[發(fā)明專(zhuān)利]一種微生物的快速檢測(cè)方法

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• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 202010218848.7
• 申請(qǐng)日: 2020-03-25
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN111206066A
• 公開(kāi)（公告）日: 2020-05-29
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 戴桂蘭
• 申請(qǐng)（專(zhuān)利權(quán)）人: 杭州蒙圖機(jī)械設(shè)計(jì)有限公司
• 主分類(lèi)號(hào): C12Q1/10
• 分類(lèi)號(hào): C12Q1/10;C12Q1/06
• 代理公司: 杭州正南創(chuàng)想專(zhuān)利代理事務(wù)所(普通合伙) 33360
• 代理人: 盧斌鋒

1.一種微生物的快速檢測(cè)方法，其特征在于：包括如下步驟：

S1、樣品處理：取樣品25mL放入含有225mL滅菌磷酸緩沖液稀釋液或生理鹽水的取樣罐或均質(zhì)杯內(nèi)，制成1:10的樣品勻液，用1mL滅菌吸管吸取1:10樣品勻液1mL，注入含有9mL稀釋液的試管內(nèi)，振搖后成為1:100的樣品勻液；

S2、接種：食品選2-3個(gè)適宜的稀釋度進(jìn)行檢測(cè)，將大腸菌群測(cè)試片置于平坦實(shí)驗(yàn)臺(tái)面，揭開(kāi)上層膜，用無(wú)菌吸管吸取1mL樣品勻液慢慢均勻地滴加到紙片上，然后將上層膜緩慢蓋下，靜置10s左右使培養(yǎng)基凝固，每個(gè)稀釋度接種兩片，同時(shí)做一片空白陰性對(duì)照；

S3、培養(yǎng)：將測(cè)試片疊在一起放回原自封袋中，并封口，透明面朝上水平置于恒溫培養(yǎng)箱內(nèi)，堆疊片數(shù)不超過(guò)12片，培養(yǎng)溫度為35-37℃，培養(yǎng)15-24h；

S4、計(jì)數(shù)：培養(yǎng)后紙片上的藍(lán)色菌落為大腸菌群菌落，選擇菌落數(shù)在15-150CFU之間的紙片進(jìn)行計(jì)數(shù)。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種微生物的快速檢測(cè)方法，其特征在于：所述步驟S1中樣品勻液的pH值控制在6.5-7.5之間，采用1mol/L的氫氧化鈉或1mol/L的鹽酸調(diào)整樣品勻液的pH值。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種微生物的快速檢測(cè)方法，其特征在于：所述步驟S2中含菌量少的液體樣品可直接吸取原液進(jìn)行檢測(cè)，所述含菌量少的液體樣品包括飲用純水和礦泉水。

4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種微生物的快速檢測(cè)方法，其特征在于：所述步驟S4中兩個(gè)稀釋度的測(cè)試片上的菌落數(shù)均在15-150CFU之間時(shí)，則取其平均菌落數(shù)乘以稀釋倍數(shù)為檢測(cè)結(jié)果，即為每毫升樣品中的大腸菌群菌落數(shù)。

5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種微生物的快速檢測(cè)方法，其特征在于：所述步驟S4中所有稀釋度的測(cè)試片上的菌落數(shù)都小于15CFU時(shí)，則計(jì)數(shù)稀釋度最低的測(cè)試片上的平均菌落乘以稀釋倍數(shù)為檢測(cè)結(jié)果。

6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種微生物的快速檢測(cè)方法，其特征在于：所述步驟S4中所有稀釋度的測(cè)試片上均無(wú)菌落生長(zhǎng)時(shí)，則以小于1乘以最低稀釋倍數(shù)為檢測(cè)結(jié)果。

7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種微生物的快速檢測(cè)方法，其特征在于：所述步驟S4中最高稀釋度的測(cè)試片上的菌落數(shù)大于150CFU個(gè)時(shí)，計(jì)數(shù)最高稀釋度的測(cè)試片上的平均菌落數(shù)乘以稀釋倍數(shù)為檢測(cè)結(jié)果。

8.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種微生物的快速檢測(cè)方法，其特征在于：所述步驟S4中最高稀釋度的測(cè)試片上的菌落數(shù)大于150CFU個(gè)時(shí)，計(jì)數(shù)一個(gè)或兩個(gè)具有代表性的方格內(nèi)的菌落數(shù)，換算成單個(gè)方格內(nèi)的菌落數(shù)后乘以紙片生長(zhǎng)面積即為測(cè)試片上估算的菌落數(shù)，紙面生長(zhǎng)面積為20cm²。