方法 | ||
【權利要求書】：
1.一種mOrange和vp28穿梭載體富集至鹵蟲無節幼體的方法，其特征在于：其包括如下步驟：
(1)、根據GenBank上檢索到的mOrange和vp28的基因，經過序列組合、設計得到mOrange和vp28融合基因，其堿基序列為SEQ ID.NO.3，再進行密碼子優化，得到優化后的mOrange和vp28融合基因，其堿基序列為SEQ ID.NO.4；
(2)、步驟(1)的優化后的mOrange和vp28融合基因和pRL489質粒連接，構建mOrange和vp28穿梭載體并轉入大腸桿菌，得到含有pRL489-vp28-mOrange質粒的大腸桿菌；
(3)、將步驟(2)的含有pRL489-vp28-mOrange質粒的大腸桿菌喂食到鹵蟲無節幼體內；
其中，在步驟(2)中，所述大腸桿菌在含0.5wt％甲醛的pH為7.4的磷酸鹽緩沖溶液內滅活，之后反復沖洗。
2.根據權利要求1所述的方法，其特征在于：步驟(1)中，mOrange的氨基酸序列為SEQID.NO.1。
3.根據權利要求1所述的方法，其特征在于：步驟(1)中，vp28的氨基酸序列為SEQID.NO.2。
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