[發明專利]一種微生物的快速檢測方法

在審

• 申請號: 202010218848.7
• 申請日: 2020-03-25
• 公開（公告）號: CN111206066A
• 公開（公告）日: 2020-05-29
• 發明（設計）人: 戴桂蘭
• 申請（專利權）人: 杭州蒙圖機械設計有限公司
• 主分類號: C12Q1/10
• 分類號: C12Q1/10;C12Q1/06
• 代理公司: 杭州正南創想專利代理事務所(普通合伙) 33360
• 代理人: 盧斌鋒

本發明公開了一種微生物的快速檢測方法，包括如下步驟：S1、樣品處理：取樣品25mL放入含有225mL滅菌磷酸緩沖液稀釋液或生理鹽水的取樣罐或均質杯內，制成1:10的樣品勻液，用1mL滅菌吸管吸取1:10樣品勻液1mL，注入含有9mL稀釋液的試管內，振搖后成為1:100的樣品勻液；S2、接種：食品選2?3個適宜的稀釋度進行檢測，將大腸菌群測試片置于平坦實驗臺面，揭開上層膜。本發明主要采用大腸菌群測試片進行快速檢測，大腸菌群測試片含有選擇性培養基、大腸菌群特異性半乳糖苷酶的顯色指示劑和高分子吸水凝膠，不但可以大大縮短檢測時間，而且檢測結果與傳統方法很接近，符合率可達90％左右，解決了現有的大腸菌群檢測耗時長，檢測效率低的問題。

技術領域

本發明涉及微生物檢測技術領域，具體為一種微生物的快速檢測方法。

背景技術

大腸菌群主要包括暢桿菌科中韻埃希氏菌屬、檸檬酸桿菌屬、魔雷伯氏菌屬和腸桿菌屬。這些屬的細菌均來自于人和溫血動物的腸道，需氧與兼性厭氧，不形成芽孢；在35～37℃條件下，48小時內能發酵乳糖聲酸產氣，革蘭氏陰性。大腸菌群中以埃希氏菌屬為主，埃希氏菌屬教俗稱為典型大腸桿菌。大腸菌群都是直接或間接地來自人和溫血動物的糞便。本群中典型大腸桿菌以外的菌屬，除直接來自糞便外，也可能來自典型大腸桿菌排出體外7-30天后在環境中的變異。所以食品中檢出大腸菌群表示食品受到污染，其中典型大腸桿菌為糞便近期污染，其他菌屬則可能為糞便的陳舊污染

大腸菌群是評價食品衛生質量的重要指標之一，目前已被廣泛應用于食品衛生檢驗工作中。大腸菌群多存在于溫血動物糞便、人類經常活動的場所以及有糞便污染的地方，大腸菌群數的高低，表明了食品及食品生產過程中受污染的程度。現有的大腸菌群檢測耗時長，檢測效率低，為此，我們提出一種微生物的快速檢測方法。

發明內容

本發明的目的在于提供一種微生物的快速檢測方法，以解決上述背景技術中提出的問題。

為實現上述目的，本發明提供如下技術方案：一種微生物的快速檢測方法，包括如下步驟：

S1、樣品處理：取樣品25mL放入含有225mL滅菌磷酸緩沖液稀釋液或生理鹽水的取樣罐或均質杯內，制成1:10的樣品勻液，用1mL滅菌吸管吸取1:10樣品勻液1mL，注入含有9mL稀釋液的試管內，振搖后成為1:100的樣品勻液；

S2、接種：食品選2-3個適宜的稀釋度進行檢測，將大腸菌群測試片置于平坦實驗臺面，揭開上層膜，用無菌吸管吸取1mL樣品勻液慢慢均勻地滴加到紙片上，然后將上層膜緩慢蓋下，靜置10s左右使培養基凝固，每個稀釋度接種兩片，同時做一片空白陰性對照；

S3、培養：將測試片疊在一起放回原自封袋中，并封口，透明面朝上水平置于恒溫培養箱內，堆疊片數不超過12片，培養溫度為35-37℃，培養15-24h；

S4、計數：培養后紙片上的藍色菌落為大腸菌群菌落，選擇菌落數在15-150CFU之間的紙片進行計數。

優選的，所述步驟S1中樣品勻液的pH值控制在6.5-7.5之間，采用1mol/L的氫氧化鈉或1mol/L的鹽酸調整樣品勻液的pH值。

優選的，所述步驟S2中含菌量少的液體樣品可直接吸取原液進行檢測，所述含菌量少的液體樣品包括飲用純水和礦泉水。

優選的，所述步驟S4中兩個稀釋度的測試片上的菌落數均在15-150CFU之間時，則取其平均菌落數乘以稀釋倍數為檢測結果，即為每毫升樣品中的大腸菌群菌落數。

優選的，所述步驟S4中所有稀釋度的測試片上的菌落數都小于15CFU時，則計數稀釋度最低的測試片上的平均菌落乘以稀釋倍數為檢測結果。

優選的，所述步驟S4中所有稀釋度的測試片上均無菌落生長時，則以小于1乘以最低稀釋倍數為檢測結果。