[發(fā)明專利]一種混源萜生物堿及其抗寨卡病毒用途

在審

• 申請?zhí)枺?/td>: 202010217615.5
• 申請日: 2020-03-25
• 公開（公告）號: CN111440200A
• 公開（公告）日: 2020-07-24
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 林文翰;劉東;李勇
• 申請（專利權(quán)）人: 北京大學(xué);中國大洋礦產(chǎn)資源研究開發(fā)協(xié)會
• 主分類號: C07D519/00
• 分類號: C07D519/00;A61P31/14;A61K31/407;C12P17/18;C12N1/14;C12R1/645
• 代理公司: 北京萬象新悅知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司 11360
• 代理人: 李稚婷

本發(fā)明公開了一種混源萜生物堿及其抗寨卡病毒用途。該混源萜生物堿分離自海洋真菌黑葡萄穗霉(Stachybotrys chartarum)的發(fā)酵物，體外實驗表明，所述混源萜生物堿具有顯著的抗寨卡病毒活性，具有進一步開發(fā)成新型抗病毒藥物的潛力。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬于藥學(xué)領(lǐng)域，涉及一種新的混源萜生物堿及其制備方法，本發(fā)明還涉及所述化合物及其組合物的抗寨卡病毒用途。

背景技術(shù)

寨卡病毒(ZIKV)是一種黃病毒科黃病毒屬RNA病毒，最早于1947年分離自烏干達寨卡森林的恒河猴血清樣本，主要通過伊蚊進行傳播，曾于2015年在巴西引起100多萬感染病例。截至2019年5月，該病毒已迅速傳播至84個國家和地區(qū)，成為世界范圍內(nèi)的公共衛(wèi)生問題。

到目前為止，還沒有特定的抗病毒藥物被批準(zhǔn)用于治療ZIKV感染，臨床上多使用常用藥物來緩解癥狀，而ZIKV抑制劑的發(fā)現(xiàn)策略也主要集中于從小分子化合物庫中篩選藥物先導(dǎo)化合物，但僅有極少數(shù)化合物進入臨床試驗階段，對于新型ZIKA抑制劑的發(fā)現(xiàn)仍迫在眉睫。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明在研究一株海洋來源真菌葡萄穗霉(Stachybotrys chartarum)的化學(xué)成分的過程中，分離并鑒定了一種結(jié)構(gòu)新穎的混源萜生物堿類化合物。體外抗ZIKV活性評價結(jié)果初步表明，該化合物具有顯著的抗ZIKV活性，具有新型抗病毒先導(dǎo)化合物開發(fā)潛力。

本發(fā)明提供的新型混源萜生物堿類化合物，具有式I所述的化學(xué)結(jié)構(gòu)：

本發(fā)明第二方面提供上述混源萜生物堿類式I化合物的制備方法，包括如下步驟：

1)以海洋真菌黑葡萄穗霉(Stachybotrys chartarum)為菌種，發(fā)酵培養(yǎng)獲得含式I化合物的發(fā)酵物；

2)將發(fā)酵物用有機溶劑提取后，通過色譜法分離與純化，制備得到式Ⅰ化合物。

上述步驟1)中，優(yōu)選采用固體發(fā)酵培養(yǎng)黑葡萄穗霉(Stachybotrys chartarum)，室溫下避光培養(yǎng)20～40天，得到固體發(fā)酵物。在本發(fā)明的一個實施例中采用人工海水浸泡大米，然后高壓濕熱滅菌配制的大米培養(yǎng)基。

上述步驟2)中，優(yōu)選的，用乙酸乙酯提取發(fā)酵物得到浸膏，然后依次利用硅膠柱色譜、反向柱色譜分離和高效液相色譜純化，從發(fā)酵物浸膏中分離純化出式I化合物。其中所述硅膠柱色譜優(yōu)選以二氯甲烷/甲醇為流動相進行梯度洗脫，得到的洗脫組分經(jīng)ODS反相柱色譜分離，再利用半制備高效液相色譜進一步分離純化，得到式I化合物。

在本發(fā)明的一個實施例中，將發(fā)酵物搗碎后用乙酸乙酯超聲提取多次，減壓濃縮得浸膏；浸膏用等比例硅膠扮樣，利用減壓硅膠柱色譜以二氯甲烷/甲醇為流動相梯度洗脫；二氯甲烷/甲醇(10:1，v/v)洗脫組分用ODS柱色譜以70％～100％甲醇水溶液為流動相梯度洗脫，90％甲醇水溶液洗脫組分用半制備高效液相色譜以68％乙腈水溶液為流動相等度洗脫，純化得到式I化合物。

本發(fā)明還提供了式I化合物及其可藥用鹽在制備抗病毒藥物中的應(yīng)用。

本發(fā)明還提供了一種抗病毒組合物，包含式I化合物或其可藥用鹽。

上述抗病毒藥物和抗病毒組合物中，所述病毒為寨卡病毒。

所述抗病毒藥物或抗病毒組合物還包括藥學(xué)上可接受的載體或稀釋劑。所述抗病毒藥物或抗病毒組合物可以是藥學(xué)上可接受的任意一種劑型，包括具有適當(dāng)組成的固態(tài)制劑(片劑、丸劑、膠囊劑、顆粒劑等)、液體制劑(溶液劑、混懸劑、乳劑等)

本發(fā)明公開的式I化合物可以通過真菌發(fā)酵制備，產(chǎn)量高，綠色環(huán)保，利于可持續(xù)的工業(yè)化生產(chǎn)。通過體外實驗證明了本發(fā)明的式I化合物抗寨卡病毒效果顯著，具有進一步開發(fā)成新型抗病毒藥物的潛力。

附圖說明