[發明專利]一種新型冠狀病毒全基因組捕獲方法、引物組以及試劑盒有效
| 申請號: | 202010219661.9 | 申請日: | 2020-03-25 |
| 公開(公告)號: | CN111118226B | 公開(公告)日: | 2021-04-02 |
| 發明(設計)人: | 張滋婷;韓月婷;陳文兵 | 申請(專利權)人: | 北京微未來科技有限公司 |
| 主分類號: | C12Q1/70 | 分類號: | C12Q1/70;C12Q1/6869;C12N15/11 |
| 代理公司: | 北京領科知識產權代理事務所(特殊普通合伙) 11690 | 代理人: | 張丹 |
| 地址: | 100085 北京市昌平區*** | 國省代碼: | 北京;11 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 一種 新型 冠狀病毒 基因組 捕獲 方法 引物 以及 試劑盒 | ||
1.一種新型冠狀病毒檢測的序列組合,其特征在于,所述序列組合包括針對SARS-CoV-2分離毒株基因組全序列設計的98對疊瓦式PCR擴增引物,所述98對疊瓦式PCR擴增引物序列依次為SEQ ID No.1-196。
2.一種試劑盒,其包含新型冠狀病毒檢測的序列組合,其特征在于,所述序列組合包括針對SARS-CoV-2分離毒株基因組全序列設計的98對疊瓦式PCR擴增引物,所述98對疊瓦式PCR擴增引物序列依次為SEQ ID No.1-196。
3.一種新型冠狀病毒檢測的測序片段捕獲方法,其特征在于,具體步驟包括:
(1)RNA提取:將標本中的冠狀病毒進行病毒RNA提取;
(2)引物設計與PCR擴增:使用針對SARS-CoV-2保守區域設計的98對擴增引物,所述引物序列依次為SEQ ID No.1-196,應用RT-PCR擴增體系,取步驟(1)提取的病毒RNA,進行快速擴增;
(3)測序:擴增反應結束后,將PCR反應中得到大小不同的冠狀病毒基因片段,直接上機進行測序,所述的測序片段捕獲方法為非疾病的診斷方法。
4.根據權利要求3所述的測序片段捕獲方法,其特征在于,所述步驟(1)的RNA提取的最終體積為20-50ul。
5.根據權利要求3或4所述的測序片段捕獲方法,其特征在于,所述步驟(1)的RNA提取后獲得的病毒RNA為Ct值低于27的核酸樣品。
6.權利要求1所述的序列組合在制備檢測新型冠狀病毒試劑盒中的用途。
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